CD317功能研究进展

CD317(Tetherin,BST-2或HM1.24)于1994年被发现并命名,是终末分化B细胞的特异性表面标志。2008年首次被鉴定为干扰素诱导型宿主抗病毒因子,此后越来越多的科学家加入到该领域的探索中。经过近十年的研究,目前已经阐述了CD317结构、抗病毒及免疫特性等问题,也陆续发现了一些诸如参与肿瘤进展、束缚外泌体释放等新功能,研究热度不减当年。因此,文章对近几年CD317功能的研究进展进行一个系统的总结,以期为病毒感染、肿瘤发病以及治疗等方面的理论进步和技术发展提供新的思路。

凝血酶-抗凝血酶复合物化学发光免疫分析检测方法的建立

凝血酶-抗凝血酶复合物(thrombin-antithrombin complex,TAT)是人体凝血和抗凝血平衡的产物,反映人体的凝血状态,其检测结果可用于血栓性疾病的辅助诊断。该研究建立了人血浆样本中TAT化学发光免疫分析检测方法,并对其性能进行评估。该研究以TAT为免疫原制备杂交瘤抗体,以双抗体夹心模式建立TAT化学发光免疫分析检测方法。经过反应优化,磁珠浓度和吖啶酯抗体浓度确定为0.20 g/L和0.2 mg/L,样本量为50μL,在37℃条件下,磁珠抗体和待测物孵育5 min,再与吖啶酯标记抗体孵育5 min。结果表明,该方法与含有凝血酶原(0.20 mg/mL)和抗凝血酶Ⅲ(0.31 mg/mL)的样本没有交叉反应,且与日本希森美康的TAT试剂的检测结果相关性较高(r>0.95)。此外,该方法的各项性能指标良好:空白限LoB≤0.20 ng/mL,检出限LoD≤0.40 ng/mL,在0.40~120 ng/mL范围内的线性相关系数为0.998,准确度在±8%的范围内,可满足临床上对血栓性疾病进行辅助诊断的需求。

神经母细胞瘤免疫治疗研究进展

神经母细胞瘤是最常见的儿童肿瘤疾病之一,对患者及其家属来了巨大的精神痛苦和经济损失,传统治疗方法对该疾病的预前及术后都效果极差,对该肿瘤的治疗一直是医学界研究的热点和难点。免疫治疗近年来在肿瘤疾病治疗中体现出来的有效、安全、毒副作用小等特点越来越引起临床科学界的重视,科学家对通过免疫疗法治愈神经母细胞瘤的研究进展迅速,并已经取得部分有效的治疗性研究结果,值得进行综述,但目前尚未有对该方面研究的综述出现。本文就近年来神经母细胞瘤治疗研究的热点——免疫逃逸的机理研究、神经母细胞瘤疫苗、免疫类药物开发等进行综述。可以预见,未来神经母细胞瘤免疫治疗的前景广阔,也将有越来越多的针对神经母细胞瘤的商品化免疫性药物、肿瘤疫苗出现,这些药物将对该疾病的治疗具有显著的疗效。

探讨一种新型Wnt替代蛋白激活脑血管Wnt信号通路对血脑屏障的保护作用

目的探讨一种新型Wnt替代蛋白(Wnt-S)对人脑血管内皮细胞中Wnt/β-catenin信号通路的作用,可能提供一种保护血脑屏障的新途径。方法用分子克隆技术构建Wnt-S in pcDNA3. 1(+)质粒,在HEK293F细胞中瞬时转染该质粒,表达纯化Wnt-S蛋白; Western blot检测含5x His-tag的Wnt-S蛋白;免疫荧光染色检测人源脑血管内皮细胞(hCMEC/D3)标记物CD31、VE-cadherin、GLUT1和MFSD2A;实时荧光定量PCR检测HEK293和hCMEC/D3细胞的Wnt蛋白受体FZD1-10和LRP5/6的表达情况,检测加药处理后HEK293和hCMEC/D3细胞中Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因AXIN2的表达情况。结果核酸电泳结果显示Wnt-S质粒构建完成; Western blot结果显示检测到了Wnt-S蛋白; HEK293中FZD1-7和LRP6高表达,hCMEC/D3中FZD2,4,6和LRP6高表达,FZD1,3低表达;实时荧光定量PCR结果显示,加Wnt-S蛋白处理后,HEK293和hCMEC/D3细胞中AXIN2基因表达水平显著上调(P <0. 001),说明Wnt-S蛋白有生物活性,并且激活了Wnt/β-catenin信号通路。结论 Wnt-S蛋白具有与天然Wnt3a蛋白类似的生物功能,能够激活人脑血管内皮细胞中的经典Wnt信号通路,以保护血脑屏障。