“朊病毒”比其他译名好——兼述《生物化学与分子生物学名词》中缩写词的定名

近四分之一世纪，为了促进科学的交流和发展，生物化学与分子生物学中出现大量（大概以万计）的缩写词或缩略语。缩写词有以下几种情况：

中国膜生物学的开拓者——杨福愉院士——庆贺杨福愉院士八十华诞

在这金秋宜人时光,我们怀着极其敬重与喜悦的心情迎来了杨福愉院士的八十华诞.值此庆贺寿辰之际,我们回顾杨福愉先生五十年来的科研活动,探讨他的学术思想,了解他的研究成果,这不仅是对杨福愉先生寿辰的最好庆贺,也是从事生物膜研究的同事、同仁们对生物膜研究领域中的前沿和热点问题进行深入交流和切磋的一个良好机会,特别是对进一步激励有志于生物膜研究的年轻一代将起到积极的促进作用.

导电聚合物生物传感器的研究进展

导电聚合物因其良好的导电性能,可作为分子导线使电子在生物活性物质与电极间直接传递,是构建生物传感器的一种新材料。主要讨论了导电聚合物生物传感器的构建、生物活性物质的固定化。简要地回顾了此类生物传感器在医学、食品工业和环境监测等领域中的应用。

真核生物pre-mRNA剪接的研究进展

Pre-mRNA剪接,即把内含子去除并把外显子序列连接成为成熟的mRNA,是基因表达与调控的重要环节之一。本文在概述真核基因mRNA剪接反应机制的基础上,主要讨论pre-mRNA的剪接机器,剪接体如何催化pre-mRNA剪接反应和pre-mRNA选择性剪接等方面的研究进展。

真核生物mRNA 3′非翻译区的功能

真核生物mRNA的3′非翻译区的功能复杂多样,不仅能调控其mRNA的稳定性、控制mRNA的亚细胞定位,而且还在特定氨基酸的编码过程中起着指导作用.一些真核生物mRNA的3′非翻译区内的突变可引起疾病的发生.近几年的研究又发现,一些真核生物mRNA的3′非翻译区还具有抑制肿瘤生长的功能.

小鼠胚胎干细胞分化为血管内皮细胞的永生化研究

本文探讨了小鼠胚胎干细胞(ES细胞)诱导分化的血管内皮细胞永生化。在体外培养系统中,以维甲酸(RA)和转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导小鼠胚胎干细胞(ES细胞)的拟胚体(EB)分化为“圆形细胞”和由这些“圆形细胞”组成的血管样结构。经光学和扫描电镜及免疫荧光等法分析检测,证明组成血管样结构的细胞具有专一性vWF荧光染色,表明是血管内皮样细胞。利用脂质体将人端粒酶催化亚基逆转录酶(hTERT)基因转染诱导分化中的“圆形细胞”。应用Dot-blot,RT-PCR,Western blot及免疫组织化学等方法分析、观察和证明了诱导分化的组成血管样结构的园形细胞和被hTERT基因转染的“圆形”细胞的形态和生物学特性。结果表明,携带hTERT基因的从ES细胞分化来的圆形细胞在体外可大量增殖,持续传代,95%具有血管内皮细胞的一些特有标志和管道化生长特性。因此,通过人端粒酶基因的转染途径可解决由ES细胞诱导分化而来的内皮细胞扩增和永生化问题,为构建组织工程化血管及其它人工血管的内皮化提供种子细胞来源打下基础。

EphA2对神经胶质瘤细胞系U251的凋亡﹑增殖﹑迁移和侵袭的研究

为了研究EphA2对神经胶质瘤细胞系U251在增殖、凋亡、迁移和侵袭方面所起的作用,用RT-PCR方法检测正常脑组织标本与两种恶性胶质瘤细胞系中EphA2 mRNA表达水平,然后用化学合成的针对EphA2基因的小干扰RNA(siRNA)下调该基因的表达,以检测其在U251中的生物学功能.证实了EphA2基因在正常脑组织标本中的表达水平远低于两种恶性胶质瘤细胞系.把体外化学合成针对EphA2基因的小干扰RNA(siRNA-EphA2)转染入U251细胞后,Western blot,实时定量RT-PCR检测到U251细胞中EphA2蛋白及mRNA表达水平都明显降低,并且细胞增殖受到显著抑制,同时出现了明显的细胞凋亡.伤口愈合实验(检测细胞迁移能力),Transwell小室实验(检测细胞侵袭能力)均表明,下调EphA2的表达后,细胞的迁移和侵袭能力较阴性对照组显著减弱.上述结果表明,在神经胶质瘤U251细胞中,EphA2与其恶性增殖及高度侵染性相关,可作为分子治疗的有效靶点.

