34株慢速生长非结核分枝杆菌针对一线和二线抗结核药物的敏感性试验研究（英文）

慢速生长分枝杆菌主要分布于土壤、污水等环境中,这类细菌可对人类致病,尤其是肺部疾病。本研究中,通过分析一线和二线抗结核药物的药敏试验,为了找到治疗慢速生长分枝杆菌病的最佳药物。结果表明,异烟肼(4/34)是敏感性最低的药物,只对Mycobacterium szulgai,Mycobacterium celatum,Mycobacterium duvalii和Mycobacterium elephantis敏感。利福平(13/34)和乙胺丁醇(14/34)有相似的敏感性。链霉素(27/34)是一线抗结核药物中效果最好的,对绝大多数的试验菌株都有较好的活性。氧氟沙星(23/34),卡那霉素(26/34)和妥布霉素(26/34)具有强有力的抗菌活性。环丙沙星(31/34),左氧氟沙星(31/34),阿米卡星(33/34)和卷曲霉素(33/34)具有极好的抗慢速生长分枝杆菌活性。莫西沙星(34/34)的抗菌活性最强。在本试验的测试慢速生长分枝杆菌中,Mycobacterium simiae和Mycobacterium africanum对更多的药物耐药。Mycobacterium szulgai和Mycobacterium duvalii对一线和二线抗结核药物都有较好的活性。总之,二线抗结核药物是治疗慢速生长分枝杆菌的良好药物,可被广泛用于慢速生长分枝杆菌病的治疗。

快速生长分枝杆菌标准株对10种新型抗菌药物的敏感性（英文）

目的越来越多的快速生长分枝杆菌对于常规抗结核药物耐药,并且可以引起种类繁多的疾病。本研究主要聚焦在快速生长分枝杆菌的标准菌株对新型抗菌药物的敏感性实验方面。方法在体外,应用阳离子调节的MH微量肉汤稀释法,针对40种快速生长分枝杆菌进行10种新型抗菌药物的敏感性实验。结果结果显示氯法齐明（39/40）具有最好的抗菌活性。司帕沙星（37/40）和头孢美唑（36/40）具有强大的抗菌活性。罗红霉素（33/40）、阿奇霉素（31/40）和利福喷丁（29/40）具有较好的抗菌活性。利福布丁（16/40）对于实验菌株具有中等程度的抗菌活性。氨苯砜（4/40）和帕司烟肼（9/40）具有很低的抗菌活性。氨硫脲（1/40）的抗菌活性最低。在40株快速生长分枝杆菌的标准株当中,Mycobacterium aurum,Mycobacterium duvalii和Mycobacterium parafortuitum对于测试药物的敏感性最高,可达80%的敏感性。Mycobacterium massiliense,Mycobacterium boenickei和Mycobacterium porcinum的药物敏感性最低,只有30%的敏感性。其它物种有40%~70%的敏感性。结论通过对40株快速生长分枝杆菌标准株的药物敏感性测试,可以为临床医生选择和优化抗菌药物治疗方案提供一定的帮助和依据。

贵阳市甲型副伤寒沙门菌脉冲电场凝胶电泳分型分析

目的了解贵阳市甲型副伤寒沙门菌的分子流行病学特征,分析菌株的相似性,为追踪传染来源、查找传播途径提供线索。方法用脉冲电场凝胶电泳(pulsed field gelelectrophoresis,PFGE)方法进行分型。结果根据细菌染色体DNA的SpeI酶切图谱,将贵阳地区146株甲型副伤寒沙门菌分成10个PFGE带型,1型32株占21.9%,2型73株占50.0%,3型13株占8.9%,4型7株占4.8%,5型14株占9.6%,6型、7型、8型和9型各1株,各占0.7%,10型3株占2.7%,各型之间的相似性在98.1%～72.0%。暴发株24株被分为5个PFGE带型,1型占54.2%,带菌者1株为1型。各年菌株的PFGE带型不尽相同,1型和2型为常年流行带型。高流行区县的甲型副伤寒菌株被分为9个PFGE带型。结论贵阳地区甲型副伤寒沙门菌流行复杂以2型和1型为优势流行带型,提示存在同一克隆群的菌株广泛传播。该研究进一步证实PFGE是一种发现或预警暴发的可行服务手段。

