类风湿性关节炎动物模型研究进展

类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种自身免疫性疾病,其病理机制不确定,目前治疗方法较多,但是多有副作用。关于RA的研究,构建和应用合适的动物模型是重要的一个环节,尤其是获得与人RA发病相似的动物模型尤为重要。目前研究表明,各种类风湿性关节炎模型的发病因素不同,病理特点有别,有必要对动物模型进行总结。

胆固醇衍生物阳离子脂质体复合EGFP-IL-1Ra质粒体外转染HELA细胞系的研究

目的研究胆固醇衍生物阳离子脂质体复合EGFP-IL-1Ra质粒体外转染HELA细胞系的效率,为类风湿性关节炎治疗提供新的选择。方法制备新型胆固醇衍生物脂质体及EGFP-IL-1Ra质粒,两者结合转染HELA细胞系,通过体外凝胶阻滞试验检测阳离子脂质体与质粒DNA的最佳配比关系,MTT法检测脂质体细胞毒性,荧光免疫法检测HELA细胞的转染效率。结果实验中所用脂质体的IC50为650μg/mL,较对照组有更低的细胞毒性。脂质体/DNA质量比为50∶1作为最适比例,荧光显微镜观测脂质体结合EGFP-IL-1Ra质粒转染HELA荧光强度高于单纯EGFP-IL-1Ra质粒转染组。结论胆固醇衍生物阳离子脂质体复合EGFP-IL-1Ra质粒可高效的转染HELA细胞系,有望成为类风湿性关节炎治疗的新方法。

原代类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞及成熟细胞系生长特性的比较

目的通过对原代类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞及成熟细胞系生长特性进行比较,为类风湿关节炎(RA)研究用细胞提供多重选择。方法分离培养原代类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞,传至第三代,与成熟细胞系镜下观察细胞形态。此外,以相同细胞数接种,观察细胞增殖速度。结果形态上原代类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞与成熟细胞系有所差别,且增殖速度细胞系快于原代细胞。结论成熟细胞系可在一定程度上反映原代细胞的状态,并用于RA相关疾病研究。

力学刺激促进成骨和骨再生

肌骨系统的结构与功能、疾病的防治与康复均与力学环境和干预存在着密切的关系。伴随细胞分子生物学的发展,骨科生物力学研究从器官、组织水平深入到细胞、分子、基因水平。医用生物力学的发展促进了基于力学刺激原理的理疗设备的研发,使力学刺激促进成骨和骨再生成为目前骨科基础和应用研究的热点。《医用生物力学》杂志近年来刊登了一系列力学刺激对肉骨系统的基础和应用研究,这次选登了几项力学刺激促进成骨和骨再生,尤其在具有挑战性的骨折疏松骨折愈合促进方面的基础和应用基础成果,借此进一步加强相关领域中紧密结合临床需求的科学研究的开展。

可降解镁基骨科植入物发展、挑战与展望

人口老龄化是当前我国乃至全球面临的一大严峻挑战。人口老龄化伴随着骨质疏松、脆性骨折、骨关节炎等骨骼肌肉系统疾病发生率急剧升高,也给患者、家庭和社会带来巨大的经济负担。通过开发创新医疗产品和临床转化,更好地治疗老龄化相关的肌骨疾患,是科研机构和医疗产业界的共同愿望和努力方向。其中,建设跨学科研发团队、研发具有生物活性的可降解镁和镁基骨科内植物促进骨折修复,已成为许多国际和国内团队的重点研发方向。

两种方法分离培养类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞的比较

目的比较体外分离培养成纤维样滑膜细胞(FLS)的方法。方法滑膜组织来自关节镜清洗术的活动期类风湿关节炎患者,分别采用消化酶培养法、组织块培养法分离培养FLS。采用倒置相差显微镜以及流式细胞术对第3～4代FLS进行鉴定。结果 2种原代分离培养的方法均可成功培养出FLS。传代可使FLS达到形态学上的纯化要求,倒置相差显微镜观察均符合FLS的形态结构特征,流式细胞术检测示CD44以及CD90呈强阳性,CD55呈弱阳性。组织块法培养法FLS成功率较高,细胞游出时间较早,细胞损伤小。结论组织块培养法适合于FLS的培养,第3～4代细胞的数目、活性及纯度符合进一步实验的要求。

