siRNA制备技术的研究进展

近年来,siRNA(smallinterferingRNA)被广泛用于诱导哺乳动物体系中的RNA干扰。目前有五种siRNA制备方法化学合成法、体外转录法、RNaseⅢ家族体外消化法、表达载体法和表达框架法。在这些方法中siRNA序列的选择至关重要。随着药物研究和基因组研究的进展,siRNA的制备技术需要在高通量筛选、稳定性、基因导入和调控等方面进一步发展与完善。作者综述了siRNA序列的选择原则和哺乳动物系统中的siRNA产生方法,并简要讨论了其发展前景。

环加氧酶及其药理学研究进展

环加氧酶(cyclooxygenase,COX)是参与花生四烯酸代谢途径的限速酶,可催化花生四烯酸转化为前列腺素(prostaglandins,PGs)。已知哺乳动物的COX至少有两种异构酶,分别是固有表达的COX-1和诱导表达的COX-2。目前认为COX-1产生具有生理作用的前列腺素参与维持机体正常的生理功能;而COX-2产生的前列腺素主要参与炎症。但随着研究的深入,发现两者生成的前列腺素的生物功能不仅更复杂,而且还存在着相互联系。本文回顾了近年来环加氧酶在多种疾病中的研究进展,并探讨了环加氧酶作为一个潜在的治疗靶点的可能性。

基于酵母水平的高通量药物筛选

随着后基因组时代的到来,越来越多的药物靶标蛋白将会被发现,基于靶标蛋白设计出的化合物也将大量涌现,高通量药物筛选日趋重要。酵母基因组的易操作性及其简单稳定的培养条件,使得该真核微生物成为一种理想的药物筛选工程细胞。本文讨论了选择酵母系统进行细胞水平筛选的优缺点,并从基于靶点和表型两种筛选模式对酵母水平的高通量药物筛选做一总结。

腺苷在脑缺血过程中的双重作用

随着内源性腺苷系统具有神经保护作用的提出,派生出新的课题——腺苷及其类似物能否治疗脑卒中等一系列神经系统疾病?随着研究的深入,这一问题已逐渐成为神经药理学研究的热点。大量的工作集中在腺苷及其类似物对脑卒中的治疗作用,但实验结果具有很大的不确定性。传统上认为系统性给予腺苷引起心率减慢、血压降低、脑供血减少,从而限制了腺苷的应用。因此,提出了合用外周腺苷受体拮抗剂、腺苷转运蛋白抑制剂及代谢阻断剂,这既能对抗其心血管副作用,又使得脑缺血区的内源性腺苷维持在较高水平,发挥神经保护作用。然而,在脑缺血的病理条件下,腺苷浓度已显著提升,逾越了其自调节的范围。在此情况下,继续强化腺苷的作用,是否有悖于机体自稳态的恢复?诚然,腺苷具有明显的神经保护作用,但近年的研究又显示腺苷及其某些代谢产物具有神经损伤作用,如何解释这些相互矛盾的现象?又如何评价腺苷在脑缺血过程中的作用?本文主要从作用机制上,综合评述腺苷在脑缺血过程中可能发挥的神经保护及损伤作用,以期为脑卒中的临床治疗和新药开发提供一定的参考。

神经退行性疾病的早期信号:线粒体功能障碍

线粒体是广泛存在于各种真核细胞中,可以进行独立复制的特殊的细胞器,它既能提供细胞内各种生命活动所需要的能源,也参与多种其他极为重要的生理活动。线粒体呼吸功能的障碍是许多神经退行性疾病发病早期共识的病理现象,探索线粒体在疾病发生过程中的变化,不仅对研究AD等神经退行性疾病的发病机理,对设计和开发创新药物也具有重要的指导意义。本文就线粒体的结构功能及其在神经退行性疾病发病过程中出现功能障碍的证据、诱因和可能的治疗方案作一简要综述。

脑缺血/缺氧预适应引起的基因、蛋白质表达谱的变化

缺血/缺氧预适应保护作用的分子机制目前尚未充分阐明。最近的研究在大鼠和小鼠脑缺血/缺氧预适应的模型上采用了基因芯片、双向电泳结合质谱分析技术,揭示了大鼠和小鼠脑缺血/缺氧预适应引起的基因和蛋白质表达谱的变化。这些研究发现预适应引起一些新的基因和蛋白质的表达发生改变,深入研究这些基因和蛋白质有可能发现治疗脑中风新的药物靶标。

基底神经节中多巴胺和腺苷受体二聚化及其药理学意义

近年来,大量研究发现G蛋白偶联受体不仅以单体形式,而且以同源或异源二聚体形式存在。腺苷A1受体和多巴胺D1受体以及腺苷A2a受体和多巴胺D2受体分别共存于基底神经节中纹状体向黑质和脚内核投射的神经元以及纹状体向苍白球投射的神经元内。A1/D1、A2a/D2受体形成受体异聚复合体构成了受体-受体之间相互作用的分子基础。腺苷和多巴胺受体之间在细胞水平以及行为水平上拮抗性的相互作用为其在帕金森病、精神分裂症、舞蹈病和药物依赖等疾病的治疗上提供了新的靶向。

阿尔采末病的治疗策略:神经营养因子

神经营养因子是神经元在胚胎期及成熟发育期存活和发育所必需的分泌型肽类物质。由年龄、基因突变或其他因素导致的神经营养因子水平的改变可以导致神经元退行性变。神经营养因子能阻止阿尔采末病(Alzheimer’sdisease,AD)患者胆碱能神经元的退行性变,改善患者的认知功能。开发神经营养因子用于治疗AD是极具前景的治疗策略。本文就各种相关的神经营养因子NGF、BDNF、NT-3、FGF及IGF的功能,以及它们在AD发病中的机制及治疗研究作一简要综述。