基于宏基因组学的新疆牧场牛潜在人兽共患病原菌调查

目的调查新疆牧场规模化养殖牛携带的细菌多样性以及潜在细菌性人兽共患病致病菌种类,为牛规模化养殖过程中人兽共患病的防治提供科学依据。方法选取新疆地区规模化养殖牧场牛群,同时采集牛鼻咽拭子和牛肛拭子样品,提取全基因组DNA进行宏基因组分析。采用宏基因组二代测序,采用比对Minikrakenv2数据库及生物信息学方法,对该地区牛携带的微生物菌群及其潜在病原菌种类进行分析。结果宏基因组检测结果显示,所有牛样品中微生物菌群均以细菌为主。不同类别牛样品比较发现,牛肛拭子样品和牛鼻咽拭子样品均以厚壁菌门、放线菌门、变形菌门和拟杆菌门占主导地位,但两种类别牛样品的优势菌属各不相同,两者共有的优势菌属为异壁放线菌菌属和芽孢杆菌属。样品中共发现蜡样芽孢杆菌、大肠杆菌、猪链球菌、肺炎链球菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯氏菌、空肠弯曲杆菌、化脓性链球菌和多杀巴斯德杆菌等9种人兽共患病原菌,其中大部分都是食源性细菌性致病菌。PCoA和ANOSIM生物信息学分析结果表明,两组样品、两个地区牛携带的细菌群落多样性以及潜在的人兽共患病原菌之间的差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论新疆地区规模化养殖牧场牛鼻咽拭子和牛肛拭子样品携带的细菌结构均呈现较丰富的多样性,并检出了以食源性传播为主的人兽共患病原菌,存在一定的食品安全和疾病传播隐患。

基于宏基因组学的新疆牧场羊潜在人兽共患病原菌调查

目的探究新疆牧场羊携带微生物多样性及潜在人兽共患病原菌种类,为有效防治人兽共患病提供理论依据。方法选取新疆喀什和石河子市牧场羊群,同期采集羊口咽拭子和肛拭子样品,提取DNA,采用宏基因组二代测序,比对Minikrakenv2数据库,测序结果进行物种注释、多样性和差异性分析,了解两地区羊携带的细菌种类。结果共采集羊口咽拭子72份和肛拭子231份。门水平上,两样品占主导地位的微生物为变形菌门、拟杆菌门和厚壁菌门;属水平上,两样品的优势菌属均不相同,共检出10种主要以食源性传播为主的人兽共患病原菌:大肠弯曲杆菌、空肠弯曲杆菌、大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌、鲍曼不动杆菌、沙门氏菌、铜绿假单胞菌、蜡样芽孢杆菌、化脓性链球菌和猪链球菌。经主坐标(PCoA)分析和相似性(ANOSIM)分析,两地区间羊携带细菌和潜在人兽共患病细菌的差异均有统计学意义(P<0.05)。结论新疆地区牧场羊口咽部和肛门部菌群存在多样性及地区差异性,检出的人兽共患病原菌以食源性传播为主,存在食品安全和疾病传播风险。

中国四省甲型副伤寒分离株脉冲场凝胶电泳分析及分型数据库建立

目的对中国4个甲型副伤寒流行省份的分离株进行标准化脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型分析。方法对来自4个省的甲型副伤寒沙门菌利用XbaⅠ酶切染色体DNA进行PFGE分析,利用BioNumerics建立数据库和进行相似性聚类。结果分离自1998-2002年的89株甲型副伤寒分离株共有11种PFGE带型,这些菌株中具有优势带型。有3种带型相似性在96．3％,这3种带型的菌株占到分析菌株的86．5％,并在不同省份和年度中出现。结论建立了中国甲型副伤寒沙门菌的用于网络监测分析的PFGE技术和数据库,近年中国部分省份的甲型副伤寒沙门菌分离株PFGE型别集中,存在同型菌株的广泛流行。

