MicroRNA通用探针法的建立及布鲁氏菌病患者血浆microRNA-146a的检测

目的建立一种通用、敏感、特异的microRNA检测方法,用于检测布鲁氏菌病患者血浆microRNA-146a的表达,探讨其作为诊断标识的可能性。方法以microRNA-146a模拟物为待检物,通过正交实验设计,对退火温度、探针浓度、试剂盒选择进行优化,建立特异敏感的通用检测方法;从布病患者和正常健康人血浆样本提取RNA,应用通用探针法进行检测,比较布病患者血浆microRNA-146a的表达变化。结果建立了优化的通用探针法,与染料法相比特异性更强、扩增范围更大,具有通用检测能力。应用通用探针法检测布鲁氏菌病患者血浆microRNA-146a,发现布病患者血浆中microRNA-146a的表达被抑制(P<0.01),表明其可能作为布病诊断的分子标识。结论经优化的通用探针法是一种通用、敏感、特异的检测方法,可用于microRNA的检测,microRNA-146a可能作为布病诊断的标识分子。