中国北方青年女子基础代谢率的研究

目的测定中国北方青年女子的基础代谢率。方法根据2002年全国营养调查提供的数据,在标准化实验对象和实验条件的前提下,应用K4b2心肺功能测定仪,对16名20～25岁正常体质指数的青年女子进行基础代谢率的测定,将实测值与Schofield公式(修正)计算值进行比较,并对基础代谢率与身高、体重、体表面积等指标进行相关性分析。结果20～25岁正常体质指数的青年女子基础代谢率实测值为3.60±0.28kJ/(kg.h),Schofield公式(修正)计算值为3.95±0.13kJ/(kg.h);基础代谢率与体表面积、瘦体重、体重、身高呈显著正相关。结论中国北方青年女子基础代谢率的实测值明显低于《中国居民膳食营养素参考摄入量》推荐使用Schofield公式(修正)计算值。

调味品的营养化技术

我国居民食物和营养发生变迁,导致微量营养素营养缺乏和慢性非传染性疾病双重负担。调味品是构成膳食的必需食品,需要不断发展,满足消费者的营养健康需求。本文讨论了调味品营养化的主要技术方法,包括食物强化、应用药食两用中草药、应用新食品原料、营养健康效果的循证医学的系统荟萃分析技术,降低食盐含量五个方面。调味品的营养化应当成为行业的战略发展方向。

高分辨电感耦合等离子质谱测定贫困农村儿童血浆12种微量元素

目的建立高分辨电感耦合等离子质谱（HR—ICP—MS）结合直接稀释血浆样品的前处理，快速测定儿童血浆12种微量元素（B、V、Cr、Mn、Fe、Co、Cu、Zn、Se、Rb、Sr、Mo）。方法血浆样品冻融，4000r／min离心15rain取上清液，加适量Ga、Y内标溶液，并以0．5％HNO，按1：20（Ⅳy）直接稀释制备血浆样品，优化调谐HR．ICP—MS进行测定。结果仪器检出限0．001～0．035p,g／L，方法检出限0．012～0．702μg／L，决定系数（尺。）介于0．9983～1．0000，低、中、高加标回收率85．86％～121．34％，方法日内精密度0．52％～5．62％，El间精密度1．21％～10．21％，牛血清质控样品各元素测定值均在100％±15％。应用HR—ICP．MS测定获得了2002年中国居民营养调查贫困农村地区3～12岁儿童血浆12种微量元素基线数据。结论高灵敏度HR．ICP—MS与0．5％HNO，直接稀释快速制备血浆样品，适合大批量样本多元素快速测定的人群调查。

中国农村不同地区3～12岁儿童血浆维生素A营养状况调查

目的了解中国沿海、内陆和西部地区3～12岁儿童血浆维生素A营养状况。方法从2002年中国居民营养与健康状况调查的6类地区中一、二、三、四类农村,88个调查点的儿童血样中,每个年龄段随机抽取男女血样各6份,利用高效液相色谱法测定血浆维生素A含量。结果中国农村沿海、内陆、西部3～12岁儿童血浆维生素A缺乏率分别为5.5%、15.4%和10.2%,边缘缺乏率分别为40.5%、53.8%和50.1%。牧区和非牧区3～12岁儿童血浆维生素A缺乏率分别为5.1%、11.7%,边缘缺乏率分别为45.4%、51.5%。结论中国3～12岁儿童血浆维生素A缺乏在农村沿海、内陆和西部具有显著差异,在牧区与非牧区也具有显著差异。

CpTI蛋白在大肠杆菌中的高效融合表达及其纯化与活性测定

豇豆胰蛋白酶抑制剂 (CowpeaTrypsinInhibitor)基因 (CpTI)因其抗虫谱广及不易耐受等优点在植物基因工程中得到广泛应用。为进行遗传修饰食品 (Geneticallymodifiedfoods,GMF)中所含CpTI基因表达产物的安全性评价 ,我们需要在体外微生物体系中获得大量的CpTI蛋白。采用pGEX融合蛋白表达系统 ,将CpTI与GST的编码序列在大肠杆菌BL2 1中进行融合表达 ,表达产物达到菌体总蛋白的 4 0 %。经一步GlutathioneSephrose 4B亲和纯化 ,融合蛋白GST CpTI纯度达到 90 %以上。将Thrombin蛋白酶与融合蛋白过夜作用 ,可获得切掉了GST标签的CpTI蛋白。活性测定显示GST CpTI及CpTI蛋白均具有明显的胰蛋白酶抑制剂活性。用纯化的融合蛋白免疫家兔还可诱导产生高效价的抗体 ,经ELISA检测抗体滴度 >1∶2 0 0 0 0。WesternBlotting实验显示 ,无论是菌体超声裂解后总蛋白中的CpTI蛋白或是经纯化后的CpTI蛋白均可与自制的抗体发生特异性结合。这为进一步进行CpTI蛋白的安全性评价工作奠定了良好基础。

