病理诊断中快速冷冻切片的应用分析

冷冻切片技术是由Pieterde Riemer首创,手术中的新鲜标本应在最短时间内冷冻,组织变硬后进行切片处理。目前冷冻切片技术在临床中运用广泛,尤其是对于肿瘤患者,病理诊断结果直接影响治疗方案[1-2]。为了做出全面完整的术中快速病理诊断,本实验以200例患者为分析对象,探讨病理诊断中快速冷冻切片的临床应用价值,现报道如下。

原发性乳腺弥漫性大B细胞淋巴瘤的临床特点、MRI表现、治疗方式与预后关系分析

目的探讨原发性乳腺弥漫性大B细胞淋巴瘤(primary breast diffuse large B-celllymphoma,PBDLBCL)的临床特点、MRI特征、治疗方式与预后的关系。方法回顾性分析我院35例PBDLBCL病例,包括基本资料、临床表现、MRI表现、治疗方式及预后。结果35例患者均为女性;Ann Arbor分期,ⅠE期13例,ⅡE期13例,Ⅳ期9例;国际预后指数:IPI 0~1分24例,2分5例,3~4分6例;实验室检查:LDH<240U/L16例,LDH(240~500U/L)13例,LDH>500U/L 6例。单因素分析检验显示临床分期、LDH水平、IPI评分、病灶长径、是否行外科切除的3年、5年生存率差异有统计学意义,年龄、信号是否均匀、ADC值、增强曲线类型、是否有血管穿行征象、是否有扩张导管征象、是否接受放疗对预后影响的差异无统计学差异。多因素分析显示IPI危险分级增加为PBDLBCL独立的不良预后因素之一。结论PBDLBC的预后与病灶大小、分期,LDH水平相关,预后需多因素综合评价,IPI危险分级增加是PBDLBCL独立的不良预后因素。

血浆表皮生长因子受体基因突变检测质控品的制备及性能评价

目的制备模拟临床血浆样本的表皮生长因子受体(EGFR)基因突变检测质控品,对其进行性能评估,作为日常检测中质量控制的保证。方法收集多份病理标本中EGFR基因19del、L858R、T790M主要位点突变的阳性标本,提取DNA后,用正常献血者的报废血浆调整DNA浓度,用PCR验证各突变位点的循环阈值(Ct),再混匀分装成每管0.5 mL,灭活,保存于-80℃。自制EGFR突变质控品复融后常规测定,抽取10支重复测定2次,进行均一性检测;连续1年每2个月各抽取1支重复检测,进行稳定性评估;并将自制质控品测定10次进行准确性评价。结果自制EGFR基因突变质控品有较好的均一性(P值>0.05);自制19del、L858R和T790M突变质控品保存第1、2、4、6、8、10、12个月检测的Ct值结果的变异系数分别为1.3%、1.8%和1.3%,均小于5%,检测结果的稳定性较好;自制质控品测定10次的阳性符合率为100%。结论制备的低浓度EGFR突变质控品能满足临床EGFR突变检测室内质控要求,可以作为日常EGFR突变检测质量控制的有效手段。

254例非小细胞肺癌患者细胞学样本ALK检测结果分析

目的探讨检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者细胞学样本间变性淋巴瘤激酶(ALK)水平的临床意义。方法回顾性分析2016年1月至2020年12月在中国科学院大学附属肿瘤医院行ALK检测的NSCLC患者254例,将胸水样本和细针穿刺(FNA)样本分别制成细胞学涂片,后将每例剩余样本制作成细胞蜡块石蜡切片;将小活检组织样本常规制作石蜡切片。细胞学涂片予巴氏染色,石蜡切片予常规HE染色,确诊为NSCLC后行免疫组化染色,评价细胞学样本与组织学样本之间检测结果的一致性。结果254例样本均完成ALK免疫组化染色检测,其中ALK阳性19例,阳性检出率为7.48%。胸水样本ALK阳性检出率为2.78%(4/144),FNA样本ALK阳性检出率为13.64%(15/110)。43例同时有细胞学样本和组织学样本的患者中,有5例两种样本中免疫组化染色ALK均为阳性。2例细胞蜡块免疫组化染色ALK阳性患者同时行FISH检测,结果显示ALK基因重排阳性。接受ALK-酪氨酸激酶抑制剂治疗2个月以上的6例ALK阳性患者中,达到部分缓解4例,完全缓解2例。结论利用细胞学样本进行ALK检测具有可靠性,可为ALK基因检测提供重要平台。

