酶催液中3'-唾液酸乳糖分离提纯方法研究

3’-唾液酸乳糖(3’-SL)是一种功能性母乳寡糖,在新生儿的免疫防御、炎症保护、肠道微生态构建中发挥重要作用。近年来,研究者通过构建特定酶系,实现3’-唾液酸乳糖的高产量酶催合成。以酶催反应液为原料,利用膜联用技术和脱色脱盐技术,对酶催液中的3’-唾液酸乳糖进行分离纯化,优化条件及结果如下:90℃热处理后过30nm膜超滤,压力250 kPa,滤洗2次;调定p H10.0后过3 000 Da膜超滤,压力600 kPa,滤洗5次;两步超滤下,蛋白截留率98.7%,目标物回收率87.4%。pH调至中性后过1 000 Da膜纳滤,压力1.9 MPa,滤洗7次,乳糖去除率达到90.7%。活性炭(ZX-305型)添加量1.2%,处理温度55℃,脱色率达到86.3%。离子交换树脂(001×7型和D315型)洗脱速率0.5 BV·h-1,料液3’-唾液酸乳糖浓度10 g·L^(-1),脱盐率达到94.1%,浓缩干燥后样品粉末纯度达到95%~97%(以干物质计)。样品通过液质联用仪、傅里叶红外光谱仪进行结构鉴定,确认为3’-唾液酸乳糖。