胶质细胞源性神经营养因子受体α1基因的克隆表达及其活性研究

为了获得重组胶质细胞源性神经营养因子受体α1(glialcellline derivedneurotrophicfactorreceptoralpha1,GFRα1)并研究其生物学活性 ,从新生 4天的SD大鼠海马组织中提取总RNA ,通过RT PCR方法 ,扩增出GFRα1cDNA .将GFRα1cDNA克隆至含T7启动子的质粒 pET 2 8a (+)中 ,构建表达质粒 pET GFRα1,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,获得表达菌株BLGFRα1.表达菌株经 1mmol/LIPTG诱导 3～ 5h后 ,GFRα1蛋白表达 ,并形成包涵体 .凝胶自动扫描分析表明 ,GFRα1表达量占全菌总蛋白的 2 1 5 % ,用Ni2 + NTA树脂纯化和复性后 ,纯度达 90 %以上 。

糖类的生物信息学资源

生物信息学在推动遗传学和蛋白质科学的研究领域中,已发挥了举足轻重的作用.相比较而言,糖科学产生的信息还比较有限,随着人们对糖类分子的关注,糖生物学的发展也出现新的契机,其信息正在飞速地增长.对已经获得的糖类相关知识进行系统整合就显得越来越有必要,许多研究型数据库和免费工具已应运而生,并且数目在不断扩大,正成为科学工作者非常便利的工具.但到目前为止,许多数据库或者网络预测工具在文献中很少提及或难以找到,给研究者带来了不少的麻烦.部分原因是数据库资源本身数据不断在更新,人机界面也变得越方便和人性化,另外就是人们对于这些新型的研究工具了解较少.这篇综述介绍了目前网络上最常用的糖类生物信息学资源,包括糖的一级结构,分析测试数据、构象,酶,凝集素,糖蛋白等方面的各种数据库.

hNIS基因转导黑色素瘤细胞介导放射性碘摄取的实验研究

目的 获取人钠 /碘同向转运体 (hNIS)基因cDNA ,研究其转导黑色素瘤细胞在体外和体内能否介导放射性碘摄取 ,从而探索该策略用于黑色素瘤放射性碘治疗的可能性。方法 运用逆转录聚合酶链反应从人甲状腺组织总RNA中扩增出hNIS基因cDNA ,将其克隆至真核载体pc DNA3 中 ,电转化法分别将重组质粒pc DNA3 hNIS及空质粒pc DNA3 转导黑色素瘤细胞 (B16 ) ,分别建立了细胞系B16 A和B16 B。在体外培养条件下检测其对放射性碘的摄取及外流情况 ,继而将三种细胞系接种C5 7小鼠行13 1I显像和肿瘤摄取12 5I动态定量测定。结果 成功克隆到hNIS基因 ,并建立了能稳定表达hNIS的新型细胞系B16 A。B16 A细胞的摄碘能力较B16细胞高 17倍 ,较B16 B细胞高 19倍。碘的外流过程迅速 ,T1/ 2eff仅 10min。体内实验发现B16 A细胞所形成肿瘤能摄取放射性碘 ,腹腔注射12 5I后 1、2、4、12、2 4h肿瘤组织的 %ID/ g平均为 12 .2 2、10 .91、8.73、1.2 4、0 .19,12 5I在肿瘤组织内的生物半衰期约为 6h。B16 A细胞系所成肿瘤摄碘量与对照组相比较 ,P <0 .0 1,差别具有高度统计意义。结论 hNIS基因转导黑色素瘤细胞足以介导放射性碘摄取 ,但有效半衰期较短 ,难以产生足够的治疗剂量 ,有必要进一步研究如何增加放射性碘的摄取?

