微透析高效液相色谱法研究金属酶与小分子的相互作用

将微透析(microdialysis)高效液相色谱法(highperformanceliquidchromatography,HPLC)联用技术应用于定量研究超氧化物歧化酶(superoxidedismutase)与组氨酸和组氨酸 -金属离子配合物的相互作用.实验结果表明:Cu2 Zn2 SOD酶不仅与组氨酸,而且还可以与组氨酸 Co(Ⅱ)和组氨酸 Ni(Ⅱ)相互作用,Cu2 Zn2 SOD酶中的部分Cu(Ⅱ)和Zn(Ⅱ)被诱导和置换出来,并相应地影响了酶的活性;组氨酸 -金属离子配合物的作用比组氨酸强,酶活性降低也更明显;酶中结合的外来金属离子的量比从酶上被诱导和顶替下来的金属离子的量要少。

表面活性剂在胶束电动力学色谱中的应用

系统地综述了表面活性剂在MEKC中的应用 ,阐述了不同种类表面活性剂和混合表面活性剂胶束体系的特征和应用范围 ,也对表面活性剂浓度的优化策略作了初步探讨。引用文献 5 6篇。

色谱法辅助傅里叶变换红外光谱法用于固定源大气醛酮毒物现场监测

1 引言 1990年美国公布的新空气清洁法中列出了9种重点控制的醛酮污染物:由于FTIR光谱法具有快速、方便等特点,很适合于现场分析,所以美国国家环保局希望FTIR光谱法能成为固定污染源大气毒物现场监测方法。我们曾建立了FTIR光谱自动差减定量软件及醛酮的FTIR标准谱图库,并探讨了将其用于定量的可行性问题。本文将其用于北京第三有机化工厂乙醛车间工艺尾气的现场监测。该厂废气经吸收塔后直接放空。2

气相色谱辅助傅里叶红外光谱用于固定污染源大气醛酮毒物的监测

获得了９种大气中常见的醛、酮及甲醇毒物的ＦＴＩＲ系列标准光谱图，建立了用衍生化气相色谱法和非衍生化气相色谱法辅助获得ＦＴＩＲ标准谱图的技术，详细讨论了用人工干预ＦＴＩＲ光谱自动差减法定量分析上述常见醛、酮污染物的可行性问题。

高效液相色谱用于生物催化法生产对苯二甲酸过程中菌种的筛选

在生物催化法生产对苯二甲酸（PTA）菌种的筛选过程中，建立了高效液相色谱法测定某些假单胞菌的发酵液中对苯二甲酸及中间产物对羧基苯甲醛（4-CBA）、对甲基苯甲酸（p-TOL）的分析方法。优化了色谱条件，在6min之内完全分离PTA及与其结构类似的4-CBA、p-TOL。本法测定PTA的线性范围为0．2～200μg／mL，线性相关系数为0．9998，相对标准偏差为1．52％。

高效液相色谱法测定生物催化法生产中的己二酸

己二酸是一种重要有机化合物,具有强极性和离子性的特点,由于在210 nm以上有弱的紫外吸收,故用气相色谱(GC)或高效液相色谱(HPLC)直接分离测定均有一定困难。为此,本文从研究乙酸缓冲溶液中己二酸-铜络合物的紫外吸收光谱出发,建立了高效液相色谱紫外检测己二酸的方法。通过实验确定了最优色谱条件。本法测定己二酸的线性相关系数为0.998,回收率为97.5%,检出限为0.32 mg/mL。此方法可用于监测生物催化法生产的己二酸,优化生产条件。

新型纳升级毛细管刻蚀电喷雾质谱接口研究

对普通石英毛细管表面使用氢氟酸刻蚀技术进行刻蚀，并与商品化鞘流液毛细管电泳．质谱接口（Sheathtlow CE-MS interface）结合，将其改装成一种新型的纳升级电喷雾质谱接口：玻璃膜接口部分呈多孔结构，壁厚约10μm．以细胞色素c对新型接口加以评价，样品的流量最低可达到20nL／min；在50—500nL／min流量范围内刻蚀接口具有较高的响应信号．考察了接触电解质溶液对样品电离的影响；比较微升级不锈钢接口和新型接口的蛋白质检测结果发现，在流速为200nL／min时，检测灵敏度可以提高3．6倍．

