反向生物学

一、反向生物学——基因工程的最大冲击波。十几年之前,基因工程出现,生物的基因物质——DNA在化学物质上十分相似,因而基因的纯化,鉴定、结构与功能的研究,曾经为此长期处于困境。基因工程。

孕期及哺乳期缺锌饲喂对仔鼠学习能力及海马长时程增强的影响

探讨了小鼠孕期和哺乳期饲喂轻度缺锌饲料对仔鼠学习记忆能力的影响．实验动物为成年雌性ICR小鼠30只及其所产的仔鼠30只．怀孕母鼠随机分为3组：（A）对照组；（B）孕期及哺乳期轻度缺锌组及（C）孕期轻度缺锌组．对照饲料及轻度缺锌饲料的锌含量分别为100mgZn／kg和5mgZn／kg。A组小鼠饲喂对照饲料；B组小鼠孕期及哺乳期皆饲喂轻度缺锌饲料，而C组孕期饲喂缺锌饲料、哺乳期饲唱对照饲料．断奶后（出生第20天后）仔鼠饲喂对照饲料。70日龄（P70）后分别在穿梭箱内测试备组仔鼠的学习能力。行为测试则采用条件性回避反应模型。实验结果表明，BRC组仔鼠达到学会标准所需次数分别为45．0±5．9（n＝7）和41．7±4．8（n＝12），明显多于A组（34．7±3．9，n＝11），而B组与C组间无显著性差异。行为实验结束后，在A组和B组仔鼠的海马脑片上进行了诱导长时程增强（LTP）的实验，B组脑片上诱导的LTP明显低于A组。结果提示：孕期及哺乳期锌缺乏可造成学习能力的下降，同时也影响海马的突触可塑性，而孕期可能是锌缺乏造成这种脑功能损伤的关键时期．

红花菜豆(矮生红花变种)凝集素分子的色氨酸残基修饰与其活性的关系

用各种化学试剂修饰红花菜豆（Ｐｈａｓｅｏｌｕｓｃｏｃｃｉｎｅｕｓｖａｒｒｕｂｒｏｎａｎｕｓ，Ｂｅｒｒｙ）凝集素（简称ＰＣＬ）分子，测定与其活性相关的氨基酸残基．经ＮＢＳ修饰表明ＰＣＬ具有８个Ｔｒｐ残基，其中４个暴露于分子表面，此４个Ｔｒｐ残基被修饰后，ＰＣＬ的凝血活性完全丧失．比较ＰＣＬ修饰前后的ＣＤ光谱表明修饰不改变其二级结构。修饰Ｔｙｒ，Ａｒｇ，Ｈｉｓ残基和游离氨基及羧基不影响ＰＣＬ的血凝活性．巯基也不是血凝活性所必需，但是ＰＣＬ分子中的二硫键被还原，或被ＣＮＢｒ分解为两个片断则使蛋白质丧失血凝活性。

虫萤光素酶固定化及其传感器

本文比较了戊二醛法，环氧法、重氮法和ＣＮＢｒ活化等方法固定虫莹光素酶，发现ＣＮＢｒ活化Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ后固定该酶的交果最佳．获得较高比活性（７５０ｕ／ｇ）和良好稳定性的固定化虫萤光素酶．我们构建了一套利用光纤传导的虫萤光素酶的测活装置；并以ＣＮＢｒ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ固定化酶为核心建成光纤生物传感器和柱式流动分析装置．可测定１０－１１～１０－８ｍｏｌ／ｍｌＡＴＰ．