低剂量X线对钛颗粒干预成骨样细胞后的影响

目的观察低剂量电离辐射（LDI）对钛（Ti）颗粒干预成骨样细胞MC3T3-El后的影响。方法不同浓度Ti颗粒与MC3T3-E1细胞共同培养后，接受LDI干预，采用细胞计数试剂盒（CCK-8）、酶联免疫吸附试验法（ELISA）、碱性磷酸酶（ALP）试剂盒、实用荧光定量聚合酶链反应（Real—timePCR）及茜素红染色法检测MC3T3-El细胞的增殖、分化、矿化及炎性因子白细胞介素-6（IL-6）的表达。结果照射后24h，Ti颗粒各组细胞活性（0．78±0．03、0．61±0．04、0．63±0．07）与对照组（1．00±0．10）比较显著下降（P〈0．01），但LDI对细胞活性没有显著影响。LDI对MC3T3-El细胞的活性在照射48h和72h表现出抑制效应（P〈0．01）。照射后7d，照射各组Ⅰ型前胶原羧基端肽（PICP）的浓度[（3．97±1．00）、（3．70±2．00）、（3．78±0．39）、（2．22±1．53）ng／g]与假照射各组[（3．32±0．84）、（2．47±0．94）、（2．51±0．50）、（1．39±0．40）．g／g]比较均升高，差异有统计学意义（P〈0．05）；ALP结果显示照射后14d，各个Ti颗粒浓度组ALP活性[（0．0123±0．0002）、（0．0117±0．0006）、（0．0115±0．0006）、（0．0120±0．0002）μmol／（min·μg）]均高于似照射绢[（0．0108±0．0005）、（0．0091±0．0005）、（0．0095±0．0006）、（0．0101±0．0002）μmol／（min·μg）]，差异均有统计学意义（P〈0．05）。Real—time PCR结果显示LDI可有效降低Ti颗粒刺激后MC3T3-E1细胞IL-6的表达（0．86±0．12，P〈0．05）。茜素红染色结果显示在Ti颗粒存在的情况下LDI仍具有促进矿化的效应。结论LDI早期会加重Ti颗粒对成骨样细胞增殖的影响，但在Ti颗粒存在的情况下仍具有促进成骨样细胞分化、矿化的作用，同时可下调Ti颗粒刺激后成骨样细胞IL-6的表达。

成骨微环境中低剂量射线对成骨细胞的影响

目的 观察成骨诱导微环境中低剂量X射线对成骨细胞的影响.方法 照射后分别检测细胞增殖、碱性磷酸酶（ALP）活性、细胞矿化、成骨特异性转录因子2（Runx2）、骨钙素（0C）的mRNA和蛋白表达.结果 1.0Gy组与对照组比较增殖受到抑制（P ＜0.05）;ALP活性在0.1Gy组[（5.88 ±0.14） nmol对硝基苯磷酸二钠（pNPP）/μg蛋白]与对照组[（4.75±0.05） nmol pNPP/μg蛋白]比较升高（P＜0.05）;矿化定量0.1Gy组（6.57±0.20）与对照组（5.39±0.28）比较升高（P＜0.05）;诱导组Runx2基因0.1 Gy组（5.51±1.52）与对照组（2.43±0.3）比较升高（P＜0.05）,OC基因0.1 Gy组（2.92±1.34）与对照组（1.03±0.41）比较升高（P＜0.05）;诱导组Runx2蛋白表达0.1 Gy组（0.84±0.03）高于对照组（0.44 ±0.02,P＜ 0.05）,OC蛋白表达0.1 Gy组[（427.7±64.2）ng/L]高于对照组[（278.9±53.7） ng/L,P＜0.05].结论 成骨诱导微环境在低剂量射线促进成骨细胞的分化和矿化中起重要呈递作用.