非线性光限幅材料原理、性能表征及研究进展

激光防护材料在保护人眼和光学器件免受强激光破坏方面具有重要意义,其中基于非线性光学原理工作的固态光限幅材料有望成为未来激光防护的主体。本文介绍了光限幅材料的研究背景、工作机理、参数指标以及测试技术,综述了目前具有实用前景的多类光限幅材料的研究进展,对无机半导体材料、共轭有机高分子、无机金属团簇、碳纳米材料、二维材料等5类材料做了重点介绍,探讨这些光限幅材料的发展前景,并介绍了相关材料在固态基质中器件化的研究现状。

超高效液相色谱-质谱联用技术同时检测大鼠血浆中蒿甲醚及其主要代谢产物双氢青蒿素

为了研究蒿甲醚在大鼠体内的药代动力学行为,应用液液萃取-超高效液相色谱-单四极杆-静电场轨道阱串联质谱技术,建立了高灵敏度的大鼠血浆中蒿甲醚及其主要代谢产物双氢青蒿素的分析方法。以青蒿素为内标（Internal standard,I.S.）,在正离子Targeted-MS2检测模式下对蒿甲醚和双氢青蒿素进行定性和定量分析。检测离子对分别为m/z 316.2115/163.1117（蒿甲醚）、m/z 302.1958/163.1117（双氢青蒿素）和m/z 300.1803/209.1536（I.S.）;蒿甲醚和双氢青蒿素在2-200μg/L范围内线性关系良好（R2〉0.9990）;检出限为0.8μg/L;定量限为2.0μg/L;加标回收率分别为93.7%-103.7%和97.4%-104.7%;相对标准偏差均小于9%。本方法快速灵敏,重现性好,可用于蒿甲醚体内药代动力学研究。

硅基芯片表面化学性质对蛋白质固定化的影响

制备蛋白质芯片的关键在于将蛋白质固定到芯片表面并保持其生物学活性.本实验中,我们分别采用物理吸附、直接化学固定、加入间隔臂化学固定和生物亲和作用固定的方法将癌胚抗原(CEA)抗体固定到硅基芯片的二氧化硅表面.基于抗原-抗体的特异性相互作用,利用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)评价各种方法固定抗体的效果.实验结果表明,在修饰有氨基的表面采用戊二醛作为偶联试剂固定CEA抗体具有最高的偶联效率,引入多聚赖氨酸(poly-L-lysine)作为间隔臂可以显著增强固定效果,并可进一步降低非特异性吸附.而利用生物亲和作用固定CEA抗体也可获得较好的固定效果,但是非特异性吸附较严重.

心衰标志物可视化联合检测方法研究

基于夹心免疫原理和表面免疫吸附模型，采用Image Pro Plus软件对硅片表面磁颗粒分布图像进行定量化处理，建立了硅片表面心衰标志物可视化联合检测方法。研究表明，该方法从抗体包被到获得检测结果不超过1h，操作简单，在单张硅片上可实现心衰标志物NT_proBNP和cTnI的联合检测。NT—proBNP和cTnI的最低检出限分别为21．8pg／mL和0．034ng／mL，检测范围分别为21．8-40000pg／mL和0．034～50ng／mL。83例不同程度心血管疾病患者的血清样本的检测结果与商品化免疫分析仪检测结果一致，相关系数r〉0．98。因此，该快速免疫检测方法可以满足临床检测心衰标志物的需要。

重组金黄色葡萄球菌肠毒素B蛋白可溶性微针制备及免疫效果研究

目的建立重组金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)蛋白的可溶性微针体外检测方法及体内免疫效果评价。方法通过动态光散射(DLS)检测蛋白粒径、BCA法检测单片微针的蛋白浓度、活体成像实验检测微针皮内注射后蛋白在体内的停留时间,通过DRIZE评分评价微针注射后的皮肤情况,通过动物实验评价重组SEB蛋白可溶性微针的免疫原性及免疫保护效果。结果DLS分析显示SEB蛋白可溶性微针负载的重组SEB蛋白粒径与重组SEB蛋白溶液中的SEB蛋白粒径无明显差别,单片微针中重组SEB蛋白含量为(13.2±1.4)μg,活体成像实验显示相对于肌肉注射,重组SEB蛋白可溶性微针皮内给药后荧光蛋白在体内的停留时间延长,动物实验显示13.0μg的重组SEB蛋白可溶性微针即能引发免疫反应,并且在2LD50SEB攻毒剂量下能够产生很好保护效果。结论重组SEB蛋白可溶性微针能够刺激小鼠机体产生较好的免疫原性及免疫保护效果,为发展疫苗新型免疫途径提供了新策略。

