一个红细胞内同时寄生不同期间日疟原虫输入性病例1例

2012年对云南省腾冲市1例间日疟患者血样采用Care Start^(TM)疟疾快速诊断试剂盒、吉氏染色镜检和巢式PCR方法进行鉴定。Care Start^(TM)疟疾快速诊断试剂盒检测结果判定为除恶性疟原虫以外的间日疟原虫、三日疟原虫或卵形疟原虫感染。镜检结果显示,患者血样厚、薄血片中可见间日疟原虫环状体多核、多重感染现象,1个环状体有2个及以上核的占14.68%(188/1 280);同时寄生2个及以上环状体的红细胞占22.50%(288/1 280);1个红细胞内同时寄生环状体和滋养体、环状体和配子体。巢式PCR结果显示,患者血样为间日疟原虫特异性DNA片段阳性。结合检测结果、流行病学资料和临床表现,确诊该患者为输入性间日疟原虫感染病例,且一个红细胞内同时寄生不同期间日疟原虫。

中国消除疟疾的持续挑战：输入性疟疾

疟疾是严重危害人类健康的寄生虫病。我国自2010年启动消除疟疾行动计划以来,消除疟疾工作成效显著,本地感染疟疾病例数持续下降。但近年来随着我国外出务工、经商、旅游以及参与国际交流活动的人员日益增多,输入性疟疾疫情居高不下。输入性疟疾不仅危害我国人民的身体健康和生命安全,也对巩固我国消除疟疾成果构成严重挑战。本文就我国当前输入性疟疾疫情形势及其防控所面临的挑战进行分析,并对输入性疟疾防控的关键环节和措施进行探讨。

快速检测美洲钩虫特异抗体胶体金免疫层析试条方法的建立与效果评价

目的建立简便、快速检测美洲钩虫特异抗体胶体金免疫层析试条方法并评价其检测效能。方法将美洲钩虫成虫置液氮中研磨,通过膜蛋白表面活性剂浸泡、再经液氮反复冻融和硫酸铵沉淀提取成虫可溶性抗原。用制备的成虫可溶性抗原作为包被抗原,以胶体金标记G蛋白为检测探针,制备检测钩虫特异抗体的免疫层析试条。用该试条检测美洲钩虫、蛔虫、鞭虫、日本血吸虫和刚地弓形虫等寄生虫感染者的血清以及健康人血清,评价该试条检测的敏感性和特异性,同时用ELISA进行平行检测,以评价该试条的检测效能。结果制备了检测钩虫特异抗体的胶体金免疫层析试条。用该试条和ELISA法分别检测美洲钩虫、蛔虫、鞭虫、血吸虫、刚地弓形虫感染者血清95、10、11、10和10份,健康人血清74份。试条和ELISA检测美洲钩虫感染者血清的敏感性分别为88.4%(84/95)和90.5%(86/95),检测74份健康人血清假阳性率分别为4.1%(3/74)和6.8%(5/74);与蛔虫感染者血清的交叉反应分别为2/10和4/10,与鞭虫感染者血清的交叉反应分别为1/11和4/11,试条法与血吸虫和弓形虫感染者血清无交叉反应,ELISA法与血吸虫感染者的交叉反应为1/10,与弓形虫感染者血清无交叉反应。试条法与ELISA法的特异性分别为94.9%(109/115)和88.7%(102/115),检测效能分别为91.9%和89.5%。试条法与ELISA法敏感性、特异性的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论以美洲钩虫成虫可溶性抗原制备的快速检测美洲钩虫特异抗体胶体金免疫层析试条检测美洲钩虫感染者血清的敏感性和特异性均较高。

氨基醇咔唑化合物BTB3体外抗细粒棘球蚴效果的评价

目的观察氨基醇咔唑化合物BTB3体外抗细粒棘球蚴的效果。方法体外培养羊源细粒棘球蚴原头节和继发感染小鼠来源的生发层细胞,用浓度为1、2、4、8、10和20μg/ml的BTB3作用3 d后,分别采用美兰染色法和CCK-8法检测原头节和生发层细胞的活性。用扫描电镜观察10μg/ml BTB3对生发层细胞造成的损伤。体外培养细粒棘球蚴囊,用浓度为1、5和10μg/ml的BTB3作用2周后,观察其对囊的影响,并用扫描电镜观察囊内部结构的变化。结果 10μg/ml和20μg/ml BTB3组原头节的死亡率分别为(100.0±0.0)%和(85.2±7.2)%。但当浓度降低后,原头节死亡率均低于10%。生发层细胞经8、10和20μg/ml BTB3作用后,其细胞活性抑制率均达100%,其余低浓度BTB3组的抑制率随浓度的降低而降低。扫描电镜观察发现,BTB3可使生发层细胞发生脱落、皱缩以及空腔化。10μg/ml BTB3作用于棘球蚴囊14 d后,全部囊均出现塌陷。其超微结构显示,BTB3作用后棘球蚴内囊中出现了细胞脱落和不均匀的现象。结论 BTB3对体外培养的细粒棘球蚴原头节、生发层细胞和棘球蚴囊均有较强的作用,是一种潜在的抗棘球蚴药物。

