维药神香草对治疗哮喘大鼠的免疫机制研究

目的观察维药神香草对哮喘大鼠白介素(interleukin,IL)-6、嗜酸性粒细胞(eosinophil,EOS)的影响,探讨其治疗哮喘的部分免疫机制。方法将健康Wistar大鼠50只随机分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松组、神香草多糖低剂量组、神香草多糖高剂量组5组,每组10只。正常对照组腹腔注射1 mL无菌生理盐水;其余4组激发致敏引喘,每天灌胃给药1 mL(地塞米松组给药为0.5 mg/kg,神香草多糖低、高剂量组灌胃分别为0.65、2.60 g/kg)。药物干预1周后,末次激发结束后24 h内,每组随机取8只大鼠,支气管肺泡灌洗,收取支气管肺泡灌洗液,测量EOS。采用免疫组织化学法检测肺组织中IL-6的表达水平。用图像ProPlus分析软件进行灰度分析。结果 5组间支气管肺泡灌洗液中EOS差异有统计学意义(P<0.001)。哮喘模型组EOS高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。神香草多糖低、高剂量组EOS明显低于哮喘模型组,差异均有统计学意义(P<0.001);神香草多糖低剂量组EOS高于地塞米松组,差异有统计学意义(P<0.01);神香草多糖高剂量组EOS与地塞米松组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。IL-6在胞浆表达,支气管纤毛柱状上皮细胞和浸润的炎细胞出现阳性表达,肺泡间质也出现少量的表达。哮喘模型组IL-6的表达高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.001);神香草多糖低、高剂量组IL-6的表达低于哮喘模型组,差异均有统计学意义(P<0.001);神香草多糖低、高剂量组IL-6与地塞米松组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论神香草多糖可抑制哮喘大鼠IL-6的分泌,降低肺泡灌洗液中EOS,减轻哮喘大鼠的炎症反应,提示神香草多糖具有较好的抗炎作用。

刺糖精多糖对巨噬细胞RAW264.7免疫活性的影响研究

目的探讨不同浓度刺糖精多糖对巨噬细胞RAW264.7免疫活性的影响。方法以正常培养的小鼠巨噬细胞RAW264.7为正常对照组,小鼠巨噬细胞加入1 mg/mL脂多糖(LPS)为LPS组,采用刺糖精多糖(12.5、25、50、100、200μg/mL)作用巨噬细胞RAW264.7 24h和48h为实验组,采用CCK-8法检测巨噬细胞的增殖。以刺糖精多糖及LPS作用巨噬细胞RAW264.7 24、48h,收集细胞培养上清液,用Griess试剂盒检测细胞培养上清中一氧化氮(NO)含量。采用中性红吞噬实验检测吞噬活性,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测刺糖精多糖不同浓度(12.5、25、50、100、200μg/mL)及不同作用时间(24h和48h)培养上清液中肿瘤坏死因子(TNF-α)含量。结果刺糖精多糖对巨噬细胞RAW264.7作用24、48h后,与空白对照组比较,质量浓度为12.5、25、50、100、200μg/mL的刺糖精多糖均能够促进巨噬细胞RAW264.7的增殖,差异有统计学意义(P<0.05)。质量浓度为12.5、25、50、100、200μg/mL的刺糖精多糖和1mg/mL LPS作用于巨噬细胞RAW264.7 24h和48h后,NO生成量明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。当多糖质量浓度为100、200μg/mL时,NO生成量高于LPS组,差异有统计学意义(P<0.05)。在一定浓度范围,多糖作用巨噬细胞后NO的生成量随刺糖精多糖浓度的增加而增加,线性回归方程为:Y=0.0108 X+0.0777,R2=0.997。刺糖精多糖浓度在12.5、25、50、100、200μg/mL时,能明显地增强RAW264.7细胞的吞噬能力(P<0.05),且刺糖精多糖促进细胞吞噬的能力明显强于LPS(P<0.05)。刺糖精多糖各剂量组能刺激小鼠巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子TNF-α,并随着刺糖精多糖剂量的增加,TNF-α的分泌量逐渐升高。除正常对照组外,各组48h时TNF-α的含量高于24h。结论不同浓度的刺糖精多糖和LPS作用巨噬细胞RAW264.7后,刺糖精多糖能够促进巨噬细胞RAW264.7的增殖和吞噬功能及其产生NO,分泌TNF-α呈剂量相关性,对其免疫活性起正向调节作用。