肺腺癌ALK Ventana-D5F3免疫组织化学检测结果判读一致性质控研究

目的 了解中国肺腺癌间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK) Ventana-D5F3免疫组织化学(IHC)检测在不同医院间病理医师判读结果的一致性,发现并解决真实世界中ALK IHC结果判读存在的问题,以期有效地指导ALK靶向药获益人群的准确筛选.方法 采用多中心回顾性研究,收集中国非小细胞肺癌ALK检测模式真实世界多中心研究组成员共31个中心于2018年1月至6月期间诊断为肺腺癌且行ALK Ventana-D5F3自动化IHC检测的病例共109例.采用Ventana iSCANcoreo数字病理切片扫描仪扫描成数字切片(200×).ALK IHC染色结果由各中心的高年资病理医师进行阅片,判读标准按产品说明书二元判读法(阳性、阴性)进行判读,并进行统计分析.判读不一致率最高的病例进行荧光原位杂交(FISH)、即时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)、二代测序(NGS)检测.结果 所有IHC切片经专家组复阅确认,共有49例阳性病例和60例阴性病例,其中2例(编号2302和2701)原单位诊断为阳性但专家组确认为阴性的病例经FISH、RT-PCR、 NGS证实结果为阴性.对于此2例,医师的误判率(假阳性)分别为58.1%(18/31)和48.4%(15/31).仅有6位病理医师(6/31,19.4%)诊断准确率达100%.两两医师之间判读的一致性最低为75.8%.49例阳性病例中至少有1位医师判读为阴性者(假阴性)占26.5%(13/49),60例阴性病例中至少有1位医师判读为阳性者(假阳性)占41.7%(25/60),至少有1位专家判读为不确定者占31.2%(34/109).结论 真实世界中病理医师对ALK Vantana-D5F3 IHC检测结果的判读存在一定差异和误判,需要根据真实世界数据形成专家共识提供参考和指导.

宫颈活检P16和Ki-67表达对高危人乳头瘤病毒感染患者发生早期宫颈癌的预测价值

目的探讨宫颈活检病灶组织中P16和Ki-67蛋白在高危人乳头瘤病毒(HPV)感染同时液基薄层细胞学(TCT)检测异常的患者中阳性表达情况,以及预测早期宫颈癌发生的应用价值。方法回顾性总结2016年1月至2017年7月于临海市中医院行HPV-DNA检测和TCT检查患者,选择高危HPV(16和18亚型阳性)和TCT异常患者共120例,经阴道镜宫颈活检病灶组织进行病理诊断,同时进行P16和Ki-67蛋白免疫组化染色。结果120例患者中HPV-16阳性66例,18阳性34例,16和18均阳性20例;TCT报告未明确诊断意义的非典型鳞状上皮细胞(ASC)6例,低级别鳞状上皮内病变(LSIL)46例,高级别SIL(HSIL)60例,宫颈鳞状细胞癌(SCC)8例;病理诊断炎症5例,上皮内瘤样病变(CIN)105例,SCC 10例。P16和Ki-67蛋白阳性表达率在炎症、CIN和SCC患者中逐渐升高[0.0%(0/5)、36.2%(38/105)、70.0%(7/10),χ^2=4.382,P=0.036;0.0%(0/5)、40.0%(42/105)、80.0%(8/10),χ^2=5.945,P=0.015]。对CIN患者共随访21~36个月,中位时间29.5个月,共26例进展至SCC,进展至SCC患者随访截止时P16和Ki-67蛋白阳性表达率显著高于未进展患者[61.5%(16/26)比39.2%(31/79),χ^2=3.934,P=0.047;69.2%(18/26)比41.8%(33/79),χ^2=5.905,P=0.015]。结论宫颈活检组织中P16和Ki-67蛋白在高危HPV感染同时TCT异常患者中具有差异性表达,病理诊断SCC中P16和Ki-67蛋白阳性表达率显著高于CIN患者,并且随访进展至SCC的CIN患者P16和Ki-67蛋白阳性表达率也明显高于未进展者,提示P16和Ki-67蛋白对预测早期宫颈癌发生具有重要价值。