进食状态下口服^13C-亮氨酸呼出气平台期研究

目的探讨在进食状态下口服13C-亮氨酸作为示踪剂进行氨基酸代谢动力学研究时,呼出气中同位素含量在什么时间达到稳定的平台期。方法选取6名健康成年女性作为研究对象,给予日常膳食5天,在第6天持续口服13C-亮氨酸4h,并伴随食物摄入,收集给予同位素过程中及给予结束后1h的呼出气样本,测定13C的千分差值,以确定同位素的平台期。结果6名受试者的呼出气样品中13C的千分差值在口服同位素结束前后各半小时内处于相对较高的平台期,随后逐渐下降。结论在进食状态下口服13C-亮氨酸示踪剂进行氨基酸代谢动力学研究,取样的适宜时间是在给予同位素结束前后各半小时内。

利用DNA免疫法制备植物选择标记基因hpt表达蛋白抗体的研究

目的 :制备转基因作物中选择标记基因潮霉素B磷酸转移酶 (hygromycinBphosphotransferase,hpt)基因表达产物的多克隆抗体 ,并探讨影响核酸免疫效果的因素及相应机制。方法 :以hpt的cDNA全长插入真核表达载体 pCDNA3中 ,并经限制性内切酶酶切及DNA测序鉴定。以纯化的重组质粒pCDNA3 HPT免疫BALB/c小鼠。用在E .coli中表达并纯化的 (His) 6 HPT进行ELISA ,检测免疫过程中小鼠血清抗体效价的增长状况 ,并用Westernblot检测抗血清的特异性。结果 :经 3次核酸免疫后 ,小鼠血清中未发现明显的抗HPT抗体。第 4次加强免疫时 ,将小鼠分为 3组 ,每组两只。第 1组改用去内毒素的质粒提取试剂盒提纯的重组质粒免疫 ,第2组用 (His) 6 HPT融合蛋白免疫 ,第 3组仍用原来提取的重组质粒免疫。结果发现 ,第 1组小鼠抗血清的效价有所上升 ,经ELISA检测达 1∶2 0 0 ;第 2组抗血清的滴度显著升高 ,达到 1∶2 0 0 0 ;而第 3组小鼠血清中仍未检测到明显的抗体。Westernblot证实 ,前两组抗血清均可与亲和层析纯化的GST HPT、(His) 6 HPT融合蛋白及其诱导表达的相应菌体总蛋白发生特异性结合。结论 :用DNA免疫法成功地制备了抗hpt基因表达产物的特异性抗体 ,但抗体效价不够理想。推测与hpt基因本身的性质及其在体内表达呈现的水?

陕西镇安县36月龄以下婴幼儿营养与健康状况调查

【目的】分析陕西省镇安县36月龄以下婴幼儿营养与健康状况,为探讨适宜的儿童营养改善措施提供依据。【方法】采用成比例概率抽样方法,在陕西省镇安县随机抽取422名36月龄以下婴幼儿,进行问卷调查、体格测量,并对6～35月龄婴幼儿进行血红蛋白和血清维生素D(Vit D)测定。【结果】36月龄以下婴幼儿生长迟缓率为8.5%,低体重率为3.6%,消瘦率为3.1%;过去两周腹泻发病率22.2%,呼吸道疾病发病率14.5%。6～35月龄儿童贫血率为25.1%,Vit D缺乏率为15.2%,边缘缺乏率为34.8%。【结论】镇安地区婴幼儿体格发育尚可,但贫血和以VitD为代表的微量营养素缺乏较为严重。建议对该地区适龄儿童进行适当补充富含铁和Vit D的营养素补充剂,以有效的纠正该地区婴幼儿Vit D缺乏和贫血问题。

