负载雷公藤甲素的TPGS-b-(PCL-ran-PGA)纳米制剂体外抑制宫颈癌细胞生长的研究

雷公藤甲素(triptolide,TPL)是传统中药雷公藤的主要活性成分,具有抗炎、抗肿瘤活性,但其毒副作用限制了临床上的广泛使用。为了探讨以TPGS-b-(PCL-ran-PGA)为载体制备的TPGS-b-(PCL-ran-PGA)/TPL纳米粒的表征和体外对宫颈癌细胞的抑制作用,采用乳化/溶剂挥发法,优化TPGS-b-(PCL-ran-PGA)与TPL比例,制备TPGS-b-(PCL-ran-PGA)/TPL纳米粒,对纳米粒进行表征,包括粒径大小、ζ电位、包封率、累积释放率,用MTS法体外研究游离型TPL和TPGS-b-(PCL-ran-PGA)/TPL纳米粒对宫颈癌细胞半数抑制浓度(IC_(50)),用克隆形成实验分析TPGS-b-(PCL-ran-PGA)/TPL纳米粒对宫颈癌细胞HeLa的抑制作用,用流式细胞仪分析纳米粒对HeLa细胞凋亡的影响。结果显示:当TPGS-b-(PCL-ran-PGA)与TPL为50∶1时制备的纳米粒粒径为(95.3±5.2)nm,zeta电位为(-12.2±0.9)mV,其累积释放曲线呈双相分布,TPGS-b-(PCL-ran-PGA)纳米粒对HeLa细胞在24、48和72 h的IC 50(2.8、1.8、0.9μg·L^(-1))远远低于游离型TPL(P<0.01),克隆形成实验证明纳米粒能显著抑制肿瘤细胞生长,并能显著诱导HeLa细胞凋亡。研究结果表明,TPGS-b-(PCL-ran-PGA)/TPL纳米粒能抑制宫颈癌细胞HeLa的生长,其作用主要通过TPL和TPGS共同诱导细胞凋亡,可以作为抗宫颈癌等肿瘤的候选药物。

丙型肝炎病毒非结构蛋白4B通过上调KDM5C表达提升其致瘤性

目的研究丙型肝炎病毒非结构蛋白4B(HCV-NS4B)对组蛋白甲基化修饰的影响,以及在NS4B致瘤中的作用。方法表达HCV-NS4B质粒转染HepG2细胞,用Western blotting分析检测组蛋白甲基化和乙酰化的水平,以及赖氨酸去甲基化酶(KDM)5A、5B和5C的表达,用siRNA特异抑制KDM5C的表达对NS4B诱导的细胞增殖和克隆形成的影响。结果HCV-NS4B能诱导H3K4me3减少,H3K36me3增加,对H3K79me3影响不大,对H3K14ac、H3K18ac和H4K8ac无影响。NS4B能引起KDM5C的表达增加,对KDM5A和KDM5B无影响。敲减KDM5C能显著减少NS4B诱导的HepG2细胞增殖和克隆形成。结论HCV-NS4B可能通过增加KDM5C的表达,减少H3K4me3而影响其致瘤性,表明KDM5C可能是HCV新治疗靶标。