新药非临床安全药理学研究进展

安全药理学是新药非临床研究的重要组成部分,主要是研究药物剂量≥治疗剂量时,潜在的不期望出现的对生理功能的不良影响。近年来,随着分子生物学和生物技术等的进步,安全药理学的研究内容和研究范围有了较大的拓展。本文从国际国内安全药理学指导原则要求和修订,到中枢神经系统、心血管系统和呼吸系统安全药理及补充安全药理(胃肠道系统、泌尿系统、血液系统和肝胆系统)等方面,全面综述了新药非临床安全药理学研究进展。

d-Penicillamine2,5-enkephalin作为底物考察三明治大鼠原代肝细胞的转运体功能研究

目的:通过液相色谱-串联质谱(LC/MS/MS)法测定d-Penicillamine2,5-enkephalin(DP-DPE)在肝细胞和Hank's缓冲液中的浓度,研究DPDPE作为底物用于"三明治"培养大鼠原代肝细胞(SCRH)的转运体功能。方法:将SCRH与溶于Hank's缓冲液的DPDPE共温孵,采用LC/MS/MS法测定细胞内蓄积的和外排到缓冲液中的DPDPE浓度,用于评价模型药物α-萘异硫氰酸酯(ANIT)对参与DPDPE摄取的Oatp和负责DPDPE外排的Mrp2的转运功能的影响。结果:建立的样品处理和测定方法能够满足体外转运实验需要的灵敏度和线性范围,在Hank's缓冲液中线性范围为0.5～50ng/mL(r2=0.9995),在细胞基质中线性范围为0.1～5ng/well(r2=0.9997),样品处理操作简便。日内日间精密度(RSD)均小于15%;提取回收率大于65%。ANIT可抑制DPDPE在SCRH胆管侧的外排及基底侧的摄取,对基底侧外排无显著影响。结论:该分析方法选择性好,灵敏度高,操作简便,并成功地用于将DPDPE作为探针底物研究SCRH模型上转运体的功能。

默克尔细胞在多物种中的组织分布

环境刺激在野生动物的生存和进化中起了关键作用,协助感知触觉、温度等的细胞感受器也因此体现了生物多样性。默克尔细胞(Merkel cell,MC)是脊椎动物触觉敏感区重要的感觉细胞。本文采用文献调研和数据统计的方法,借助PubMed、ScienceDirect和中国知网等数据库对默克尔细胞的分布进行了调研。结果显示,默克尔细胞分布于动物界哺乳纲、两栖纲、鸟纲、爬行纲、圆口纲和辐鳍鱼纲6个纲77个物种。其中,默克尔细胞的组织病理研究主要集中在哺乳纲动物,占比达到50%,主要分布在人、猴、大鼠、小鼠、犬、猫、猪以及兔等物种;其次集中在两栖纲和辐鳍鱼纲动物。在组织脏器上,默克尔细胞在33个物种的鼻/触须中有分布,占比达到40%,提示鼻和触须是动物尤其是野生动物感知外界机械力刺激的重要部位;其次,腭、口周、手脚指掌、唇、舌、背皮、牙龈、四肢、腹皮、眼睛、颊和腮等触觉敏感部位的默克尔细胞在较多种属中有研究。系统地汇总已知物种中触觉敏感细胞默克尔细胞的分布,研究默克尔细胞在不同物种中的分布规律,有助于了解环境多样性在生物多样性中的作用。

补中益气汤配伍规律现代研究进展

补中益气汤由李东垣创制,具有补中益气、升阳举陷、甘温除热的功效,临床上常用于治疗与脾胃气虚及中气下陷等脾胃功能障碍有关的诸多病证。现代学者对补中益气汤的有效成分、药理作用、作用机制、质量标准和配伍理论等方面进行了广泛的研究。其中有关其配伍规律的研究的文献报道较多,但未见综述整理,该文旨在从该方药物配伍对其有效成分及药理作用的影响两方面入手,总结补中益气汤配伍规律的现代研究成果。研究表明,无论有效成分的研究还是药理作用的研究都证明了补中益气汤配伍的合理性,任何单味药物或药对的缺失,其药效均不如原方。在配伍对有效成分的影响方面,方中君臣药均可增加橙皮苷的含量,佐药可降低甘草酸的含量;在配伍对药理效应的影响方面,君药黄芪及益气健脾药味配伍在免疫调节方面起主导作用,而佐使药柴胡、升麻起关键性增效作用;同时益气升阳药味配伍对脾虚证模型动物的病理状态和代谢的调节有不可替代的作用。这些研究成果充分阐明了补中益气汤的方药配伍所涉及的中医基础理论和方剂学理论的科学性。经典方剂的配伍理论能充分体现中医基础理论及方剂学理论,而对经典方剂配伍规律的研究有利于更好地诠释中医基础理论,同时更好地指导临床应用及科学研究。