对毛细管电动力学色谱中t_0和t_(mc)测定方法的考察

在同系物方法测定胶束迁移速度（ｌ／ｔｍ ｃ ） 的基础上提出了一种同时求算电渗流速率（ｌ／ｔ０） 的ｔ０ 和ｔｍ ｃ 的新方法， 该法在选择同系物标记物较为适当时， 可以得到更为准确的结果。同时可以减少由ｔ０ 测定而带来的误差。 实验结果表明， 采用甲醇等标记物测定电渗流速率时， 由于其在胶束中的溶解使得实测结果较真值偏大，而由此计算得到的ｔｍ ｃ 值偏低。ｔ０ 、ｔｍ ｃ 皆与缓冲液的种类和浓度有关， 这可能是由于缓冲液组成的变化不仅使得离子强度改变， 也使柱管壁和胶束表面的ξ势发生变化所致。同系物标记物的选择对ｔ０ 、ｔｍｃ 测定精度影响的讨论也为实际分析系统ｔ０ 、ｔｍｃ 的测定和分析分离条件的优化选择提供了必要的理论依据。

曲霉发酵甘油生产1,3-丙二醇的研究

从实验室常规霉菌米曲霉和黑曲霉出发,通过唯一碳源法筛选出2株可发酵甘油生产1,3-丙二醇的菌株,并建立了气相色谱检测甘油和1,3-丙二醇的方法,用于测定实际发酵液中1,3-丙二醇的含量。目前有关微生物法生产1,3-丙二醇的研究主要集中在几种条件致病菌上,采用霉菌既考虑了安全问题,又丰富了1,3-丙二醇发酵法生产的可用菌株,为进一步的产业化打下基础。

类风湿性关节炎疾病分型的血浆代谢组学研究

现代医学以及传统中医从不同的视角认识疾病,并有望在系统生物学的范畴内得到统一。本文采用基于超高效液相色谱-时间飞行质谱(UPLC-Q-TOF)的血浆代谢组学方法,运用多维数据分析来研究类风湿性关节炎(RA)的疾病分型。主成分分析(PCA)的方法能够区分对照组和RA疾病组。进一步采用正交滤噪(OSC)并结合偏最小二乘判别分析(PLS-DA)可明显区分类风湿性关节炎的不同病程(稳定期与活动期)以及中医特定证候(寒证与热证)等疾病亚型。代谢组学在阐明传统中医理论,促进中医与现代医学的交流上有着广泛的应用前景。

生物转化对二甲苯生成对苯二甲酸的初步研究

对苯二甲酸是生产聚酯的主要原料,其生产方法主要是采用化学合成法。随着生物转化与生物催化研究的深入,其高效、环保、节能等优势越来越明显。筛选能够生物转化对二甲苯生成对苯二甲酸的菌株将会为生物催化法生产对苯二甲酸打下基础。通过建立筛选模型,利用唯一碳源法从土壤中分离筛选得到微生物16,经鉴定为嗜麦芽窄食单胞菌和睾丸酮丛毛单胞菌的混合菌株,该微生物可以利用对二甲苯为底物生物转化生成对苯二甲酸。实验中对诱导剂进行了选择,表明甲苯对该反应有明显的诱导作用,最佳诱导剂加入量为200mg/L。发酵液中对苯二甲酸及中间产物采用高效液相色谱法测定。

生物转化对甲基苯甲酸合成对苯二甲酸的研究

在单加氧酶和脱氢酶系的作用下,睾丸酮丛毛单胞菌DSM6577以对甲基苯甲酸(p-TOL)为唯一碳源,生物催化生成对苯二甲酸(PTA),并对其细胞生长、底物代谢和产物生成过程进行了研究。结果表明,底物在8 h内即可完全代谢,但检测到产物的生成需要更长的时间。

微流控芯片二维电泳分离分析系统研究进展

微流控芯片分析系统(微全分析系统)近年来发展迅速,已经被应用于生物、环境样品的分离分析研究。多维分析系统能够极大地提高峰容量,适合于复杂样品体系的分离分析。在微流控芯片上进行的分离操作不仅可以有效地实现两种分离模式之间的零死体积切换,而且能够使分析速度与峰容量的矛盾得到补偿。本文对微流控芯片二维电泳分离分析系统的近期发展作综述,并展望其可能的发展前景。

二维液相色谱(SCX/RP)系统的构建及对珠蛋白水解产物的研究

以十通阀为切换接口,构建了SCX/RP常规柱二维液相色谱系统,并以珠蛋白水解产物的分析对其加以评价.样品首先由第一维阳离子交换色谱(HypersilSCX,100mm×4.6mmI.D.)在pH4.0的磷酸盐缓冲体系中分离,洗脱产物进入切换接口,样品组分被富集在捕集柱(HypersilBDSC18,15mm×4.6mmI.D.)中,进一步脱盐后被导入第二维反相色谱(HypersilBDSC18,250mm×4.6mmI.D.)分离分析.阳离子交换色谱采用逐步增加盐浓度的12步台阶等度间断方式洗脱,每次将洗脱产物捕集在捕集柱中进而由反相色谱分析,实现对第一维洗脱产物的切割转移及第二维分析.与一维色谱相比,二维液相色谱系统的分辨率、峰容量也得到提高,系统峰容量达到2280.