中国脑膜炎奈瑟菌nadA基因多态性分析

目的了解我国脑膜炎奈瑟菌(Neisseria meningitidis,Nm)主要黏附蛋白(Neisseria adhesion A,NadA)编码基因nadA的多态性特征,以期研究我国主要流行Nm菌株NadA蛋白的流行病学意义及NadA蛋白作为脑膜炎球菌蛋白疫苗候选蛋白研发的可行性。方法选取我国26个省(市、自治区)1963-2012年间不同血清群代表性Nm菌株230株,采用多位点序列分型(muliti-locus sequence typing,MLST)、PCR、斑点杂交、基因测序等方法,检测Nm菌株基因型特征、nadA基因分布的多态性及其基因序列特征,利用BioEdit、Mega 4.0等软件对nadA基因序列进行比对分析。结果我国230株不同血清群的Nm菌株中,nadA+菌株55株,仅存在于ST-5 complex(序列群)的A群和ST-11 complex的W135群Nm菌株中,B、C及其他血清群Nm菌株nadA-。nadA+菌株基因型以variant 3(V3)型为主(54/55),包括5种亚型(NadA V3.1～3.5),同源性高达99%以上。结论我国Nm菌株中,仅ST-5complex的A群和ST-11 complex的W135群菌株存在NadA黏附蛋白,型别以variant 3型为主。B群菌株不含有NadA蛋白,variant 3型NadA蛋白不适合作为我国B群Nm(B meningococci,MenB)蛋白疫苗的候选蛋白。

血清杀菌试验和酶联免疫吸附试验测定C群脑膜炎奈瑟菌血清抗体滴度比较

目的比较血清杀菌试验（SBA）和酶联免疫吸附试验（ELISA）N定两种C群脑膜炎奈瑟菌（Nm）疫苗免疫后血清抗体滴度的差异。方法采用SBA测定75名未免疫健康成年人（40-70岁）血清、143名3-8月龄婴儿及194名3-5岁儿童NmA和C群结合疫苗或A＋C群多糖疫苗免疫前后血清中Nm杀菌抗体水平，然后用ELISA测定相应血清的Nm特异性IgG含量，并利用线性相关与回归分析两种测定结果的相关性。结果未免疫健康成年人血清中Nm杀菌抗体水平和特异性IgG含量之间的相关性较高（r=0．81433，P〈0．001）；3-8月龄婴儿和3-5岁儿童接种结合／多糖疫苗前，Nm杀菌抗体水平和特异性IgG含量之间相关性较差（3-8月龄：r=0．14064，P〉0．100／r=0．2899，P〈0．05；3-5岁：r=0．54040，P〈0．05／r=0．19436，P〈0．05），接种1剂结合疫苗后，杀菌抗体水平和特异性IgG含量之间的相关性较好（r=0．80938，P〈0．001和r=0．83723，P〈0．001）；接种多糖疫苗后，杀菌抗体水平和特异性IgG含量之间的相关性较差（r〈0．50000）。结论健康成年人血清和结合疫苗免疫后的婴幼儿血清中特异性C群NmIgG含量可以间接反映血清杀菌抗体水平，ELISA方法可以替代SBA。但ELISA检测方法不适用于3-8月龄婴儿多糖疫苗免疫后的效果评价。

白藜芦醇对细菌脂多糖耐受的THP-1细胞TNF-α启动子区的影响

目的:探讨白藜芦醇对细菌脂多糖(LPS)耐受的人原单核细胞THP-1细胞中TNF-α启动子区的影响。方法:首先建立LPS耐受THP-1细胞模型后,然后用LPS分别刺激正常THP-1细胞(对照组)、LPS耐受THP-1细胞(耐受组)、白藜芦醇处理的LPS耐受THP-1细胞(耐受+白藜芦醇组),检测各组细胞TNF-α mRNA的表达及TNF-α启动子区各转录因子的结合情况。结果:LPS刺激后,TNF-α mRNA表达在对照组细胞迅速升高,耐受组缓慢升高,而耐受+白藜芦醇组略微升高,表达量明显低于前两组(均P<0.05)。染色体免疫沉淀(ChIP)分析显示,LPS刺激前,耐受组与耐受+白藜芦醇组p65及乙酰化p65(ace-p65)、Rel B、G9a对TNF-p启动子区的结合量均明显高于对照组(均P<0.05),而p50的结合量各组细胞间无统计学差异(P>0.05);LPS刺激后,p65和ace-p65对TNF-α启动子区的结合量在对照组明显增加,而在耐受+白藜芦醇组明显降低,G9a结合量在对照组量明显降低(均P<0.05),其余转录因子较刺激前无明显改变(均P>0.05)。结论:白藜芦醇可以抑制LPS耐受的THP-1细胞中TNF-α mRNA的表达,可能部分通过抑制p65/ace-p65对TNF-α启动子区的结合。