皮肤触觉感受器默克尔细胞功能研究进展

在由烧伤等因素导致的皮肤损伤修复过程中,触觉功能的重建离不开触觉感受器默克尔细胞的功能再生。默克尔细胞主要存在于表皮基底层,与神经紧密相连形成默克尔细胞-神经复合体,在生物机体内发挥重要作用。大量研究表明默克尔细胞通过机械门控离子通道PIEZO2对机械力刺激进行精确传导,行使触觉感受器的功能。该文通过论述默克尔细胞的特征,分析该类细胞可能存在的不同亚群及其功能,同时调研了触觉相关疾病的动物模型研究和触觉相关的临床疾病,揭示了默克尔细胞功能研究的重要性。

肝毒性风险的体外早期发现和预测

药物诱导的肝损伤(DILI)是临床研究中药品研发失败和药品上市后撤回的主要原因。动物模型对药物诱导的肝损伤风险进行预测,因为物种差异,准确性较差。因此,有效、快速的人源性体外肝毒性预测模型一直受到学术界和工业界的重视。本文综述了常用的体外肝毒性预测模型,以及对肝细胞培养方法的改进,尤其是共培养体系和三维培养系统可以有效提高体外肝毒性预测模型的准确性,也为临床药物肝毒性机制研究提供参考。

FDA关于DILI上市前评估指南及其修订

免疫疗法药物以及具有慢性肝病患者因药所致药物性肝损伤(DILI)的准确预测受到严峻挑战。Avigan系统回顾了当前指导原则制订的背景和目的,FDA指导原则的核心目标是在新药临床试验中DILI风险方面实现科学合理的一致、准确的检测、评估和管理。

遗传毒性早期快速评价方法

遗传毒性评价是药物安全性评价的重要组成部分。如何早期、快速地获得药物可能的毒性反应数据,是当前遗传毒理学领域的研究热点之一。介绍几种目前应用比较广泛或有较好应用前景的早期、快速的遗传毒性评价方法,包括AmesII试验、Gadd45 Green Screen试验、高通量体外彗星试验和流式细胞术检测微核试验,主要围绕这些方法的基本原理、简要操作流程、预测毒性的可信度以及与传统方法相比的优缺点等展开。同时简要介绍计算机辅助毒性预测模型以及基因芯片技术在遗传毒性评价中的应用。

GLP合规实验室数据治理体系和完整性评估矩阵的建立

介绍GLP实验室业务领域和监管官方对数据完整性的法规、指导原则、目的和要求,梳理数据治理体系的建立方法和流程,并介绍数据质量矩阵来帮助GLP实验室对自身质量状态进行评估。结果表明:数据完整性是GLP实验室官方质量评价中最为重要的指标之一,因此,用切实可行的方式来建立数据治理体系能确保GLP实验室质量的稳定,并能定期系统性的评估实验室的数据完整性,保持满足官方监管要求。本文探讨GLP实验室数据治理体系和完整性质量评估矩阵的建立,能为我国各领域GLP实验室更好地确保实验室数据的完整性提供参考。

Dicer1敲除对肝脏胆酸代谢和转运功能的影响

目的：微小RNA（microRNAs，miRNAs）在胆固醇的合成，代谢和转运中起着重要作用，而miRNAs在胆固醇代谢物胆酸的代谢和转运中的作用尚不清楚。Dicer基因是miRNAs生成过程的关键酶。本课题使用肝脏特异的Dicerl基因敲除小鼠，考察肝脏Dicerl基因敲除对C57BL／6小鼠肝脏胆酸代谢和转运的影响。方法：使用白蛋白启动子驱动的Cre重组酶和Loxp系统（Alb-Cre／Loxp）在小鼠肝脏中特异的敲除Dicerl基因；分别收集3~12周龄的小鼠血液和肝脏组织，使用Cobas生化仪检测小鼠血液和肝脏中总胆酸含量；利用实时定量PCR的方法分析肝脏中胆汁酸代谢转运相关基因的表达。结果：实验发现．肝脏Dicer基因敲除后，胆酸在血液和肝脏中明显蓄积，弥漫性肝细胞轻微空泡化，偶见单个肝细胞坏死。检测胆酸代谢和转运相关基因的表达发现，胆酸合成相关基因的表达有轻度升高，但缺乏统计学差异；在肝脏细胞血管侧的胆酸摄取转运体中，Oatplal在Dicerl敲除小鼠肝脏中明显下调，Ntcp和Oatplb2则无明显改变；而肝细胞血管侧胆酸外排转运体的表达均有显著升高，胆管侧的外排转运体中Abcbll表达有明显增加。结论：Dicer基因敲除后，胆酸在血液和肝脏中明显蓄积，肝脏和血液中胆酸总量显著增加。血液中胆酸的蓄积可能与肝脏细胞血管侧摄取转运体的低表达和血管侧外排转运体的高表达有关；而肝脏中胆酸的蓄积可能部分来自于轻度升高的胆酸合成酶，胆酸在肝细胞内运输途径的紊乱可能与肝脏和血液中胆酸总量的显著增加相关。