尿中核苷检测在胃癌诊断中的意义

背景与目的:有研究表明,尿中修饰核苷的含量在多数恶性肿瘤患者中有明显升高。本研究拟探讨检测尿中核苷在胃癌诊断中的意义。方法:应用高效液相色谱法分别检测50名正常人与48例胃癌患者尿中15种核苷的水平,48例胃癌患者中有25例同时接受了血清CEA检测。结果:50名正常人和48例胃癌患者尿中15种核苷的平均值分别依次为:Pseu22.91±4.90,34.87±21.41;U0.34±0.32,0.62±0.82;A0.58±0.16,0.96±0.75;C0.17±0.15,0.24±0.19;m5U0.03±0.07,0.07±0.06;I0.26±0.10,0.43±0.36;m1I1.34±0.34,2.44±1.39;ac4C0.75±0.24,1.08±0.72;G0.09±0.04,0.14±0.10;X1.20±0.42,1.90±1.09;m2G0.61±0.16,1.00±0.69;m6A0.04±1.13,0.07±0.08;m1A2.26±0.56,3.71±2.21;m22G1.34±0.27,2.25±1.39;m1G0.80±0.25,1.41±0.86。胃癌患者尿中除m5U外,其余14种核苷的平均值明显高于正常人(P<0.05);次黄嘌呤与肿瘤大小,淋巴结转移正相关(P<0.05);黄嘌呤核苷与肿瘤淋巴结转移正相关(P<0.05)。以其中15种核苷浓度作为数据矢量,结合主成分分析-投影判别法区分正常人和胃癌患者,63%的胃癌患者被识别,识别率大大高于CEA检测(12%)。结论:胃癌患者尿中修饰核苷水平升高,检测尿中修饰核苷对胃癌的初筛有一定的参考意义。

不同裂解条件对天冬酰胺主要裂解产物的影响

采用在线裂解气相色谱-质谱联用技术(Py/GC-MS)对不同条件下天冬酰胺的主要裂解产物进行分析,并通过裂解同位素标记样品,计算主要含氮裂解产物中的同位素比例,推测其形成途径,研究裂解条件对主要裂解产物形成的影响。结果表明:温度对天冬酰胺裂解影响较大,主要裂解产物在低温和高温下生成量变化较大。300℃时,马来酰亚胺和琥珀酰亚胺为主要的裂解产物,300～600℃时生成量显著增加,600～900℃时马来酰亚胺生成量缓慢增加而琥珀酰亚胺逐渐降低;随着温度升高,酸类和酰胺类物质生成量持续增加;腈类和吡咯类物质在高温下生成量明显增加。此外,温度对含氮裂解产物的形成途径也有较大影响。马来酰亚胺、乙酰胺在低温下N主要来源于标记的酰胺N,而在高温下主要来源于未标记的氨基N。氢氰酸、乙腈和丙烯腈中的N原子均主要由未标记的氨基转变而来,且随着温度升高,这种生成途径所占比例越高。而裂解气氛和裂解时间对天冬酰胺主要裂解产物的生成量及途径影响较小。

中药巴戟天中水溶性多糖的分离及结构鉴定(英文)

中药巴戟天(Morinda officinalis)的根经过水提、醇沉、脱色和离子交换得到水溶性多糖(MOHP-1),经过FIIR、HPLC、NMR和GC-MS分析,最后确定MOHP-1是由果糖以(2→1)糖苷键连接的菊淀粉性多糖,其结构为α-Glcp-(1→2)-[β-Fruf-(2→1)-β-Frucf]n。

微透析取样技术及其在生化分析中的应用

对微透析技术及其在生化分析领域的应用作一综述。主要介绍了微透析活体取样的定量及与ＬＣ、ＨＰＣＥ、ＭＳ等分析技术在线联用技术的发展，并涉及了利用微透析技术研究药物与蛋白之间的相互作用的有关内容。

基因工程人组织激肽释放酶原的分离纯化

发展了一种基因工程人组织激肽释放酶原的分离纯化方法,首先对样品采用离子交换的分离模式进行初分离,进一步通过疏水作用色谱和体积排阻色谱进行纯化。新发展的方法样品的回收率超过50%,而且产品的纯度高,生产成本低,非常适宜于在规模化生产中应用。

羰基化蛋白质组学分析进展

蛋白质羰基化作为一种不可逆的翻译后修饰,与诸多疾病和衰老密切相关。有关蛋白质羰基化的各项研究受制于其低丰度、低电离效率及化学相对不稳定性而发展较慢。基于质谱的蛋白质组学分析技术的进步,使蛋白质羰基化的规模化研究成为可能,进而为蛋白质羰基化的相关调控通路研究提供了数据支撑。该综述介绍了蛋白质羰基化的概念、途径、检测方式,并重点介绍了蛋白组学技术应用于蛋白质羰基化分析的进展。