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转录因子E2F-1的DNA结合结构域与GST的融合表达和纯化
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作者 姜勇 徐应琪 +2 位作者 涂晓明 陈妍 施蕴渝 《中国科学技术大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期669-673,共5页
通过聚合酶链式反应方法扩增转录因子Ｅ２Ｆ－１中ＤＮＡ结合结构域的基因片段，并将其克隆到ｐＧＥＸ－２Ｔ表达载体中，转化ＢＬ２１菌株．经ＩＰＴＧ诱导，目的蛋白在大肠杆菌中得到高效表达，其表达量达１５％．经ＧＳＴ－Ａｇａｒ... 通过聚合酶链式反应方法扩增转录因子Ｅ２Ｆ－１中ＤＮＡ结合结构域的基因片段，并将其克隆到ｐＧＥＸ－２Ｔ表达载体中，转化ＢＬ２１菌株．经ＩＰＴＧ诱导，目的蛋白在大肠杆菌中得到高效表达，其表达量达１５％．经ＧＳＴ－Ａｇａｒｏｓｅ亲合层析，目的蛋白得到了高度纯化．经胶迁移率改变实验（ｇｅｌｓｈｉｆｔｍｏｂｉｌｉｔｙａｓａｙ）证明目的蛋白具有与腺病毒Ｅ２启动子ＤＮＡ片段结合的能力． 展开更多
关键词 转录因子 E2F-1 DNA结合结构域 GST 纯化
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