SARS-CoV-2 δ突变株S蛋白诱导的细胞不完全自噬与细胞融合相关

目的探讨严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)突变株刺突蛋白(Spike,S)蛋白对自噬的影响及其作用机制。方法用多种SASR-CoV-2毒株S蛋白表达载体转染293T,通过中和抗体JS016、抗HR121中和抗体以及巴佛洛霉素A1处理,观察细胞融合情况;细胞免疫荧光检测自噬流;荧光定量PCR和蛋白印迹分别检测LC3的mRNA和蛋白水平,探讨S蛋白对自噬的影响及作用机制。结果δ突变株S蛋白能引起LC3蛋白显著积累,但是其仅增加自噬体的数量,并不影响自噬溶酶体的数量;巴佛洛霉素A1处理不影响δ突变株S蛋白诱导的LC3累积;δ突变株S蛋白过表达并未使LC3的mRNA水平升高;抗HR121中和抗体处理可阻断δ突变株S蛋白诱导的细胞融合,相应的LC3蛋白量减少,而JS016中和抗体处理后细胞融合增加,同时伴随细胞内LC3蛋白量增加;HR2结构域缺陷的δ突变株S蛋白不诱导细胞融合,也不诱导LC3的累积及自噬流的改变。结论δ突变株S蛋白诱导胞内的不完全自噬导致LC3蛋白积累与细胞融合相关,提示作用于细胞自噬的药物可能抑制新型冠状病毒的感染。

胡蜂毒素导致过敏的物质基础及作用机制

膜翅目昆虫毒素富含数种致过敏物质,如抗原-5蛋白、磷脂酶A、透明质酸酶和蛋白酶等,其叮咬是引起速发型过敏反应的三大诱因之一(其他两类诱因为食物和药物),并且膜翅目昆虫叮咬引起的过敏反应在人群中的发生率还在缓慢增加.叮咬后的常见症状有局部红肿和灼痛,严重的可表现为过敏性休克、急性肾衰竭和多器官功能障碍综合征等.目前对这类过敏反应尚无很好的治疗方法,毒素过敏原特异性免疫疗法是治疗这类过敏反应的最有效手段.对这类过敏原的研究可为膜翅目昆虫叮咬引起过敏反应的诊治提供理论和物质基础.作为膜翅目昆虫的胡蜂,其个体较大、毒素量丰富,本文将结合本实验室近年来的研究工作,对胡蜂毒素过敏原的组成成分及其引发过敏反应的作用机制作一简要综述.