基于hsp65基因的PCR-RFLP用于陕速鉴定分枝杆菌菌种的初步研究

目的基于hsp65基因的PCR-限制性酶切片段长度多态性（PCR-RFLP）用于快速鉴定分枝杆菌菌种的方法的建立和评价。方法选择分枝杆菌hsp65基因作为目的基因，对分枝杆菌标准株进行PCR扩增，扩增产物经HaeIH和BstpI两种限制性内切酶酶切，酶切产物采用4％MetaPhor琼脂糖凝胶电泳，根据电泳条带位置，计算条带分子量，确定不同菌种的特异指纹图谱。结果共对40种（株）分枝杆菌进行分析，6株结核分枝杆菌复合体菌株呈现两种指纹图谱，34株非结核分枝杆菌标准株均具有惟一的指纹图谱。结论基于hsp65基因的PCR-RFLP可用于分枝杆菌菌种的快速鉴定，且方法简便，易于标准化。

马赛分枝杆菌肺病一例并文献复习

目的分析马赛分枝杆菌肺病的临床特征，探讨其鉴别诊断方法。方法分析患者的临床表现及实验室检测结果，对其临床分离菌株进行细菌学检查和分子生物学鉴定，采用PCR扩增rpoB和hsp65基因片段和双向DNA测序，并与美国国立生物技术信息中心（NCBI）数据库比对进行菌种鉴定。结果患者女，72岁，体质瘦弱，因反复出现呼吸道症状而入院，既往多次治疗无效。该病例的临床分离菌株经细菌学检查和分子生物学鉴定确定为马赛分枝杆菌，rpoB和hsp65基因片段测序结果与NCBI数据库马赛分枝杆菌相应片段的同源性分别为100％和99％，结合临床表现确诊为马赛分枝杆菌肺病。药敏试验结果显示该菌株对多种药物耐药，根据药敏试验结果和患者的身体条件确定治疗方案，采用静脉滴注头孢西丁和口服阿米卡星治疗有效。结论马赛分枝杆菌肺病多发于免疫功能低下人群，其临床和影像学表现与结核病相似，通过实验室细菌学检测和菌种鉴定，可以对二者进行鉴别。