云南省盈江县边境地区按蚊孳生地幼蚊种类构成分析

目的了解云南省盈江县边境地区按蚊孳生地幼蚊种类构成。方法选择盈江县那邦镇卡牙河和平原镇户缺坝为调查点开展按蚊孳生地调查。于2016年6-10月在每个调查点选择缓流、积水、水潭、小型沼泽、水田等孳生地每月开展1次幼蚊构成调查。记录各孳生地水体p H值和面积值,以及Ⅰ龄、Ⅱ龄、Ⅲ龄、Ⅳ龄幼蚊以及蛹的数量。Ⅲ龄后期和Ⅳ龄幼蚊通过形态学鉴定蚊种,蛹饲养至羽化后进行形态学鉴定。采用密度(density,Ds)、种类丰富性指数(species richness index,N)、Simpson多样性指数(Simpson diversity index,D)、Shannon多样性指数(Shannon diversity index,H)、Berger-Parker优势指数(Berger-Parker dominance index,d)、Shannon均衡性指数(Shannon evenness index,E)等6个指标分析按蚊幼蚊种类构成,采用Morisita-Horn相似性指数(Morisita-Horn similarity index,C)分析两乡(镇)幼蚊种类构成相似性。采用SPSS 13.0统计学软件进行统计分析。结果在那邦镇共采集幼蚊标本313份(按蚊268份、库蚊45份),平原镇共采集幼蚊标本81份(按蚊55份、库蚊26份)。那邦镇的主要按蚊幼蚊为中华按蚊(183只,占68.28%)、带足按蚊(33只,占12.31%)和微小按蚊(25只,占9.33%);平原镇则为中华按蚊(27只,占49.09%)、带足按蚊(24只,占43.64%)和迷走按蚊(2只,占3.64%)。盈江县按蚊幼蚊Ds为0.33只/勺,D、H、d、E分别为0.54、1.16、0.65、0.50。那邦镇N、H和d值较大,E接近0.5,但D略低。两乡(镇)C为0.82(接近1)。那邦镇各月份的Ds、N和H均高于平原镇。积水中的按蚊幼蚊种类丰富,N较大,d较小;D和H均最高;E最接近0.5。那邦镇大型水体(面积>100 m2)种类更为丰富,多样性D和H均较高,d略低,E更接近0.5。偏酸性水体(p H值<7)的媒介构成较为复杂。结论云南边境地区面积较大、偏酸性的积水中按蚊种类多、结构复杂,乡镇间媒介种类构成的相似性较大。

大叶桉桉叶提取物对细粒棘球绦虫原头节的体外杀虫作用

目的 探索大叶桉（Eucalyptus robusta）桉叶提取物体外抗细粒棘球绦虫原头节的活性。 方法 2012年1-12月每月24日收集大叶桉成熟叶片，室内自然风干。用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和无水乙醇等4种不同极性的溶剂进行超声提取。将不同浓度的提取物与原头节孵育72 h，计算虫体死亡率，计算半数致死浓度（LC50）。 结果 不同溶剂提取物的性状和产率均不同，石油醚提取物为棕黑色油膏状，二氯甲烷、乙酸乙酯、无水乙醇提取物分别为墨绿色、乳粉色和乳白色粉末状。石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、无水乙醇提取物的平均产率分别为4.4%、2.1%、2.3%和2.3%，石油醚提取物的产率最高，其5月份的产率为5.4%。作用浓度为100 μg/ml时，各月份桉叶的石油醚与二氯甲烷提取物对原头节的杀灭作用均达到100%；50 μg/ml时，石油醚提取物的杀灭作用也基本达到100%，二氯甲烷提取物次之，强于乙酸乙酯和无水乙醇提取物。对石油醚和二氯甲烷提取物作进一步研究，结果显示，各月份石油醚提取物对原头节的杀灭作用由强到弱依次为6〉3〉11〉4〉2〉5〉10〉8〉12〉7〉1〉9，其中6月份提取物的作用最强，LC50为2.577 μg/ml，95%置信区间为0.85～6.22 μg/ml；各月份二氯甲烷提取物的杀灭作用由强到弱依次为：11〉5〉10〉4〉7〉12〉6〉9〉8〉2〉3〉1，其中11月份的作用最强，LC50为21.85 μg/ml，95%置信区间为12.38～36.28 μg/ml。 结论 大叶桉桉叶中含有抗细粒棘球蚴的活性成分，值得做进一步的分离、分析和鉴定。