血管平滑肌细胞中睾酮膜受体的研究

目的:观察血管平滑肌细胞(VSMCs)胞膜有无睾酮(T)特异性结合位点(膜受体),并对其与经典的细胞内雄激素受体(iAR)的关系作初步探讨。方法:贴块法培养雄性SD大鼠胸主动脉VSMCs,给以异硫氰酸荧光素(FITC)标记的牛血清白蛋白-睾酮复合物(T-BSA-FITC)作用,流式细胞仪检测VSMCs荧光标记情况,以及iAR拮抗剂氟他胺对T-BSA-FITC与VSMCs结合的抑制作用;用免疫荧光法标记胞膜完整和TritonX-100处理后胞膜透化VSMCs表达的iAR,流式细胞术检测细胞平均荧光强度,进一步转换为相对荧光强度进行统计学分析。结果:与0作用时间点相比,T-BSA-FITC与VSMCs作用10s,细胞相对荧光强度即显著增加(P<0.01);VSMCs与T-BSA-FITC作用10min,细胞相对荧光强度显著高于对应摩尔浓度的BSA-FITC、BSA-FITC+BSA、BSA-FITC+BSA+T对照(P值分别为0.357,0.832和0.823)。与单纯T-BSA-FITC作用相比,预先给以iAR拮抗剂氟他胺对VSMCs荧光强度没有显著影响(P=0.318)。胞膜完整VSMCs与iAR抗体作用后,细胞相对荧光强度较单纯加入FITC标记二抗无明显增加(P=0.733);而胞膜透化VSMCs与iAR抗体作用后,细胞荧光强度较单纯FITC标记二抗处理明显增加(P=0.024)。结论:VSMCs中存在睾酮膜受体,其性质不同于经典的iAR。

TET去甲基化酶在T细胞中的功能研究

DNA甲基化作为最重要的表观遗传修饰之一,在基因表达调控方面起重要作用。哺乳动物DNA甲基化主要发生在胞嘧啶第五位碳原子上,称为5-甲基胞嘧啶(5-methylcytosine,5mC). TET(Ten eleven translocation)家族蛋白氧化5-甲基胞嘧啶成为5-羟甲基胞嘧啶、5-醛基胞嘧啶和5-羧基胞嘧啶的一系列DNA去甲基化过程。TET家族蛋白和DNA去甲基化修饰在T细胞中的功能也逐渐被揭示。本文主要将近年研究TET去甲基化酶在T细胞中的功能进行总结和讨论。

细胞凋亡的结构生物学研究进展

在多细胞生物体内,细胞会发生编程性死亡(即细胞凋亡),使得细胞数量得到精确调控。细胞凋亡调控的异常与癌症、自身免疫病、神经退行性疾病等疾病密切相关。在过去的二十年里,人们详细地研究了参与细胞凋亡调控的分子机制。该文综述了近年来利用结构生物学手段,对参与细胞凋亡调控的分子,主要是Caspase和与Caspase活性调控直接相关的蛋白功能的研究进展。

多吡啶钌(Ⅱ)配合物的合成及其与RNA相互作用的光谱学研究

A new ruthenium polypyridine complex, [Ru(phen) 2(pMIP)] 2+(phen=1,10-phenanthroline, pMIP=2-(4-methylphenyl)imidazo phenanthroline), was synthesized and characterized by elementary analysis, MS and 1H NMR. Spectroscopic methods have been carried out on the interaction mechanism of the Ru (Ⅱ) complex with yeast tRNA systematically. The experimental results indicate that the complex binds to yeast tRNA with an intercalative mode possibly, and interacts with yeast tRNA enantioselectively. The experimental results also suggest that spectroscopic method is effective on studying the interaction mechanism of Ru (Ⅱ) complexes with RNA. Information obtained from the study is potentially useful in the design of new RNA-targeting drugs.

