两种分泌抗PrP单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其初步鉴定

目的 制备具有广谱种属反应性的PrP单克隆抗体 (McAb) ,用于可传播性海绵样脑病(TSE)的诊断及致病机制研究。方法 分别将对应于牛PrP2 9～ 4 8(BoP1 )、PrP89～ 10 8(BoP2 )的两种多肽与匙孔血蓝蛋白 (KLH)偶联 ,免疫BALB c小鼠 ,经细胞融合后获得分泌针对上述两种多肽的杂交瘤细胞株 ,用Western blot方法检测这些细胞株分泌的McAb与牛 (Bo)、人 (Hu)和仓鼠 (Ha)PrP蛋白的反应性。结果 通过细胞融合和 2～ 3轮克隆化 ,用ELISA筛选出分泌抗BoP1 和BoP2 抗体的杂交瘤细胞株D1 1 和D8。Westernblot显示 ,获得的McAb均能分别与重组BoPrP(2 5～ 2 4 2 )、重组HuPrP(2 3～ 2 31)和HaPrP(2 3～ 2 31)反应。结论 获得了可与牛、人和仓鼠PrP反应的两种McAb ,可用于哺乳类PrP检测及TSE致病机制研究。