孕二烯酮缓释避孕微针含量及其有关物质的测定方法研究

目的:建立孕二烯酮缓释避孕微针含量及其有关物质测定的高效液相色谱(HPLC)测定方法。方法:采用HPLC测定方法,色谱条件为Diamonsil C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(55:45),流速为1ml/min,检测波长239nm。结果:专属性试验结果表明,空白辅料对主药的测定无干扰,孕二烯酮和杂质、降解产物都能达到良好的分离。孕二烯酮在(0.5～20)μg/ml范围内具有良好的线性关系(r=0.9997),孕二烯酮的定量限和检测限分别为7.5ng/ml和2.5ng/ml,平均回收率为98.4%。结论:本方法具有专属性强、灵敏度高、重复性好、操作简便等优点,可用于孕二烯酮缓释避孕微针的质量评价。

应用FRAP技术评价蛋白在聚丙烯酰胺-丙烯酸凝胶中的扩散行为

药物分子从药物载体中的释放行为与载体的结构有密切关系.本实验中采用丙烯酰胺和丙烯酸等材料,运用水相沉淀的方法,制备了4种不同单体配比的聚丙烯酰胺-丙烯酸(P(Am-co-Ac))共聚物水凝胶.运用红外分析方法对P(Am-co-Ac)组成进行表征.使用荧光漂白恢复法(FRAP,fluorescence recovery after photobleaching)观察荧光素FITC标记的牛血清白蛋白(BSA)在聚丙烯酰胺-丙烯酸中的扩散行为,并以激光共聚焦显微镜进行实时成像.实验表明,FITC-BSA在不同单体配比的共聚物中的扩散系数是不同的.通过调节聚合物中单体的配比能够达到控制蛋白释放速率的作用,从而为调控蛋白和多肽类药物的缓控释放提供了可能性.

快速检测心型脂肪酸结合蛋白的荧光免疫微流体测试卡

研制出一种以时间分辨荧光微球作为标记,自驱动快速检测H-FABP的荧光免疫微流体测试卡。利用激光切割法在双面胶上简便、快速地切割出所设计的微通道结构,并采用激光切割法制作出聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA）测试卡底板及上盖。使用提拉涂膜的方法在PMMA底板表面修饰马来酸酐官能团,有效地解决了捕获抗体在PMMA表面的固定问题。使用等离子体处理测试卡上盖改善其亲水性,使液体能够在微通道内自行流动。使用此测试卡可以实现对心型脂肪酸结合蛋白（H-FABP）的快速检测,线性检测范围为0.5~100 ng/mL,检出限为0.1 ng/mL（S/N=3）,检测时间少于10 min,批内相对标准偏差（RSD）〈10%,批间RSD〈15%。本方法具有灵敏度高、检测时间短、结果准确等优点,可以满足临床检测的需求,具有良好的应用前景。

多靶标生物标志物检测的微流体磁敏生物传感器研制

将磁敏传感器与微流体测试卡集成,研制了可快速检测多靶标生物标志物的微流体免疫磁敏传感器。以3种消化系统肿瘤标志物(甲胎蛋白、癌胚抗原、糖链抗原)为模型靶标,对免疫反应各步反应的液体流速、免疫反应时间以及反应后的冲洗速度进行了优化,评价了多靶标同时检测的系统性能。在微流体磁敏生物传感器系统中,建立了血清样本中3种靶标同时检测的标准工作曲线,AFP、CEA和CA19-9的检出限分别达到0.1μg/L、0.1μg/L和30 U/mL,线性范围跨越4个数量级。微流体磁敏生物传感器可在30 min内完成多靶标生物标志物检测,临床血清样本的测试结果与ELISA法一致,具有检测时间短、灵敏度高的优点。

中国微针技术相关专利综述与分析

目的微针是一种类似注射针头的阵列式集成器件,在透皮给药领域有独特的优势,该文针对国内微针技术相关专利申请情况作了较全面的综述与分析,希望能够为微针研究人员提供参考依据。方法所有专利数据及信息皆依托国家知识产权局数据库,数据查询的截止时间为2016年5月6日。针对历年来申请量的变化、微针的技术类型及其分布、申请人类型、地域分布等情况进行总结归纳。结果国内微针相关专利最早出现在2003年,并在2013年之后开始出现大幅度增加。不同技术类型微针专利申请量的排序为:实心微针>聚合物微针>中空微针>进针器>微针应用装置>涂药微针。专利申请量排名前5名的申请人分别为上海交通大学、中国科学院理化技术研究所、清华大学、北京化工大学和陈彦彪。微针相关专利申请的地域集中在北京、上海、广东、江苏等省市。结论根据该分析结果,可以预测在未来几年中微针技术及其产业化应用将会进入快速发展期。

明胶作为左旋肉碱贴膏剂载体的体外经皮渗透性评价

探讨左旋肉碱贴膏剂与微针经皮给药系统联合使用后对其经皮渗透性的影响。以卡波姆及明胶作为贴膏剂的主要基质,选择改良的Franze扩散池,采用针高150μm的实心硅微针作用于猪耳朵皮肤进行体外经皮渗透性评价,以体外经皮渗透性及制剂外观作为评价指标,优化贴膏剂处方,并与市售的左旋肉碱外用制剂进行渗透性比较。结果表明:贴膏剂基质处方中明胶-PVP K30-卡波姆-甘油-尼泊金甲酯以4:3:0.5:3:0.1的比例为最佳用量配比。该贴膏剂经微针作用后皮肤的累积透过量高于市售制剂及卡波姆水凝胶制剂。因此,以明胶为主要基质的贴膏剂可显著提高左旋肉碱的微针经皮渗透性且具有给药准确便捷的特点。

