全自动微生物分析系统对布鲁杆菌属和种鉴定效果的研究

目的 鉴定与分析布鲁杆菌的生化特征,评价对全自动微生物分析系统的鉴定效果和临床意义.方法 17株标准菌株和121株实验菌株来自于中国疾病预防控制中心传染病预防控制所布鲁杆菌病（简称布病）研究室菌种库,实验菌株为全国26个省（市、自治区）1957-2014年历次流行自布病患者和羊、黄羊、岩羊、牛、猪分离的布鲁杆菌菌株.用GN鉴定卡在VITEK2 COMPACT全自动微生物分析系统上对标准菌株和实验菌株进行生化检测,根据布鲁杆菌属和种的生化阳性鉴定标准,通过对比分析,获得布鲁杆菌属和种的生化阳性鉴定结果.对系统鉴定异常的菌种,采用传统鉴定方法进行氧化酶、脲酶、动力、硫化氢测定和碱性复红敏感性试验、噬菌体裂解试验及A/M单相特异性血清凝集试验进行菌种的重新判定.结果 对138株布鲁杆菌菌株的全自动微生物分析系统生化鉴定结果显示,布鲁杆菌属的主要阳性鉴定指标为L-脯氨酸芳胺酶（ProA）、酪氨酸芳胺酶（TyrA）、尿素酶（URE）、氨基乙酸芳胺酶（GlyA）、乳酸盐产碱（1LATK）、ELLMAN （ELLM）;与系统值比较,全部菌株生化功能相似率为97.99％（135.23/138）,其中标准菌株为96.71％（16.44/ 17）,实验菌株为98.17％（118.79/121）;菌株鉴定需要的时间为6.1 ～ 7.7 h,其中标准菌株为7.3 h,实验菌株为6.9 h.区分是否为布鲁杆菌属的阳性鉴定指标为ProA、TyrA、URE、GlyA;区分羊种布鲁杆菌的阳性指标为ELLM;区分牛种布鲁杆菌的阳性指标为1LATK;区分猪种布鲁杆菌的阳性指标为丙氨酸-苯丙氨酸-脯氨酸芳胺酶（APPA）;犬种无明显的阳性指标.从实验菌株中鉴定出4株人苍白杆菌,传统方法显示,氧化酶阳性、脲酶阳性、硫化氢阳性、动力阴性;碱性复红敏感性试验有抗性2株（牛种）,敏感2株（猪种）;硫堇实验敏感2株（牛种）,有抗性2株（猪种）;噬菌体裂解试验阳性2株（牛种）,阴性2株（猪种）.A/M因子单相特异性血清凝集试验,牛种布鲁杆菌（A）阳性,羊种布鲁杆菌（M）阴性,排除人苍白杆菌,最终鉴定均为布鲁杆菌种.结论 全自动微生物分析系统在鉴定布鲁杆菌时速度快,可靠性较高,对不同菌株属和种鉴定的主要阳性指标明确,可用于临床诊断.当鉴定为人苍白杆菌时,需与布鲁杆菌进行鉴别,以免误诊.

内蒙古乌兰察布市人间布鲁杆菌病病原菌的分离鉴定

目的分离鉴定内蒙古乌兰察布市人间布鲁杆菌病（简称布病）病原菌，为乌兰察布市布病防控提供参考。方法采集布病患者的血液样本，用双相培养瓶进行布鲁杆菌分离培养，获得4株可疑布鲁杆菌菌株。以牛种标准菌株544A、羊种标准菌株16M、猪种菌标准株1330S为阳性对照，以大肠埃希菌0：157为阴性对照，用传统的布鲁杆菌鉴定方法、布鲁杆菌属特异性聚合酶链式反应（BCSP31-PCR）和多重荧光定量PCR方法进行待测菌株种型鉴定。结果本次试验分离到4株可疑布鲁杆菌菌株，经传统方法鉴定为布鲁杆菌，BCSP31-PCR和多重荧光定量PCR扩增均为阳性，其中3株为羊3型，1株为羊1型。结论从乌兰察布市布病患者体内成功地分离出布病病原菌，证实了乌兰察布市人间布病的主要传染源为染疫的羊。