PD-1在HBV转基因小鼠急性肝损伤中的表达及意义

目的观察HBV转基因小鼠急性肝损伤过程中肝脏程序性死亡受体-1(PD-1)的动态变化情况,初步探讨HBV转基因小鼠在急性肝损伤的免疫变化机制。方法 40只健康C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(n=20)及四氯化碳(CCL4)干预组(n=20);另选取20只SPF级转基因HBsAg阳性鼠为转基因HBsAg阳性CCL4组。正常对照组随机分为4组,按0.5mL/kg腹腔注射橄榄油溶液,0、24、48、72h4个时间点取标本。CCL4干预组、转基因HBsAg阳性CCL4组一次性给予0.5mL/kg腹腔注射10%CCL4橄榄油溶液,分别于0、24、48、72h每组随机挑选5只小鼠,采集肝脏标本,用免疫组织化学方法检测每组小鼠肝脏组织中PD-1的表达,采用实时荧光定量PCR法检测PD-1mRNA的表达。结果正常对照组PD-1阴性表达,其余各组肝脏组织中PD-1表达水平有随时间变化的趋势并且时间因素的作用随着分组的不同而不同。48、72h时,转基因HBsAg阳性CCL4组PD-1表达的累积光密度(IOD)值明显高于CCL4干预组及正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。24、48、72h时,CCL4干预组、转基因HBsAg阳性CCL4组PD-1表达的IOD值均高于0h,CCL4干预组24h时PD-1表达最高,转基因HBsAg阳性CCL4组48h时PD-1表达最高(P<0.05)。PD-1mRNA表达水平有随时间变化的趋势并且时间因素的作用随着分组的不同而不同。除正常对照组PD-1mRNA表达随时间没有改变,从24~72h,CCL4干预组和转基因HBsAg阳性CCL4组PD-1mRNA的表达量明显增高,均高于0h时。48、72h时,转基因HBsAg阳性CCL4组表达最高,与CCL4干预组比较有统计学意义(P<0.05)。CCL4干预组PD-1mRNA表达明显高于正常对照组(P<0.05)。结论 HBV转基因小鼠24h即可出现急性肝损伤,尤其是HBsAg表达阳性的转基因小鼠损伤较CCL4干预的小鼠严重。转基因HBsAg阳性小鼠PD-1在48、72h明显升高,发生强烈的免疫反应。

噪声岗位916例作业员工职业健康状况分析与研究

目的探讨噪声岗位作业员工的职业健康状况及长期接触噪声对员工身心健康的影响。方法采取现状调查,随机抽取接触噪声岗位作业的916位员工为观察组,进行纯音测听,分析听力损失情况;同时随机抽取同一生产厂非噪声岗位的1 503位员工为对照组,对两组的血压、心电图、空腹血糖、血脂和血尿酸化验、肝脏B超、体质指数等体检结果进行分析;对两组症状自评量表(SCL-90)评分结果进行分析。结果随着接触噪声工龄的增长,轻度高频听力损失检出率明显增加(P<0.01),轻中度噪声聋检出率也增加(P<0.05)。未检出重度噪声聋。观察组异常心电图、高血压的发生率均明显高于对照组(P<0.01)。两组高脂血症、糖尿病、脂肪肝、高尿酸血症的发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。观察组SCL-90中各项因子分、总均分、阳性项目数得分均高于对照组(P<0.01)。结论噪声岗位员工长期暴露在强烈噪声环境下,对听觉系统、心电图、血压、心理健康有一定影响,应采取积极措施,减少对员工身心健康的影响。

噪声岗位员工心理健康状况分析与EAP应对效果评价

目的分析噪声岗位员工心理健康状况,进行员工帮助计划(EAP)应对效果评价。方法随机抽取接触噪声岗位的916位员工为噪声组,以同一生产厂非噪声岗位的1 503位员工为对照组,采用症状自评量表(SCL-90)进行调查对比分析,并进行EAP应对前后效果评价。结果噪声组躯体化、人际关系敏感、焦虑、敌对、忧郁、精神病性等因子分、SCL-90总分、阳性项目数得分均高于对照组(P<0.05)。噪声组除恐怖和偏执、精神病性外,其余6个因子心理健康问题的严重程度达到中度水平以上的比例明显高于对照组(P<0.05),进行EAP应对后,因子得分达到中度水平者的比例和人数均明显降低(P<0.05)。结论噪声作业员工不养成良好个人安全防护行为而长期暴露在强烈噪声环境下,会产生躯体不适、焦虑、敌对、忧郁等心理问题。在企业压力和心理问题的管理与干预方面采用EAP应对是非常有效的。