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A型流感病毒H5N1的M2离子通道稳定细胞株的建立
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作者 孙娟娟 李楚芳 +3 位作者 徐伟 李志远 刘劲松 陈凌 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1902-1906,共5页
A型流感病毒H5N1的M2离子通道(H5M2)基因经优化后由人工合成,适合于哺乳动物细胞中表达。通过酶切克隆于pcDNA4质粒,并在HEK293细胞中建立稳定细胞株。Western blotting和免疫荧光证实H5M2在稳定细胞中只有在四环素诱导下才能表达,并经... A型流感病毒H5N1的M2离子通道(H5M2)基因经优化后由人工合成,适合于哺乳动物细胞中表达。通过酶切克隆于pcDNA4质粒,并在HEK293细胞中建立稳定细胞株。Western blotting和免疫荧光证实H5M2在稳定细胞中只有在四环素诱导下才能表达,并经膜片钳证实在HEK293细胞中表达的H5M2具有H+通道活性,为M2离子通道功能的研究和M2离子通道阻断剂筛选方法的建立提供了参考。 展开更多
关键词 流感病毒 M2离子通道 四环素诱导
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A型流感病毒NS1基因密码子去优化改造引起病毒毒力减弱 被引量:4
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作者 栾世家 潘蔚绮 +4 位作者 李婷 杨化强 张北武 李锋 陈凌 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期720-726,共7页
根据A型流感病毒密码子使用偏嗜性,选取稀有密码子对A/Puerto Rico/8/34(H1N1)病毒NS1基因内部110个氨基酸区域进行密码子同义突变改造,并全基因合成NS基因,利用反向遗传操作技术拯救出含有密码子去优化NS1基因的重组病毒(deoNS)。体外... 根据A型流感病毒密码子使用偏嗜性,选取稀有密码子对A/Puerto Rico/8/34(H1N1)病毒NS1基因内部110个氨基酸区域进行密码子同义突变改造,并全基因合成NS基因,利用反向遗传操作技术拯救出含有密码子去优化NS1基因的重组病毒(deoNS)。体外细胞噬斑形成实验和病毒生长曲线证明该病毒在MDCK细胞内的感染和复制能力比野生型病毒低约1000倍;BALB/c小鼠体内致病力实验证明deoNS病毒不能引起小鼠发病和死亡,该病毒在小鼠肺内的复制滴度比野生型病毒低100~1000倍。本研究探索了通过基因组密码子去优化改造途径降低A型流感病毒毒力的可行性,首次证明流感病毒NS1基因密码子去优化同义突变可以降低病毒毒力,为流感减毒活疫苗的研究提供了新的思路。 展开更多
关键词 A型流感病毒 NS1 基因 密码子去优化 致弱 减毒活疫苗
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