转双反义SBE基因大米的亚慢性毒性实验

目的观察转双反义SBE基因大米是否具有潜在的毒副作用。方法初断乳Wistar大鼠按性别、体重随机分为5组,分别喂饲高剂量亲本大米饲料(A组)、高剂量转基因大米饲料(B组)、中剂量转基因大米饲料(C组)、低剂量转基因大米饲料(D组)和AIN-93G正常对照饲料(E组)。所有动物自由进食饮水,观察大鼠体重、进食量、血常规、血生化、脏器重量、骨密度以及脏器的病理学检查。结果实验中期,B组雌性大鼠的单核细胞百分比显著低于E组(P<0.05),谷草转氨酶活性显著高于E组(P<0.05)。C组雌性大鼠的谷丙转氨酶活性显著高于A组和E组(P<0.05)。实验末期,B组雌性大鼠的谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性高于E组(P<0.05)。B组雄性大鼠红细胞压积和尿素氮显著低于亲A组(P<0.05),E组单核细胞百分比显著高于(P<0.05)。B组雌性大鼠大脑的脏器系数显著大于A组(P<0.05),B、C、D组雌性大鼠的肾脏脏器系数显著小于E组(P<0.05)。实验大鼠各组之间血脂、血钙和骨密度均无统计学差异,内脏病理检查未发现明显异常。结论现有实验结果不能证实该转基因大米对大鼠有亚慢性毒性作用。

营养改良型转基因作物的营养及特殊功效评价研究进展

由于食物缺乏和营养不良等问题仍然存在,以及对高营养品质的食品需求越来越大,通过现代农业生物技术获得的营养改良型转基因作物受到越来越多的关注。目前这类产品已得到大量的研究和开发,其中一些已进入商业化生产阶段。本文就营养改良型转基因作物的营养及特殊功效评价研究进展进行综述。

转人乳铁蛋白基因大米的营养成分及亚慢性毒性研究

目的比较转人乳铁蛋白基因（hLf）大米与其亲本大米在营养成分上的差异,并观察其是否具亚慢性毒性作用。方法对大米中的主要成分及矿物质、维生素进行测定并比较。将初断乳Wistar大鼠按性别、体重随机分为4组饲喂90天,自由进食与饮水。依据大米成分分析结果配制饲料：转hLf大米高剂量饲料（A组,大米添加量为71.45%）、转hLf大米中剂量饲料（B组,大米添加量为35.725%）、亲本大米高剂量饲料（C组,大米添加量为71.01%）和AIN-93G对照饲料（D组）。观察大鼠的体重、进食量、血常规、血生化、脏器系数、骨密度情况,并对大鼠的脏器进行病理学检查。结果转hLf大米与亲本大米在总的主要营养成分、矿物质、维生素上没有显著差异,但在乳铁蛋白及Fe含量上具明显差异。转hLf大米组血常规（WBC、HGB、RBC、MCH）、血生化（AST、Glu）、脏器系数、骨密度的个别指标与亲本对照组或AIN-93对照组存在显著差异（P〈0.05）;其他观察指标与两个对照组均无显著差异。结论部分指标虽然存在组间差异,但仍在正常范围内,未发现转hLf大米对健康具有毒副作用。

转人乳铁蛋白基因大米主要营养素的体内消化率及蛋白质营养价值评价

目的对转人乳铁蛋白基因大米(hLF大米)与亲本大米(PR大米)主要营养素在体内的消化代谢及蛋白质的营养价值进行初步比较评价。方法以6头近交系五指山小型去势公猪为实验动物,进行回肠末端造瘘手术安置T型瘘管,采用交叉法分别饲喂hLF大米、PR大米,收集回肠末端消化产物分析比较两种大米主要营养素的体内消化率,采用经消化率校正的氨基酸评分法(PDCAAS)对两种大米蛋白质的营养价值进行初步评价。结果 hLF大米与PR大米在蛋白质/氨基酸、碳水化合物、脂肪、纤维素的消化率上均无显著差异。人乳铁蛋白基因的插入使hLF大米中各氨基酸的含量配比得到了一定的优化,且其PDCAAS比亲本大米提高了2.66%。结论 hLF大米与PR大米在五指山小型猪体内主要营养素的消化代谢上满足"实质等同性"的要求,PDCAAS的结果显示hLF大米中蛋白质的质量略有提高。

