彝医药防治风湿类疾病经验

通过系统整理与研究彝医药有关的学术文献与名老彝医临床诊治经验,总结彝医药防治风湿类疾病的主要经验与特点。彝医药防治风湿类疾病遵循彝医特有的清浊二气学说、五行六路学说、毒邪学说等理论的指导,采用彝医望闻问摸的诊察方法,辨病与彝医算病相结合,对病患进行彝医辨证,根据彝医证型选用透骨草汤、木瓜鸡根汤、苍术木瓜汤、尪痹汤、血藤二活汤等彝药方剂,并辅以外治法和食疗。

采用诱导环化酶制备Illumina Mate-paired DNA文库

新一代测序技术(NGS)的文库制备方法在基因组的拼装中起着重要作用。但是NGS技术制备的普通DNA文库片段只有500 bp左右,难以满足复杂基因组的从头(de novo)拼装要求。三代测序技术的读长可以达到20 kb,但是其高错误率及测序成本过高使得其又不易推广。因此二代测序的Mate-paired文库制备技术一直在基因组的de novo拼装中扮演着非常重要的角色。目前主流的NGS平台Illumina制备的Mate-paired文库的片段范围只有2~5 kb,为了得到更长的可用于Illumina平台测序的Mate-paired文库,本研究首次整合并优化了Illumina和Roche/454两种测序平台的Mate-paired文库制备技术,采用诱导环化酶来提高基因组长片段DNA的环化效率,成功建立了20 kb Mate-paired文库制备技术,并已将该技术应用于人类基因组20 kb Mate-paired文库制备。该技术为Illumina平台制备长片段Mate-paired库提供了方法指导。

用于Illumina测序平台不同试剂盒制备RNA-seq文库的方法比较

RNA-seq是利用深度测序进行转录组分析的技术,并且在新一代测序的主流平台Illumina上运用广泛。针对Illumina平台的RNA-Seq建库,目前有多个不同类型的建库方法支持该技术,但是在操作步骤和成本上有很大差距。本研究分别试验了Tru Seq RNA文库制备、NEBNext RNA文库制备以及KAPA RNA文库制备3种方法,首次系统地对这3种建库方法得到的片段长度,浓度和建库流程进行了比较分析。研究显示,3种文库的片段长度都集中在300~1 000 bp之间,KAPA RNA文库制备得到的文库浓度最高,该制备方法只需要进行一次磁珠纯化,操作简便,成本低,所需要的起始量低,适用于进行大规模的建库实验。