废弃鱼骨中蛋白质的提取分离及酶解工艺研究

以蛋白提取率和多肽分子质量分布为评价指标,采用不同提取方法和不同蛋白酶对废弃鱼骨蛋白质的提取和酶解工艺进行了研究。结果表明,高压蒸煮法提取的鱼骨蛋白质中蛋白含量为86.15%,蛋白提取率为16.76%,明显高于恒温水浴和热回流提取法。中性蛋白酶酶解的多肽中蛋白含量为88.46%,多肽比例高达95%以上,明显高于其他三种酶。先利用高压提取法提取蛋白质,再利用中性蛋白酶酶解蛋白质制备多肽,可降低酶用量,该方法为多肽工业化生产提供参考及新思路。

基于高剪切分散乳化技术提取油橄榄叶中有效成分的样品前处理新方法

本文研究了基于高剪切分散乳化技术(High-Speed Shear Dispersing Emulsification,HSDE)提取油橄榄叶中有效成分的样品前处理新方法。利用HPLC测定橄榄苦苷含量,利用UV(AlCl3显色法)测定总黄酮的含量。通过单因素试验分别考察溶剂、转速、料液比、时间及温度,筛选出最佳条件。以浸膏得率、橄榄苦苷和总黄酮的含量为综合指标进行评价,通过响应面中的中心组合设计,优选出最佳提取参数:温度40℃,料液比1∶51.72,溶剂60%乙醇,转速16000 rpm,提取时间150 s。结果表明高剪切分散乳化技术可以快速高效的提取油橄榄叶中有效成分,是一种较好的样品前处理方法。

同步提取锁阳总黄酮和多糖的工艺研究

目的优选同步提取锁阳总黄酮和总多糖的最佳工艺。方法以浸膏得率、浸膏中锁阳总黄酮含量和总多糖含量为指标进行综合评价,选择料液比,提取时间和提取次数为考察因素,利用L9(34)正交实验优选同步提取锁阳总黄酮和总多糖的量佳工艺。结果同步提取锁阳总黄酮和总多糖的最佳工艺为:m(锁阳)∶V(水)1∶10,回流提取2h,提取3次。结论研究结果真实可可靠,可为锁阳的合理开发和工业化生产提供科学依据。

鱼胶原蛋白提取方法研究进展

中国是渔业大国,资源十分丰富,但是相关的技术研究比较落后。对近年来国内外有关鱼胶原蛋白的提取方法进行了综述,讨论了这些提取方法的最新研究进展以及存在的问题,展望了今后的发展前景。

废弃鱼皮中制备分离多肽的酶解工艺研究

目的:研究从废弃鱼皮中制备多肽的酶解工艺及参数。方法:利用不同特性的酶进行酶解,对酶解液测定5000 u以下的多肽所占比例,确定最佳水解酶。通过单因素试验分别考察时间、温度以及酶加入量选出最佳条件。以蛋白含量及多肽所占比例为评价指标,通过响应面的中心组合设计,优选出最佳酶解参数。结果:复合酶为63.27%、风味酶为56.51%、胰蛋白酶为39.45%,确定复合酶为最佳水解酶;通过单因素考察水解时间、温度以及酶加入量确定最佳条件分别为3 h、45℃、0.07%;通过响应面设计软件分析确定酶解的最佳参数为时间3 h,温度50℃,酶加入量0.5%。结论:通过酶的特性筛选出水解鱼皮的最适酶,进行单因素及响应面设计试验,对酶解工艺进行优化,得到最佳酶解参数,为工业化生产提供参考。

鹿血低聚肽清除自由基活性的研究

分别采用DPPH·法和邻二氮菲-Fe2+氧化法测定鹿血低聚肽清除DPPH·和·OH自由基活性能力。以还原型谷胱甘肽和抗坏血酸为对照,在优选的反应体系中,鹿血低聚肽、谷胱甘肽和抗坏血酸对·OH的半数抑制质量浓度(IC50)分别为4.520 mg/mL,0.357 mg/mL和0.100 mg/mL;对DPPH·的IC50值分别为2.520 mg/mL,0.030 mg/mL和0.003mg/mL。结果表明,鹿血低聚肽具有一定的清除自由基活性,研究结果为鹿血低聚肽的应用提供一定参考。