巨磁阻微流体免疫传感器快速定量检测D-二聚体

将巨磁阻（GMR）传感器集成在微流体通道中,以100 nm磁颗粒为信号探针,研制了可快速检测血栓标志物D-二聚体的免疫传感器。用GMR传感器在线检测免疫反应后被捕捉在芯片上的磁颗粒的信息,测定血浆中D-二聚体的含量。通过对反应条件的优化,建立了GMR微流体传感器检测血浆中D-二聚体的方法。本方法的线性检测范围为5~6500 ng/m L,检出限为5 ng/m L。批内相对标准偏差〈12%;批间相对标准偏差〈14%,具有良好的稳定性和重现性。本方法可在9 min内完成检测,临床血浆样本的测试结果与日本Sysmex公司的CA1500血凝仪测试结果一致,具有灵敏度高、检测时间短、检测结果准确等优点。

氨甲环酸在治疗黄褐斑领域中的应用进展

黄褐斑是一种常发于面部的难治性皮肤疾病,以不规则的色素沉着斑为特征.目前主要治疗药物有对苯二酚、维A酸等,但其副作用较大.氨甲环酸是一种人工合成的赖氨酸衍生物,属于抗纤维蛋白溶解剂,经美国食品药品监督管理局(FDA)批准用于治疗月经过多和预防出血.另外,氨甲环酸具有治疗黄褐斑的功效,它通过对纤溶酶原激活途径的抑制作用,从而减轻色素沉着症状.本文作者在PubMed、Web of Science、CNKI、ScienceDirect等数据库进行了广泛的文献检索,对氨甲环酸在治疗黄褐斑领域的制剂学研究和临床有效性研究进行了资料归纳与分析,为临床上应用氨甲环酸治疗黄褐斑提供参考.

磁敏传感器竞争免疫法检测牛奶中的氯霉素残留量

利用直接竞争免疫原理和巨磁致电阻效应,建立了磁敏生物传感器检测氯霉素的方法。制备氯霉素半抗原芯片,依次加入待测样品、生物素化抗体、链霉亲和素磁颗粒偶联物,使之发生竞争免疫反应,再利用传感器检测芯片上结合的磁颗粒数目。通过对检测条件的优化,建立了氯霉素浓度与磁颗粒数目的标准工作曲线。本方法的检测范围为0.05～100.0μg/L;检出限为50 ng/L;用于牛奶检测,回收率为95.97%～99.36%;批内相对标准偏差为0.8%～3.9%,批间相对标准偏差为1.1%～1.7%;与ELISA方法的一致相关系数达到0.98。本方法可在30 min内快速完成定量检测,为快速多靶标磁敏竞争免疫检测体系的建立提供了可行性。

微针辅助左旋肉碱水凝胶制剂体内外经皮渗透性评价

目的：探讨微针经皮给药系统对强亲水性药物左旋肉碱经皮渗透性的影响。方法：选择改良的Franze扩散池，采用针高150μm的实心硅微针阵列作用于猪耳朵皮肤进行体外经皮实验评价。制备卡波姆水凝胶作为左旋肉碱的给药载体，并与市售的左旋肉碱外用制剂进行渗透性比较。体内试验考察了大鼠贴敷左旋肉碱凝胶贴片6h血液以及皮肤中的药物浓度变化。结果：左旋肉碱微针体外累积渗透量较被动扩散提高了30倍。浓度为0．5％的卡波姆980水凝胶作为左旋肉碱药物载体，经皮渗透性优于市售制剂。体内试验表明，左旋肉碱经微针促渗后可进入体循环，在给药的1～6h期间血液以及皮肤中药物浓度保持平稳。结论：微针经皮给药系统能够有效地促进左旋肉碱的经皮渗透性，从而实现缓控释效果。

蒿甲醚可溶解微针透皮贴片的制备和评价

目的蒿甲醚(artemether,ARM)是具有强抗疟活性的青蒿素衍生物,但其难溶于水,口服生物利用度低,有效血药浓度维持时间短。本研究的目的是开发一种能够克服现有蒿甲醚制剂缺点的可溶解微针透皮贴片。方法本文制备了ARM可溶解微针透皮贴片,评价其吸湿性、稳定性、皮肤穿透性、体内外释药性。结果以酶切寡聚透明质酸钠为基质材料制备ARM可溶解微针,抗湿性优良。压力大于30 N(0.178 N/针)时,可将微针阵列刺入猪皮。微针刺入猪皮后渗透速率在6~8 h达到最高,8 h后逐渐下降。大鼠体内药代动力学试验表明,ARM可溶解微针贴片透皮给药与肌内注射相比,生物利用度相近,但前者血药浓度更平稳。结论 ARM可溶解微针透皮贴片是一种生物利用度高,具有缓释效果的抗疟新剂型。