人肠道病毒71型VP0蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

目的:原核表达并纯化人肠道病毒71型(EV71)VP0蛋白,免疫豚鼠制备多克隆抗体,并鉴定其用于EV71检测的反应性和特异性。方法:PCR方法扩增VP0基因,构建原核表达质粒pET-VP0并转化大肠杆菌,诱导表达并纯化VP0重组蛋白,免疫豚鼠制备抗VP0多克隆抗体,ELISA方法检测抗VP0抗体效价,细胞免疫荧光和Western blot方法鉴定抗体特异性。结果:VP0重组蛋白在大肠杆菌BL21中高效表达,制备的抗VP0抗体效价为1∶106。细胞免疫荧光及Western blot检测结果显示,抗VP0多克隆抗体可以识别原核表达及EV71感染细胞中的VP0蛋白。结论:原核表达了EV71的VP0蛋白并制备出抗VP0多克隆抗体,为EV71的临床诊断、疫苗开发和分子病毒学研究提供了新的研究工具和手段。

湖州市2013—2018年人感染H7N9禽流感病例流行病学特征和外环境监测分析

目的了解湖州市人感染H7N9禽流感病例的流行病学特征及外环境样本检测情况。方法收集2013—2018年现住址为湖州市的人感染H7N9禽流感确诊病例的流行病学信息,同时采集暴露可疑环境样本进行病原学检测。运用Spearman相关分析法分析发病数与环境阳性检出率的关系。结果2013—2018年湖州市确诊的人感染H7N9禽流感病例39例,死亡9例,病死率为23.08%。男性多于女性,病例主要60岁以上的老年群体和农民。病例溯源样本阳性检出率为8.47%(30/345),农贸市场活禽交易场所的阳性检出率为25.00%(127/508),发病数与样本、场所检出阳性率的Spearman相关系数分别为0.379和0.392。结论中老年男性及农民是人感染H7N9禽流感的高发群体,活禽暴露是发病的高危因素。