大孔吸附树脂分离纯化锁阳总黄酮工艺研究

目的建立大孔吸附树脂分离纯化锁阳总黄酮工艺。方法以大孔吸附树脂对锁阳总黄酮的分离效率和转移率为评价指标,通过静态和动态吸附/解吸附实验优化工艺条件。结果考察了6种大孔吸附树脂对锁阳总黄酮的分离纯化性能,以吸附/解吸附性能为评价指标,确定了GS-6为最佳大孔吸附树脂。在GS-6大孔吸附树脂上优选的最佳工艺条件为:上样浓度为0.038 g·ml-1(相当于原生药),以6 BV·h-1流速吸附,上样量为45 BV(树脂床体积),4 BV水冲洗树脂柱,8 BV的70%乙醇以4 BV·h-1的流速解吸附。在优化的工艺条件下,锁阳总黄酮得率为82.85%,纯度为83.44%。结论优选的GS-6大孔吸附树脂对锁阳总黄酮吸附容量、解吸附率和含量结果良好,优化的生产工艺条件适用于工业化生产。

大孔吸附树脂的吸附机理

大孔吸附树脂(macroprous adsorption resin,MAR)是近几十年发展起来的一种具有多孔立体结构、人工合成的有机高分子聚合物。由于其特殊的理化性质和吸附性能,已被广泛应用于化学、医药、环保和食品等领域。本文介绍了近年来国内外对大孔吸附树脂在吸附机理研究方面的进展,重点介绍了不同温度条件下大孔吸附树脂对靶标分子的吸附热力学行为模式,靶标分子在大孔吸附树脂表面及孔内的吸附扩散行为模式。此外,大孔吸附树脂性能参数和靶标分子结构参数之间构效关系也对其吸附选择性规律具有重要的影响。因此,大孔吸附树脂与底物间构效关系的匹配程度及其对选择性的影响是大孔吸附树脂分离理论研究的核心。本文最后介绍了可以准确客观描述吸附过程并具有一定使用范围的大孔吸附树脂吸附模型的建立和评价。

马鹿血蛋白的酶解及多肽的分离纯化

以马鹿血为原料,考察了蛋白酶种类和酶解方式对鹿血蛋白酶解效果的影响;考察了大孔吸附树脂对风味蛋白酶酶解液的吸附和分离性能。结果表明:中性蛋白酶和风味蛋白酶对鹿血蛋白的酶解效果较好,酶解液中低聚肽所占比例较高;复合蛋白酶C5对鹿血蛋白的酶解效果最好,酶解液中低聚肽所占比例高达69.56%;大孔吸附树脂吸附风味蛋白酶酶解液后,随着乙醇浓度的增加,洗脱液中组分洗脱率和低聚肽所占比例均降低。

响应曲面法优化鹿血多肽制备工艺

利用响应曲面法(RSM)对鹿血多肽的制备工艺进行优化。在单因素实验的基础上,选取实验因素与水平,根据中心组合(Box-Behnken)实验设计原理采用3因素3水平的响应曲面法对各个因素的显著性和交互作用进行分析。结果表明:鹿血多肽制备的最佳工艺条件为酶解时间3 h,蛋白酶B的用量4%,酶解温度60℃,在此条件下,理论上酶解液中低聚肽所占比例为96.12%,提取率达100%。

鹿血低聚肽的氨基酸成分分析

利用GB/T 5009.124—2003方法测定鹿血低聚肽的氨基酸组成,通过AAS和CS评价了鹿血低聚肽营养价值,并对其氨基酸组成与抗氧化活性的关系进行初步分析。结果显示,鹿血低聚肽总氨基酸含量达到74.49%,其中必需氨基酸含量为36.87%,EAA/TAA值为49.5%,EAA/NEAA值为98%;AAS和CS均较高,第一限制性氨基酸为色氨酸,除色氨酸外其他必需氨基酸含量都高于WHO/FAO推荐值,均能满足人体需要。鹿血低聚肽中与抗氧化活性相关的氨基酸占总量的30.8%,与鹿血低聚肽的抗氧化活性一致。