锌指类基因调控蛋白──生物无机化学和分子生物学发展的新领域

生命必需元素锌，除了以锌酶的形式，参与生物体的各类代谢过程外，近年来发现，锌还以各种锌蛋白的结构方式，包括锌指、锌纽、锌带和锌簇等，参与生物体的基因转录、复制及蛋白质的合成等各种基因调节和控制过程．联想到金属硫蛋白在锌的体内平衡中所扮演的角色，很有可能锌是通过金属硫蛋白和锌指类蛋白的逐级调控，成为生物体生长发育的调控中心．癌基因和人免疫缺陷病毒（ＨＩＶ）的许多调节蛋白也具有锌指类结构，这给癌症和爱滋病的治疗提供了新思路．

中国膜生物学的开拓者——杨福愉院士——庆贺杨福愉院士八十华诞

在这金秋宜人时光，我们怀着极其敬重与喜悦的心情迎来了杨福愉院士的80华诞。值此庆贺寿辰之际，我们非常高兴地在这里回顾杨福愉先生50年来的科研活动，探讨他的学术思想，了解他的研究成果，这不仅是对杨福愉先生寿辰的最好庆贺，也是从事生物膜研究的同事、同仁们对生物膜研究领域中共同感兴趣的热点问题深入开展学术交流的一个良好机会，特别是对进一步激励有志于生物膜研究的年轻一代将起到积极的促进作用。

“朊病毒”比其他译名好——兼述《生物化学与分子生物学名词》中缩写词的定名

近四分之一世纪，为了促进科学的交流和发展，生物化学与分子生物学中出现大量（大概以万计）的缩写词或缩略语。缩写词有以下几种情况：

中国膜生物学的开拓者——杨福愉院士——庆贺杨福愉院士八十华诞

在这金秋宜人时光,我们怀着极其敬重与喜悦的心情迎来了杨福愉院士的八十华诞.值此庆贺寿辰之际,我们回顾杨福愉先生五十年来的科研活动,探讨他的学术思想,了解他的研究成果,这不仅是对杨福愉先生寿辰的最好庆贺,也是从事生物膜研究的同事、同仁们对生物膜研究领域中的前沿和热点问题进行深入交流和切磋的一个良好机会,特别是对进一步激励有志于生物膜研究的年轻一代将起到积极的促进作用.

生物化学的新分枝──古生物化学简介

生物化学的新分枝──古生物化学简介李文杰（中国科学院上海生物化学研究所，２０００３１）关键词化石，古生物化学近年来，分子生物学家们不断从化石中获得了不同的ＤＮＡ片段并成功地对它们进行了顺序分析。这是饶有兴趣的。ＤＮＡ可以很好地保存在博物馆收藏品的干燥...

日本血吸虫中国大陆株28kDa GST基因在大肠杆菌中的表达

在大肠杆菌ＴＢ１中表达合日本血吸虫中国大陆株２８ｋＤｅ抗原基因的重组质粒，表达产物是融 合蛋白，分子量为３３ｋＤａ。采用谷胱甘肽琼脂糖亲和层析柱纯化表达产物。２、４－二硝基氯苯／谷胱 甘肽分光光度测定法和琼脂糖－淀粉凝胶电泳显示重组抗原具有较高的谷胱甘肽Ｓ－转移酶（ＧＳＴ） 活力。酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）结果表明该重组抗原可检测到重组２８ｋＤａ ＧＳＴ或日本血吸虫 虫体ＧＳＴ免疫绵羊血清中的特异性抗体；免疫印迹试验（Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔｔｉｎｇ）分析揭示重组抗原的 ３３ｋＤａ抗原分子能被这两种免疫血清识别，证明它具有ＧＳＴ抗原性。

真核生物mRNA 3′非翻译区的功能

真核生物mRNA的3′非翻译区的功能复杂多样,不仅能调控其mRNA的稳定性、控制mRNA的亚细胞定位,而且还在特定氨基酸的编码过程中起着指导作用.一些真核生物mRNA的3′非翻译区内的突变可引起疾病的发生.近几年的研究又发现,一些真核生物mRNA的3′非翻译区还具有抑制肿瘤生长的功能.