转双反义淀粉分支酶基因大米中蛋白质的营养价值评价

目的对转双反义淀粉分支酶基因大米和亲本大米蛋白质的营养价值进行评价。方法采用通用的非生物学评价方法,即化学评分、氨基酸评分、蛋白质消化率校正后的氨基酸评分、必需氨基酸指数、营养指数、氨基酸比值系数和氨基酸比值系数分,评价大米蛋白质的营养价值。结果转基因大米和亲本大米的化学评分分别为62、59;氨基酸评分分别为75、62;蛋白质消化率校正后的氨基酸评分分别为65、56;必需氨基酸指数分别为79、80;营养指数分别为11、8;氨基酸比值系数分分别为76.7、67.0;氨基酸比值系数都是1.1。结论转双反义淀粉分支酶基因大米中抗性淀粉含量显著提高,但并未影响到其自身蛋白质的营养价值。该转基因大米蛋白质的营养价值与亲本大米具有"实质等同性"。

猪回肠末端转基因大米和亲本大米主要营养素的消化率

目的 比较转双反义淀粉分支酶（SBE）基因大米和亲本大米主要营养素的消化率.方法 7只五指山小型去势公猪进行回肠造瘘手术,术后小型猪按随机数字表法随机分为两组,采用交叉法分别喂饲转基因大米饲料和亲本大米饲料,收集食糜后分析两种大米中主要营养素的消化率.结果 转基因大米和亲本大米蛋白质的表观消化率分别为69.50%±4.50%、69.61%±8.40%（t=0.01,P=0.994）;真消化率分别为87.55%±4.95%、87.64%±9.40%（t=0.01,P=0.994）;脂肪消化率分别为72.86%±0.34%、77.89%±13.09%（t=0.95,P=0.378）,碳水化合物消化率分别为72.92%±7.43%、92.35%±5.88%（t=4.27,P=0.005）;转基因大米中17种氨基酸的表观消化率和真消化率与亲本大米没有差别.结论 转基因大米中碳水化合物消化率低于亲本大米,其余主要营养素的消化率与亲本大米具有实质等同性.

3～6岁儿童的奶类消费量与生长发育关系

目的探讨我国城乡3～6岁儿童奶类消费量与其生长发育的关系,为国家制定相关政策提供参考依据。方法研究数据来自于2002年中国居民营养与健康状况调查,比较城乡不同饮奶量3～6岁儿童的身高和体重,进行相关指标的统计学分析。结果城乡3～6岁儿童的饮奶率分别为46.9%和8.2%;城乡3～6岁儿童饮奶量平均为23.8 g/d,城市儿童高于农村(P<0.01);在同一年龄组,城乡儿童饮奶组的身高均高于未饮奶组,4岁、5岁和6岁饮奶组儿童的身高和体重与未饮奶组的差异有统计学意义(P<0.05),并且与饮奶量有关。结论需要进一步提高3～6岁儿童的饮奶率和饮奶量,以改善儿童的生长发育状况。

血清中25(OH)D检测方法的研究进展

维生素D营养状况影响着人体钙的正常代谢,关系着人体健康。准确评价人体维生素D的营养状况对于多种钙代谢相关疾病的预防和及早治疗非常重要。竞争性蛋白结合法、放射免疫法、化学发光免疫法、电化学发光免疫法、酶联免疫法、荧光免疫法、高效液相色谱法和液质联用法等方法均可检测血清25(OH)D浓度,并以此对人体维生素D的营养状况作出评价,但每种方法的适用范围和条件不同。本文就常用血清25(OH)D浓度的检测方法进行了综述并比较了各自的特点。

