单抗介导的银加强金标免疫技术检测传染性支气管炎病毒

利用胶体金标记纯化的羊抗鼠IgG，建立了一种银加强金标免疫技术（SECGA）检测IB抗原。检测抗原时先将抗原点样于硝酸纤维素膜（NCM）中央，封闭后浸于l：40IBV单抗中作用10min，洗涤后再浸于1：4金标羊抗鼠IgG液中作用1h，银染10min后观察，在膜上出现灰黑斑点的为阳性结果，反之，不出现斑点为阴性结果。SECGA对IB抗原最低检测量为0．703ng／点（2μL），对含毒尿囊液的最低检测量为10^2.9EID50，检测IBV M41在鸡胚中繁殖时以36-54h含毒量最高；检测SPF鸡气管粘液，至少于感染后3d内检出病毒。结果表明，SECGA检测抗原可用于IBV早期诊断，具有群特异性、快速、敏感、简便，不需特殊设备、结果易判定等优点，尤适于基层实验室或现场应用。

禽流感病毒核蛋白在噬菌体表面的展示

利用PCR技术,扩增禽流感病毒(AIV)核蛋白基因片段,将其克隆至pR质粒的T4噬菌体SOC基因C末端获得重组质粒pR-np,以此重组载体转化大肠杆菌Escherichia coli2(E2),用溶菌酶缺陷噬菌体T4-z1感染重组E2菌,重组载体与缺陷噬菌体T4-z1基因发生同源重组,将np基因整合到噬菌体基因组中,用PCR方法筛选重组噬菌体并命名为T4-z1-np。经Western blot免疫电镜与ELISA检测证实,T4-z1-np表达的NP融合蛋白具有免疫学活性。结果表明,AIV核蛋白成功地在T4噬菌体表面展示,为禽流感防治奠定了基础。