胃癌及癌旁组织定量比较蛋白质组学研究

为寻找胃癌特异的肿瘤标记物,用于胃癌临床诊断及药物治疗靶点的选择,采用荧光差异显示凝胶电泳(DIGE)技术分离并筛选Cy3、Cy5及Cy2荧光素标记的胃癌及对应癌旁组织差异表达蛋白质,用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)或串联质谱技术进行鉴定并分析。结果共筛选出33个差异表达蛋白质点,其中9个蛋白质点在胃癌组织中上调,24个蛋白质点下调。对22个蛋白质点采用质谱技术成功鉴定,突变结蛋白、锰超氧化物歧化酶、热休克蛋白60等在胃癌中高表达,热休克蛋白27、前列腺素F合酶、硒结合蛋白1、锌指蛋白160、微管蛋白α6、真核生物翻译延伸因子1α1等在胃癌组织中低表达,并筛选出5个未知蛋白。这些差异表达蛋白可望成为胃癌诊断的特异标记物,并与胃癌的发生、发展及预后等有关,为胃癌的诊断、发生机制的研究提供了新的思路。

脑深部电刺激治疗帕金森病作用机制的探讨

目的从蛋白组学的角度探索脑深部电刺激(DBS)与毁损术治疗帕金森病的机制是否类同。方法采用荧光差异凝胶电泳(DIGE)技术,测定3例行双侧丘脑底核DBS治疗的帕金森病病人脑脊液中蛋白,在手术前(未干预组)、手术7 d后但未刺激前(微毁损组)和刺激1周后(DBS组)的表达变化。另留取3例非中枢系统疾病病人的脑脊液蛋白作为正常对照组。结果未干预组和微毁损组、未干预组和DBS组、微毁损组和DBS组的组间比较分别发现14、18和13个明显差异蛋白点。除3个蛋白点外,未干预组和微毁损组与未干预组和DBS组的组间蛋白差异点完全不同;且在这3个相同的蛋白点中,两个蛋白点呈相反方向表达。结论结果初步提示DBS与毁损术治疗帕金森病的机制不相同。

四连接素在帕金森病脑脊液中的表达变化

目的探讨脑脊液中可能的帕金森病(PD)生物标记物。方法采用荧光差异凝胶电泳(DIGE)技术分离并筛选PD患者和正常对照者脑脊液中差异表达蛋白质,用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术进行鉴定并分析,应用Western blotting进行验证。结果 DIGE发现20个明显的差异蛋白点,共鉴定出8个蛋白质。DIGE分析和Western blotting验证均显示蛋白四连接素在PD患者脑脊液中发生显著下调。结论四连接素可能参与了PD发生,有可能成为PD的生物标记物。

应用DIGE测定帕金森病脑脊液中蛋白变化

目的测定帕金森病（PD）脑脊液中蛋白的变化，为进一步探索PD的生物标记物提供线索。方法采用荧光差异凝胶电泳技术分离并筛选PD和正常对照者脑脊液中差异表达蛋白质．用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI—TOFMS）或串联质谱技术进行鉴定并分析。结果共发现20个明显的差异蛋自点，其中11个点在PD中上调，9个点下调，共鉴定出8个蛋白质，其中有3个未知蛋白，均表现为下调。蛋白MYPTl出现明显下调，载脂蛋白原、脂蛋白发生明显上调，载脂蛋白A—I的一个异构体发生上调，一个异构体发生下调。结论MYPT1与突触功能有关，载脂蛋白原、脂蛋白、载脂蛋白A—I与胆固醇代谢有关，这些蛋白与PD发生有一定关联，有可能成为PD的生物标记物。

脑脊液蛋白四连接素在脑深部电刺激治疗前后的表达变化

目的研究帕金森病(PD)患者脑脊液蛋白四连接素在脑深部电刺激(DBS)治疗前后的表达变化,了解四连接素有无可能成为DBS治疗PD的生物标记物。方法采用荧光差异凝胶电泳(DIGE)和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)鉴定技术分析PD患者脑脊液中四连接素和载脂蛋白A-Ⅰ在DBS治疗围手术期的表达变化,应用Westernblotting验证围手术期的变化及随访期的表达变化。结果在围手术期,DIGE分析和Westernblotting验证均显示DBS后四连接素和载脂蛋白A-Ⅰ未出现明显改变,而随访期,四连接素的表达水平显著增高,载脂蛋白A-Ⅰ的表达水平基本平稳。当DBS治疗停止后,四连接素的表达水平显著下降,载脂蛋白A-Ⅰ却无此现象。结论四连接素的表达变化与DBS治疗有关,有可能成为DBS治疗PD的生物标记物。