肝动脉灌注LAK/IL-2及化疗药物治疗晚期肝癌

目的 观察经皮肝动脉插管化疗药物灌注、栓塞术联合 LAK/IL -2灌注治疗中晚期肝癌的疗效、T淋巴细胞改变及副反应。方法 96例经确诊的中晚期肝癌 ,随机分为动脉化疗栓塞联合 LAK/IL -2观察组及单纯介入化疗栓塞组各 48例。两组均采用经皮穿刺肝动脉插管灌注化疗药物及栓塞。化疗药物 5 -FU 10 0 0 mg+卡铂 3 0 0 mg+表阿霉素 3 0 mg或丝裂霉素 10～ 2 0 mg,栓塞剂为碘化油和明胶海绵 ,介入治疗 3～ 4周 1次 ,2次为 1疗程。观察组在栓塞后沿导管灌注同种异体 LAK细胞 1× 10 9/10 0 ml及 IL-2 40万U,2次介入间隔观察每周 3次静滴 1× 10 9/10 0 ml LAK细胞及每日肌注 IL-2 10万 U。结果 观察组总有效率 ( CR+PR)为 7.2 9%( 3 5 /48) ,对照组总有效率 ( CR+PR)为 5 8.3 % ( 2 8/48) ,两组比较相差有显著差性 ( P<0 .0 5 )。观察组 T淋巴细胞治疗前后变化有统计学意义 ( P<0 .0 1) ,而对照组无统计学意义。结论 同种异体 LAK细胞联合化疗及栓塞治疗中晚期肝癌较单纯介入化疗栓塞疗效明显提高 。

绘制光滑曲线的样条函数简便算法

前言许多自动化测试分析系统都要把采集到的一些离散的数据以曲线的形式输出。要使绘制的曲线通过这些数据点,并且光滑,三次样条函数插值是一种非常合适的方法。一、常用的三次样条函数设在(?)平面上给定一些有序的点:

原卟啉和血清蛋白的时间分辨光谱

我们首次测得了人体内源性原叶琳原卟啉（PP）和血清蛋白（BSA）及其混合液的荧光衰减寿命和时间分辨光谱。结果显示，BSA和PP的混合使得BSA的荧光寿命变短，而PP的荧光寿命则变长，从而进一步肯定了BSA→PP的能量传递过程的存在，并为光敏治癌的机理研究提供了有用的依据。

枯草杆菌蛋白酶E的结晶及初步衍射研究

对来源于枯草芽孢杆菌的枯草杆菌蛋白酶E进行了初步晶体学研究。应用悬滴汽相扩散法生长出了该酶的单晶体,其空间群为P2_12_12_1,晶胞边长a=74.35A,b=80.98A,c=88.59A。已用面探测器衍射仪收集了一套中等分辨率的X射线衍射数据。

原位微环境与nm23-H1、H-rasmRNA量及肝癌肝内转移的关系

目的研究原发性肝癌原位微环境与转移相关基因ｎｍ２３－Ｈ１、Ｈ－ｒａｓｍＲＮＡ量及肝癌肝内转移的关系。方法对２５例肝细胞肝癌患者手术切除标本，采用ＲＴ－ＰＣＲ法定量检测其ｎｍ２３－Ｈ１、Ｈ－ｒａｓｍＲＮＡ量；用免疫组化方法分析微环境之重要因素微血管密度（ＭＤＶ）及癌细胞增殖情况指标－增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）。结果伴肝内转移癌组织其ＭＤＶ（Ｐ＝０．００５）、ＰＣＮＡ（Ｐ＜０．０１）指标明显高于不伴肝内转移组，其ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ量则相反（Ｐ＜０．０１），Ｈ－ｒａｓｍＲＮＡ量相差不显著（Ｐ＞０．０５）；ＭＤＶ与ＰＣＮＡ指数呈正相关（Ｐ＜０．０１），ｎｍ２３Ｈ１ｍＲＮＡ量与ＰＣＮＡ指数呈负相关（Ｐ＜０．０５）。结论肝癌转移前有一明显的微环境不佳及癌细胞增生受抑制的过程。提示肝癌生长中其原位微环境不良在转移发生中起重要的选择性作用；ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ量可反映高转移潜能癌细胞的优势化生长情况。

VEGF反义核酸抑制肿瘤血管形成的研究

目的探讨ＶＥＧＦ反义核酸作为抗新生血管形成药物和抗肿瘤药物的可能性。方法在小鼠角膜肿瘤模型上，测定两种ＶＥＧＦ反义核酸序列的５种不同修饰之反义核酸，对肿瘤血管形成和肿瘤生长的抑制作用。结果线性片段疗效较差，部分硫代和发夹结构两种修饰的反义核酸疗效满意。两种序列反义核酸混合使用最好。结论ＶＥＧＦ反义核酸有望成为抗肿瘤和抗新生血管形成的药物。