利用家蚕生物反应器生产有用蛋白的研究

就家蚕 / Bm NPV表达系统的原理及生产流程、外源基因在该系统中的表达及表达产物的药物开发作了较为详细的阐述 ,介绍了利用家蚕大量生产有用蛋白的技术开发状况 。

香菇病毒的分离、诊断、侵染途径和生物学特性

本文系统描述了香菇病毒病在菌丝体阶段和子实体阶段的各种症状。从具有典型病毒病症状的香菇菌丝体中分离出两种带毒菌株SLV-1和SLV-2的纯培养,并从这些菌丝体中纯化出一种34～35nm的球状病毒颗粒。测定结果表明,带毒菌株的纤维素酶、半纤维素酶、木质素酶活性和对木屑培养料中纤维素、半纤维素、木质素的降解能力比其正常菌株明显下降。在用单双核杂交研究香菇病毒的侵染途径中,证实了性亲和性因子是控制香菇病毒传播的一个主要遗传因子,并讨论了病毒感染是香菇菌种退化的主要原因。

m RNA5′端不同位置的二级结构对原核生物翻译起始的影响

一个 2 1 bp的序列插入 B50中的人 PCNA- Lac Z′融合蛋白 m RNA的 SD序列的上游 1 1 bpH ind 切点处 ,构成正、反向插入的两个重组质粒 B50 il、B50 i2 .通过计算机程序对 m RNA二级结构的模拟分析 ,B50 il的插入序列在翻译起始区 (TIR)前形成一个发夹结构 ,但不影响 TIR的二级结构 ;B50 i2的插入序列在 TIR 5′端形成一个二级结构 ;而另一克隆 D1 3与 B50因 SD前后的 6个和 7个碱基序列的不同 ;使翻译起始区 TIR的 SD到 AUG附近的二级结构不相同 .实验测定的四者的β-半乳糖苷酶活性与计算机计算的解开 m RNA TIR的二级结构所需能量ΔE进行比较 ,其结果说明 m RNA TIR前面的二级结构对翻译起始无影响 ,而位于 TIR的 5′端的二级结构对翻译起始效率是有影响的 .不过 ,它与 m RNA TIR的 SD到 AUG的附近的二级结构对翻译起始效率的影响相比 ,TIR5′端二级结构的影响比较小 .同时 ,PCNA- Lac Z和 PCNA- Lac Z′两种融合蛋白的β-半乳糖苷酶活性也进行了比较 ,酶活性有差别 ,但不同质粒酶活性的比值仍相同 .

日本血吸虫(中国大陆株)基因工程疫苗的研究

本文报道应用PCR技术或RT－PCR技术从日本血吸虫成虫cDNA文库或成虫mRNA中扩增到Sj28GST、C－Sjparamyosin、H-Sj23、Sj14、Sj22．6和Sj．TPI6个编码日本血吸虫中国大陆株抗原的基因，并把它们克隆入适合载体中，在大肠杆菌系统和蚕核型多角体病毒（BmNPV）系统中进行表达．免疫学检测证明这6种基因重组抗原都具有较好的抗原性。我们进一步应用4种比较成熟的基因重组抗原Sj26GST、Sj28GST、C－Sj．paramyosin和H－Sj23进行3批绵羊试验和1批黄、水牛田间试验，评估这几种重组抗原在绵羊和黄、水牛中的免疫保护效果，rSj26GST和rSj28GST分别获得62．1％和50.4％－68.5％的显著保护；n－paramyosin获得42.9％－55．3％、r－C－paramyosin获得44．2％－47．1％的显著保护，r－H－Sj23为51．2％－66．1％的显著保护．各组免疫后的粪便虫卵数和组织虫卵数也有不同程度的减少．用r－C－Sjparamyosin、r－Sj28GST和r－H－Sj23免疫典、水牛在血吸虫重疫区田间试验的结果表明，减虫率水牛高于黄牛，显示上述试验的3种日本血吸虫重组分子抗原有希望成为家畜日本血吸虫病的候选疫苗抗原．

