废弃鱼骨中蛋白质的提取分离及酶解工艺研究

以蛋白提取率和多肽分子质量分布为评价指标,采用不同提取方法和不同蛋白酶对废弃鱼骨蛋白质的提取和酶解工艺进行了研究。结果表明,高压蒸煮法提取的鱼骨蛋白质中蛋白含量为86.15%,蛋白提取率为16.76%,明显高于恒温水浴和热回流提取法。中性蛋白酶酶解的多肽中蛋白含量为88.46%,多肽比例高达95%以上,明显高于其他三种酶。先利用高压提取法提取蛋白质,再利用中性蛋白酶酶解蛋白质制备多肽,可降低酶用量,该方法为多肽工业化生产提供参考及新思路。

油橄榄叶提取物对糖代谢关键酶抑制作用及物质基础初步研究

目的:研究油橄榄叶提取物对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制作用,并对其物质基础进行初步研究。方法:利用大孔吸附树脂BMKX-4对油橄榄叶提取物中的活性成分进行选择性富集,依次用20%、40%、60%、80%的乙醇进行梯度洗脱,得到A、B、C、D 4个洗脱部位,分别考察4个部位对α-葡萄糖苷酶及α-淀粉酶的抑制效果,并结合HPLC法对各部位中4个共有成分羟基酪醇乙酰酯(X_1)、橄榄苦苷(X_2)、女贞苷(X_3)、2″-epifraxamoside(X_4)进行分析,以峰面积为指标,考察其与酶抑制活性的相关性。结果:提取物部位A对α-葡萄糖苷酶的抑制活性最强,部位C对α-淀粉酶的抑制活性最强。X_1、X_3与对α-葡萄糖苷酶的抑制率呈正相关,X_2、X_4与抑制作用呈负相关;X_2、X_4与对α-淀粉酶的抑制率呈正相关,X_1、X_3与抑制作用呈负相关。结论:油橄榄叶提取物不同的洗脱部位对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶都有一定的抑制作用,其中羟基酪醇乙酰酯与女贞苷可能是抑制α-葡萄糖苷酶的主要活性成分,而2″-epifraxamoside与橄榄苦苷可能是抑制α-淀粉酶的主要活性成分。

基于高剪切分散乳化技术提取油橄榄叶中有效成分的样品前处理新方法

本文研究了基于高剪切分散乳化技术(High-Speed Shear Dispersing Emulsification,HSDE)提取油橄榄叶中有效成分的样品前处理新方法。利用HPLC测定橄榄苦苷含量,利用UV(AlCl3显色法)测定总黄酮的含量。通过单因素试验分别考察溶剂、转速、料液比、时间及温度,筛选出最佳条件。以浸膏得率、橄榄苦苷和总黄酮的含量为综合指标进行评价,通过响应面中的中心组合设计,优选出最佳提取参数:温度40℃,料液比1∶51.72,溶剂60%乙醇,转速16000 rpm,提取时间150 s。结果表明高剪切分散乳化技术可以快速高效的提取油橄榄叶中有效成分,是一种较好的样品前处理方法。

同步提取锁阳总黄酮和多糖的工艺研究

目的优选同步提取锁阳总黄酮和总多糖的最佳工艺。方法以浸膏得率、浸膏中锁阳总黄酮含量和总多糖含量为指标进行综合评价,选择料液比,提取时间和提取次数为考察因素,利用L9(34)正交实验优选同步提取锁阳总黄酮和总多糖的量佳工艺。结果同步提取锁阳总黄酮和总多糖的最佳工艺为:m(锁阳)∶V(水)1∶10,回流提取2h,提取3次。结论研究结果真实可可靠,可为锁阳的合理开发和工业化生产提供科学依据。

废弃鱼皮中制备分离多肽的酶解工艺研究

目的:研究从废弃鱼皮中制备多肽的酶解工艺及参数。方法:利用不同特性的酶进行酶解,对酶解液测定5000 u以下的多肽所占比例,确定最佳水解酶。通过单因素试验分别考察时间、温度以及酶加入量选出最佳条件。以蛋白含量及多肽所占比例为评价指标,通过响应面的中心组合设计,优选出最佳酶解参数。结果:复合酶为63.27%、风味酶为56.51%、胰蛋白酶为39.45%,确定复合酶为最佳水解酶;通过单因素考察水解时间、温度以及酶加入量确定最佳条件分别为3 h、45℃、0.07%;通过响应面设计软件分析确定酶解的最佳参数为时间3 h,温度50℃,酶加入量0.5%。结论:通过酶的特性筛选出水解鱼皮的最适酶,进行单因素及响应面设计试验,对酶解工艺进行优化,得到最佳酶解参数,为工业化生产提供参考。

响应曲面法优化驼血多肽酶解工艺研究

试验以驼血为原料,利用响应曲面法(RSM)对驼血多肽的制备工艺进行优化。以酶解产物中低聚肽所占比例为响应值,考察蛋白酶A的加入量、酶解时间和酶解温度3个因素对驼血多肽酶解工艺的影响。在单因素试验的基础上,选取试验因素与水平,根据中心组合(Box-Behnken)试验设计原理,采用三因素三水平的响应曲面法对各个因素的显著性和交互作用进行分析。结果表明:驼血多肽酶解的最佳工艺条件为:蛋白酶A的加入量2.47%,酶解时间3 h,酶解温度60℃,该条件下酶解液中低聚肽所占比例为98.51%。试验可为从驼血中分离制备驼血多肽提供技术支持。

大孔吸附树脂分离纯化锁阳总黄酮工艺研究

目的建立大孔吸附树脂分离纯化锁阳总黄酮工艺。方法以大孔吸附树脂对锁阳总黄酮的分离效率和转移率为评价指标,通过静态和动态吸附/解吸附实验优化工艺条件。结果考察了6种大孔吸附树脂对锁阳总黄酮的分离纯化性能,以吸附/解吸附性能为评价指标,确定了GS-6为最佳大孔吸附树脂。在GS-6大孔吸附树脂上优选的最佳工艺条件为:上样浓度为0.038 g·ml-1(相当于原生药),以6 BV·h-1流速吸附,上样量为45 BV(树脂床体积),4 BV水冲洗树脂柱,8 BV的70%乙醇以4 BV·h-1的流速解吸附。在优化的工艺条件下,锁阳总黄酮得率为82.85%,纯度为83.44%。结论优选的GS-6大孔吸附树脂对锁阳总黄酮吸附容量、解吸附率和含量结果良好,优化的生产工艺条件适用于工业化生产。