2型糖尿病基因多态性的病例对照研究

[目的]研究2型糖尿病与脂联素基因SNP+45、SNP+276的相互关系。[方法]采用单因素非条件Logistic回归分析,对上海市浦东新区常住居民中新发糖尿病患者(糖尿病组)及社区正常人群(对照组)各590人进行病例-对照研究。[结果]糖尿病组与对照组比较,脂联素基因SNP+45的3种基因型和等位基因分布的差异无统计学意义(χ2=1.44,P>0.05;χ2=1.35,P>0.05)。脂联素基因SNP+276的3种基因型和等位基因分布的差异有统计学意义(χ2=8.45,P<0.05;χ2=8.99,P<0.05),糖尿病患者T/T基因型多于对照组人群。单因素分析显示,脂联素基因SNP+276与糖尿病的关系有统计学意义。[结论]脂联素基因SNP+276与浦东新区汉族人群2型糖尿病的发病相关,脂联素基因的变异可能在2型糖尿病发病过程中起重要作用。

石英致MAPK／cyclinD1-CDK4信号转导通路的活化

目的 探讨石英诱导的人胚肺成纤维细胞（HELF）中丝裂素活化蛋白激酶（MAPK）／细胞周期蛋白和细胞周期蛋白依赖激酶（cyclinD1-CDK4）信号转导通路的活化。方法 两种处理方式：（1）石英刺激细胞2h后，收获细胞；（2）石英长时间（2个月）作用于细胞，使细胞具有部分转化细胞的特征（S-HELF），检测信号蛋白因子和细胞周期的变化。分别采用Westernblot、免疫细胞化学和流式细胞术方法检测细胞内信号蛋白和细胞周期的改变。选用特异化学抑制剂或分子抑制剂抑制上游激酶，检测下游激酶的变化。结果 HELF暴露于石英粉尘2h后，可以导致MAPK家族中ERK1/2、p38和JNK1／2 3个亚家族的磷酸化水平升高。在SHELF中，只有细胞外调节蛋白激酶（ERK）和C4un氨基末端激酶[JNK1（p46）]较未处理的HELF磷酸化水平增高。而JNK2（p54）的磷酸化水平没有变化，p38的磷酸化水平反而下降。cyclinD1和CDK4蛋白在SHELF中较HELF中表达增多。抑制ERK和JNK活化或者抑制核转录因子活化蛋白1（AP-1）的活化后，S-HELF中cyclin D1和CDK4蛋白过表达得到控制。而抑制p38的活性不能改变cyclinD1和CDK4蛋白过表达。结论 石英刺激HELF2h后可诱导ERK、JNK和p38的活化，而SHELF中ERK、JNK活化，p38没有被活化。SHELF中，cyclinD1和CDK4蛋白质过表达与ERK、JNK和AP-1活化有关。

ERK和JNK/活化蛋白-1通路在苯并(a)芘诱导人胚肺成纤维细胞周期改变中的作用

目的探讨丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/转录因子活化蛋白-1(AP-1)信号通路在调控苯并(a)芘[B(a)P]致人胚肺成纤维细胞(HELF)周期改变中的作用。方法用AP-1荧光素酶报告基因技术检测AP-1荧光素酶活力,流式细胞术测定细胞周期时相分布,免疫印迹法检测MAPK[包括细胞外调节蛋白激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)和p38激酶]总量及磷酸化水平,用MAPK显性失活突变体(DN)(DN-ERK2、DN-JNK1和DN-p38)证明通路的上下游关系。结果2μmol/L B(a)P分别处理细胞0、6、122、4 h,AP-1活力在12 h达峰值,是对照组的2.22倍,差异有统计学意义(P<0.05);ERK1/2、JNK1/2和p38蛋白激酶的磷酸化水平明显提高,分别是对照组的2.5、14.0和2.1倍;B(a)P处理组S期细胞比例(50.2%±4.6%)与对照组(16.7%±8.1%)相比明显增加,差异有统计学意义(P<0.01);ERK2和JNK1显性失活突变体的过表达均可明显降低B(a)P诱导的AP-1活力增强,并且明显降低B(a)P处理组S期细胞比例(分别为33.3%±1.7%,30.8%±3.9%),差异均有统计学意义(P<0.05);p38显性失活突变体的过表达对B(a)P引起的AP-1活力增强及S期细胞比例增加无影响。AP-1化学抑制剂姜黄素(20μmol/L)可明显降低B(a)P引起的S期细胞比例增加(13.6%±2.9%),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论ERK和JNK通过活化AP-1介导B(a)P诱导的细胞周期改变;而B(a)P诱导的AP-1活力增强及细胞周期改变与p38无关。