日本血吸虫中国大陆株26kD GST基因在大肠杆菌中的高效表达

用大肠杆菌高效表达日本血吸虫中国大陆株 2 6k D GST基因 (Sj2 6)并观察表达产物诱导的免疫保护效果 .将 Sj2 6基因亚克隆至 p ET2 8b(+)中构建重组表达质粒 Sj2 6/ p ET,转化大肠杆菌 BL 2 1 (DE3) .Sj2 6在诱导条件下及未诱导条件下均获得高效表达 .表达产物 (r Sj2 6GST)以包含体形式表达 ,分子量为 2 8k D左右 ,能用 6× His亲和层析柱纯化 ,纯化产量为 55～ 60 mg/ L大肠杆菌培养物 .免疫印迹及 ELSA实验证实 r Sj2 6GST具有良好抗原性 .用 r Sj2 6GST不加佐剂直接背部皮下免疫昆明系小鼠 ,获得了 1 9.6% (P<0 .0 5)的减虫率及 31 .9% (P<0 .0 5)的成熟虫体减虫率 ;且免疫组检获的虫体中未成熟虫体的比例为 32 % (66/ 2 0 6) ,明显高于对照组的 1 9.6% (56/2 85) (P<0 .0 1 ) ,说明 r Sj2 6GST免疫不仅可诱导抗日本血吸虫的部分攻击感染作用 ,而且能抑制部分虫体的发育 .

日本血吸虫中国大陆株雌、雄成虫cDNA文库的构建

用TRIZOL试剂盒分别提取日本血吸虫中国大陆株雌、雄成虫总RNA ,Oligo(dT)纤维素柱纯化mRNA ,反转录合成第一链cDNA ,完成第二链cDNA合成后 ,凝胶电泳回收 5 0 0bp以上的片段并过柱纯化后 ,与载体λZipLox连接。体外包装后分别得到雌、雄成虫cDNA噬菌体表达文库。经测定雌、雄文库容量分别为 3 74× 10 6、3 2 8× 10 6,重组比率均在 96 %以上 ,插入片段长度多在 1kb左右。通过PCR技术 ,我们从文库中钓取到EGP、2 3kD膜蛋白、Actin和GCP的cDNA ,其中GCP基因为低丰度表达基因。各项指标表明 ,我们成功构建了高质量的cDNA文库 。

醋酸纤维素膜为基础的葡萄糖生物传感器的研制

采用共价法将酶固定在醋酸纤维素膜上,方法简便易行,制造的酶膜稳定,比活力高。同时采用该方法制备了葡萄糖氧化酶酶膜,与氧电极组装成测定葡萄糖的生物传感器,线性范围为50～800mg/dl,仪器工作的最适pH为6.0,最适温度为40℃。将该膜与过氧化氢电极组装得到的传感器具有以下特性:线性范围为10～200mg/dl,最适pH为6.0,测定结果与酶试制盒有良好相关性。

中国小麦丛矮病毒与日本北方禾谷花叶病毒相关性的研究

从过去各自独立进行的研究工作中了解到,中国小麦丛矮病毒(WRSV)与日本北方禾谷花叶病毒(NCMV)有很大的相似性,但尚无直接证据证明这两种病毒之间的关系。本文从下述三个方面证明这两种病毒是相同的:(1)奥氏双扩散法证明,WRSV的核衣壳抗血清能同时与WRSV和NCMV核衣壳形成清晰的沉淀带,并且异源形成的相邻沉淀带能互相吻合;(2)WRSV和NCMV核衣壳制剂的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳证明两者的N蛋白分子量一致的,均与我们过去报道的N_2蛋白的分子量相等;(3)从WRSV和NCMV的完整病毒及核衣壳的横纹周期间距直接比较,两者也是一致的。至于WRSV和NCMV是完全相同的病毒,还是同一种病毒的不同株系,则尚需对两者的寄主范围等作进一步的研究。