紫杉醇的最新研究进展

紫杉醇通过激活肿瘤细胞的Ｆａｓ／ＦａｓＬ通路及半胱氨酸－天冬氨酸蛋白酶诱导凋亡，ｂｃｌ－２对紫杉醇诱导的凋亡也有重要的调节作用。紫杉醇还具有脂多糖样活性，可诱导巨噬细胞释放肿瘤坏死因子α、白介素和一氧化氮等。肿瘤细胞对紫杉醇的耐药研究也有不少新进展。

中枢神经系统靶向性Mn-SOD的克隆和在大肠杆菌中的表达研究

靶向性超氧化物歧化酶 (SOD)是治疗氧自由基引起神经细胞损伤所致疾病等的有效途径 .将破伤风毒素C部分 (tetanustoxinfragmentC ,TTC)基因与编码Mn SOD的cDNA融合克隆进pET 2 2b(+)载体 ,1mmol/L异丙基 D 硫代半乳糖 (IPTG)诱导在大肠杆菌中表达 .SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)图谱可见约 71ku有表达产物条带 ,与理论计算值相符 ;蛋白质印迹 (Westernblot)分析显示 ,表达产物与抗Mn SOD及破伤风毒素的多抗有免疫反应 ,而且表达产物用邻苯三酚自氧化法测定具有SOD活性 .融合蛋白可作为有效的试剂靶向性输送Mn SOD到神经元细胞 。

家蚕微孢子虫原位杂交诊断技术研究

根据家蚕微孢子虫rRNA基因高度保守的特点,设计合成了1对PCR引物,从家蚕微孢子虫基因组DNA上扩增出1个12kb片段,用同位素标记后作为检测家蚕微孢子虫的特异性探针。采用原位杂交的方法,对家蚕卵及感染家蚕微孢子虫4、6、10d的幼虫进行原位杂交检测。实验结果表明,该方法可以从家蚕单粒卵内检测到296粒孢子,对感染家蚕微孢子虫4、6、10d的幼虫均有阳性杂交信号出现。

垂体腺苷酸环化酶激活肽基因的合成表达与活性研究

根据文献报道垂体腺苷酸环化酶激活肽 (pituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide,PACAP)的氨基酸序列 ,推导出其核苷酸序列并设计成部分互补的 6条寡核苷酸片段 ,利用DNA合成仪人工合成、纯化这 6条寡核苷酸片段 ,通过片段退火、连接、克隆及测序鉴定获得了PACAP基因 .将PACAP基因克隆至 pGEX 4T 3质粒中转化BL2 1进行表达分析 ,融合蛋白约占细胞总蛋白的 30 % ,其中部分为可溶性 ,部分以包涵体形式存在 .通过亲和层析纯化GST PACAP融合蛋白 ,该蛋白质能促进PC12细胞轴突生长及脊髓神经元存活 .

rhGM-CSF联合rhIL-4诱导慢性粒细胞白血病细胞来源的树突状细胞

目的 用rhGM CSF联合rhIL 4将慢性粒细胞白血病 (CML)原代细胞诱导成树突状细胞 (DC) ,探索白血病免疫治疗的新途径。方法 分离初诊CML患者外周血单个核细胞 (PBMNC) ,用rhGM CSF联合rhIL 4共同培养 7d ;流式细胞仪 (FACS)检测细胞因子诱导前后细胞表面HLA DR、CD1a、CD80和CD86的表达 ,电镜观察细胞形态。结果 经 7d的诱导 ,HLA DR、CD1a、CD80和CD86的表达明显上调 ;电镜观察到典型的DC形态特征。结论 rhGM CSF联合rhIL 4可成功将CML原代细胞诱导成CML DC 。

家蚕丝素重链启动子克隆片段在家蚕体内和昆虫培养细胞内的渗漏表达

为了探讨家蚕丝素重链基因的调控机制,应用重组苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV)为基因转移载体,以绿色荧光蛋白基因为报告基因,研究了丝素重链基因启动子克隆片段在家蚕丝腺的不同部位,以及脂肪体细胞和Sf9培养细胞中的表达渗漏。结果发现,丝素重链启动子克隆片段在家蚕中部丝腺存在表达渗漏,并且在中部丝腺前部的表达活性要强于中部丝腺的中部和后部；克隆片段在脂肪体组织存在表达渗漏,通过荧光解剖显微镜可以在体表观察到绿色荧光；克隆片段在Sf9培养细胞中也存在表达渗漏。上述结果说明目前已知的有关家蚕丝素重链基因的调控元件仍不充分,家蚕基因组中可能还有其他调控丝素重链基因表达组织和时相的特异性元件存在。