生物电阻抗法与双标水稀释法在人体成分测定中的应用比较

目的用双标水稀释法验证目前在我国广泛应用的体成分测定方法——生物电阻抗法的准确性。方法从白求恩军医学院某中队150名学员中根据体质指数（BMI）等指标筛选出16名学员作为受试对象，试验期为14d，试验期间学员集中管理，统一食宿。试验第1天受试者服用双标水，收集服用前及服用后2h、4h、6h、8h及第2至第14天的尿液，用质谱分析的方法，得到受试者。H、^18O的消除曲线，从而获得受试者的体成分数据。与此同时，从试验第1天开始，每天晚餐后3h用生物电阻抗仪对每位受试者进行体成分的测定。最后，将2种方法获得的体成分数据加以比对。结果经统计学分析，生物电阻抗法与双标水稀释法获得的体成分参数值差异无统计学意义，而且高度相关，两种方法测得的总体水、瘦体重、体脂及体脂百分比的相关系数分别为0．556，0．556，0．817，0．606，具有统计学意义。结论应用生物电阻抗法测定中国人体成分具有较高的准确性。

转基因水稻中重组人乳铁蛋白的分离纯化及其抑菌活性研究

目的研究从转基因水稻中分离纯化重组人乳铁蛋白(recombinant humanlactoferrin,rhLF),并检测其是否具有抑菌活性。方法通过饱和硫酸铵分级沉淀从转基因水稻中分离rhLF后,经CM Sepharose FF交换层析和Sephadex G25分子筛层析进一步纯化rhLF。采用微量肉汤稀释法检测不同浓度rhLF(0.25、0.50、1.00、2.00、4.00和5.00mg/ml)对鼠伤寒沙门菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、单增李斯特菌的抑制情况。结果通过分离和纯化成功获得纯度较高的rhLF(纯度约90%),经考马斯亮蓝染色,Western blot和质谱仪鉴定分析确定为rhLF,分子量约为79 kD。抑菌实验显示,5.00和4.00mg/ml rhLF对鼠伤寒沙门菌和金黄色葡萄球菌有持久的抑制效果,2.00和1.00mg/ml rhLF在实验后期也表现出明显的抑菌作用,0.50mg/ml及以下浓度则没有抑菌效果。5.00和4.00mg/ml rhLF在18h内对蜡样芽孢菌表现出一定的抑制效果;5.00mg/ml rhLF对单增李斯特菌在18h内有抑制作用。结论从转基因水稻中可成功分离和纯化rhLF,纯化后蛋白仍具有明显的抑菌活性。

大豆脱水应答元件结合蛋白(GmDREB1)的非融合原核表达及纯化

目的大豆脱水应答元件结合蛋白(GmDREB1转录因子)基因是应用于转基因小麦中增强其耐旱、盐碱的基因,本研究拟探索获得与天然蛋白GmDREB1一致的蛋白表达纯化方法,以获得足量的蛋白纯品,为该外源蛋白的安全性评价奠定基础。方法将GmDREB1基因克隆到原核表达载体pBV220中,构建重组表达载体pBV220-GmDREB1,转化E.coli DH5a进行诱导表达,通过优化GmDREB1基因密码子、改善诱导表达条件及选择合适的表达载体等实现目的蛋白的高效表达,对表达产物进行阳离子交换和分子筛等层析纯化,对获得的纯化蛋白进行序列、活性及免疫原性等测定。结果含序列优化目的基因的重组载体pBV220-GmDREB1转化E.coliDH5a后,经42℃诱导表达2小时,获得了以可溶性为主的GmDREB1蛋白,经层析纯化获得了与天然目的蛋白一致的蛋白纯品。结论利用本研究方法可得到在N端序列、活性及免疫原性等方面与天然GmDREB1蛋白一致的目的蛋白。

应用双标水法对16名青年女性进行能量消耗的测定

目的研究建立以双标水为示踪剂测定我国人体能量代谢的方法。方法以16名20～25岁军校女学员为研究对象,按照0.25g2H2O/kg体重和0.18gH218O/kg体重的剂量给受试者服用国产双标水试剂,采用多点法收集受试者服用双标水前后14d内的尿样并进行质谱分析,根据公式计算得到受试者能量消耗的数据。结果质控盲样与平行样测量相对偏差2H为0.145%±0.049%,18O为0.123%±0.033%,尿样双复管测定的平均变异系数小于1%,根据质谱数据得到的同位素消除曲线线性关系良好,相关系数均大于0.99,且No与ND的比值在1.015～1.06之间,应用双标水法得到的受试者平均能量消耗为7.64±0.49MJ/d(1827.17±117.73kcal/d)。结论该方法测定结果可信度较高,适用于我国人体能量代谢的测定。