以假病毒为基础的HIV-1中和抗体检测体系的建立以及初步应用

目的建立以假病毒为基础的HIV-1中和抗体检测方法，并对其进行初步应用。方法从重组质粒中扩增出gp160基因片段，并克隆到pcDNA3．1质粒上，酶切鉴定得到阳性克隆。将阳性克隆分别和pSG3／Xenv质粒共转染获得假病毒。用假病毒分别检测单克隆抗体和HIV-1抗体阳性血清的中和活性。结果成功地获得了4株假病毒CHB01、CHB02、CHBC03和CHAE04。单克隆抗体4E10可以中和4株假病毒；单克隆抗体2F5不能中和CHBC03假病毒株，但可以中和CHB01、CHB02和CHAE04假病毒株；单克隆抗体IgG1b12可以中和CHBC03、CHB01和CHB02假病毒株，则不能中和CHAE04假病毒株。43份HIV-1抗体阳性血清中针对不同假病毒的中和抗体明显不同。结论所获得的假病毒可以用于中和抗体的检测，但不同假病毒株的中和特性不同。