神经生长因子对培养的小鼠卵巢腔前颗粒细胞增殖的影响

目的:为了探讨神经生长因子(nerve growth factor,NGF)的促生殖作用及其机理,观察小鼠卵巢腔前颗粒细胞(granulosa cell,GC)增殖情况,同时建立便捷灵敏、毒性小、无污染的细胞增殖检测方法。方法:用NGF刺激培养的小鼠卵巢腔前GC,CCK-8实验分析,溴脱氧尿嘧啶核苷(bromodeoxyuridine,BrdU)掺入标记,免疫细胞化学染色法检测GC在体外培养中的增殖情况和BrdU标记指数(labeling index,LI);流式细胞技术分析细胞周期各时相的变化。结果:NGF明显促进GC增殖,并且具有一定的量效关系。光镜下可见BrdU阳性标记的GC,其细胞核内可见棕褐色阳性颗粒,提示处于细胞增殖期。NGF组的BrdU LI为40.62%,明显高于对照组23.57%(P=0.000)。NGF使增殖期的细胞显著增多及增殖指数(proliferation index,PI)升高,G0/G1期细胞相对比例减少(P=0.000)。结论:本研究证实NGF能够促进GC增殖,CCK-8分析和BrdU标记是高效、便捷的标记腔前GC增殖的方法,NGF促进GC增殖与促进GC DNA的合成有关系。