日本血吸虫中国大陆株22.6kD膜相关蛋白基因的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达

以日本血吸虫ｍＲＮＡ为模板，用ＲＴＰＣＲ法快速克隆到一大小约６００ｂｐ的ＤＮＡ片段，ＤＮＡ序列分析证实，所扩增到的ＤＮＡ片段中含有日本血吸虫２２６膜相关蛋白（Ｓｊ２２６（Ｃｈ））基因，将该基因重组到表达型质粒ｐＧＥＸ４Ｔ中，表达的ＧＳＴ融合蛋白分子量约４８ｋＤ，用谷胱甘肽琼脂糖凝胶亲和层析柱纯化的重组蛋白不仅纯度好，而且得率高，纯化产量可达４０ｍｇ／Ｌ培养物，免疫试验结果表明该重组蛋白具有良好的抗原性，为其在血吸虫病抗感染中的免疫作用研究创造了条件。

糖类的生物信息学资源

生物信息学在推动遗传学和蛋白质科学的研究领域中,已发挥了举足轻重的作用.相比较而言,糖科学产生的信息还比较有限,随着人们对糖类分子的关注,糖生物学的发展也出现新的契机,其信息正在飞速地增长.对已经获得的糖类相关知识进行系统整合就显得越来越有必要,许多研究型数据库和免费工具已应运而生,并且数目在不断扩大,正成为科学工作者非常便利的工具.但到目前为止,许多数据库或者网络预测工具在文献中很少提及或难以找到,给研究者带来了不少的麻烦.部分原因是数据库资源本身数据不断在更新,人机界面也变得越方便和人性化,另外就是人们对于这些新型的研究工具了解较少.这篇综述介绍了目前网络上最常用的糖类生物信息学资源,包括糖的一级结构,分析测试数据、构象,酶,凝集素,糖蛋白等方面的各种数据库.

中国棉铃虫核型多角体病毒DNA聚合酶基因的克隆和序列分析

应用谷实夜蛾核型多角体病毒（ＨｚＳＮＰＶ）ＤＮＡ聚合酶基因ＨｉｎｄⅢ／ＰｓｔⅠ３５９６ｂｐ片段作探针，经Ｓｏｕｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交，克隆了中国棉铃虫核型多角体病毒（ＨａＳＮＰＶ）完整的ＤＮＡ聚合酶基因，大小约为３．４ｋｂ。限制性内切酶分析表明，ＨａＳＮＰＶＤＮＡ聚合酶基因限制性内切酶图谱与ＨｚＳＮＰＶ相似。用双脱氧链终止法测定该基因部分核苷酸序列（８０５ｂｐ），推导出编码区２０６ａ。序列同源性比较显示，ＨａＳＮＰＶＤＮＡ聚合酶与ＨｚＳＮＰＶ之间具有高度的同源性；与ＬｄＭＮＰＶ、ＡｃＭＮＰＶ、ＢｍＳＮＰＶ。

导电聚合物生物传感器的研究进展

导电聚合物因其良好的导电性能,可作为分子导线使电子在生物活性物质与电极间直接传递,是构建生物传感器的一种新材料。主要讨论了导电聚合物生物传感器的构建、生物活性物质的固定化。简要地回顾了此类生物传感器在医学、食品工业和环境监测等领域中的应用。

大鼠心房肽Ⅲ及其小分子类似物的合成与生物活性

以逐步合成法固相合成了大鼠心房肽Ⅲ（ＡＰⅢ）及２２肽的小分子类似物。用无水氟化氢将肽从树脂上切下，同时脱除所有侧链保护基。还原产物在３０％乙酸高度稀释下用碘作氧化剂，使分子内２个半胱氨酸氧化形成二硫键。经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－ｌ５柱层析、透析和高效液相层析分离纯化，获得在反相高效液相层析（分析柱）为单一峰的高纯度产物。酸水解后氨基酸组成分析证实与理论值相符，生物活性测定表明，合成的ＡＰⅢ有强利尿、利尿钠、降血压和舒张血管乎滑肌作用。化学修饰后的小分子ＡＰⅢ类似物有ＡＰⅢ的全部生物活性，且作用时间延长。