雷丸凝集素的纯化及理化性质的研究

雷丸（OmphalialapidescensSchroct．）经过Tris－HCl缓冲液浸提，硫酸铵分级沉淀，离子交换，卵粘蛋白－Sepharose4B亲和层析以及Sephacryl-S100分子筛等步骤，纯化得到纯度为95％以上的雷扎凝集素（简称OLL）。比活提高45.8倍，活力回收2.5％。雷丸凝集素是单一肽链的蛋白质，分子量为12kDa，等电点为7.5，可被半乳糖抑制。具有热稳定性及酸碱（pH1～12）稳定性。2mmol／L氯化锌可使其比活提高4倍。同兔血相比，与人血进行凝集反应，其比活可提高4倍。进行圆二光谱测定，α－螺旋和β-折叠含量较高。与半乳糖间的抑制反应瞬间内完成，且空间结构变得紧密。

人血清中糖基磷脂酰肌醇－特异性磷脂酶D活性的测定

我们用含糖基磷酯酰肌醇疏水膜锚结构（ＧＰＩ－ａｎｃｈｏｒ）的碱性磷酸酶（ＡＬＰ）作为底物，建立了稳定可靠的测定血清中ＧＰＩ专一的磷酯酶Ｄ（ＧＰＩ－ＰＬＤ）活性的条件，活性用ＡＬＰ由疏水性到亲水性的转化率（％）表示。经测定，健康人群的活性水平在转化率为２０～６０％之间者占９５％以上，低于２０％者仅占０．９％。在普查了多种疾病患者血清的酶活性的基础上，统计了几种疾病患者血清的酶活，其中肾衰、肠癌、肝癌、肝硬化以及甲型和乙型肝炎病人血清的酶活有所下降，活性低于２０％者较正常人高１５至４０倍，而急性肝炎恢复期的病人，酶活水平恢复正常。另外发现，高血脂患者的酶活性则明显高于对照值。造成血清中ＧＰＩ－ＰＬＤ活性水平改变的原因尚不清楚，但可能不是由单一器官功能不全所致。

盐酸胍处理大麦类囊体膜对金属阳离子调节激发能分配的影响

以大麦（ＨｏｒｄｅｕｍＶｕｌｇａｒｅＬ）叶片为实验材料，研究盐酸胍处理大麦类囊体膜对金属阳离子调节激发能分配的影响。结果表明：当未用盐酸胍处理时，Ｍｇ２＋对类囊体膜的Ｆ６８６／Ｆ７３６比值有显著的刺激作用，而用不同浓度盐酸胍处理类囊体膜，则明显阻滞Ｍｇ２＋调节激发能向ＰＳＩＩ分配，表明盐酸胍处理可能损伤类囊膜上ＬＨＣ—ＩＩ与Ｍｇ２＋调节作用有关的蛋白质，从而导致Ｍｇ２＋调节效应降低．用ＳＤＳ—ＰＡＧＥ方法研究盐酸胍处理后的类囊体膜色素蛋白复合物的组成变化，结果表明盐酸胍处理导致ＭＩＣ—ＩＩ中ＭＩＣＰ１和ＬＨＣＰ２组分消失，这说明盐酸胍处理阻滞Ｍｇ２＋调节效应可能与ＬＪＩＣ—ＩＩ上的ＬＨＣＰ１，ＬＨＣＰ２受损有关。

脂肪酸合成酶缩合中心的羧负离子结合部位

本文对六个修饰巯基的试剂失活脂肪酸合成酶(FAS)的动力学进行了系统研究,发现它们与FAS的作用是否属于亲和标记,修饰巯基时的专一性,以及盐和NADPH有无保护,均只与该试剂分子中有无羧基负离子有关,提出在FAS的缩合中心存在一个对羧负离子有特异亲和力的结合部位.该部位可能是丙二酰基在缩合中心的结合部位,为缩合反应所必需,它使携带了丙二酰基的活臂向缩合中心运动,并结合于此进行缩合反应.