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高压生物科学与技术研究进展 被引量:9
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作者 李宗军 方武 徐建兴 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期1-6,共6页
压力生物科学是一个新兴学科,它由纯应用型技术研究拓展到生物化学、细胞生物学和分子生物学等基础生物学科的相关领域。压力作为重要的热力学参数,会影响蛋白质的结构与功能、细胞代谢、基因表达等生物过程,运用科学的方法和手段研究... 压力生物科学是一个新兴学科,它由纯应用型技术研究拓展到生物化学、细胞生物学和分子生物学等基础生物学科的相关领域。压力作为重要的热力学参数,会影响蛋白质的结构与功能、细胞代谢、基因表达等生物过程,运用科学的方法和手段研究压力生物效应可以更好地认识许多生命现象。 展开更多
关键词 压力 高压生物科学 蛋白质 微生物
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质谱和核磁共振成为研究生物大分子的重要方法——简介2002年诺贝尔化学奖得主的贡献 被引量:4
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作者 王金凤 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期379-382,共4页
2002年诺贝尔化学奖授予了在质谱和核磁共振领域有杰出贡献的三位科学家。John B. Fenn和Koichi Tanaka发展了质谱鉴定生物大分子质量的方法,Kurt Wüthrich建立了核磁共振测定蛋白质分子溶液三维结构的方法。他们的研究成果是质谱... 2002年诺贝尔化学奖授予了在质谱和核磁共振领域有杰出贡献的三位科学家。John B. Fenn和Koichi Tanaka发展了质谱鉴定生物大分子质量的方法,Kurt Wüthrich建立了核磁共振测定蛋白质分子溶液三维结构的方法。他们的研究成果是质谱和核磁共振方法发展的里程碑,极大地推动了这两种研究方法的进一步发展。如今,质谱和核磁共振已发展成为认识生物大分子的强劲的研究手段。 展开更多
关键词 诺贝尔奖 质谱 电喷雾电离 软激光解吸电离 核磁共振 生物大分子
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生物大分子质谱电离技术的突破及核磁共振三维结构测定方法的建立——2002年诺贝尔化学奖简介 被引量:3
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作者 黄仁槐 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第6期973-976,共4页
The progress of science is in part attributed to the development of new methodologies. The application of mass spectrometry (MS) and nuclear magnetic resonance (NMR) in the study of biological macromolecules is such a... The progress of science is in part attributed to the development of new methodologies. The application of mass spectrometry (MS) and nuclear magnetic resonance (NMR) in the study of biological macromolecules is such a representative example, which is the subject of this year’s Nobel prize award in chemistry shared by three scientists. The works include the development of soft desorption ionization methods for mass spectrometric analysis of biological macromolecules and the development of NMR for determining the three-dimensional structure of biological macromolecules in solution. These developments revolutionized the analytical methods for biomolecules such as proteins and facilitate the study of biological macromolecules so much enough to have deep effects on the whole life sciences. 展开更多
关键词 生物大分子 质谱电离技术 核磁共振 三维结构 测定方法 2002年诺贝尔化学奖 电喷雾电离 软激光解吸电离
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杜仲抗真菌蛋白晶体生长的原子力显微成像研究——快速生长与晶面生长速率 被引量:6
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作者 汪盛 向烨 +1 位作者 李根培 王大成 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第5期784-791,共8页
杜仲抗真菌蛋白(Eucommiaantifungalprotein,EAFP)的单晶体具有在几小时内就可长大的快速生长特性.用原子力显微成像(atomicforcemicroscope,AFM)技术,原位实时观测了EAFP单斜晶体生长过程中的{10 0}表面形貌动态变化,并分别在不同的... 杜仲抗真菌蛋白(Eucommiaantifungalprotein,EAFP)的单晶体具有在几小时内就可长大的快速生长特性.用原子力显微成像(atomicforcemicroscope,AFM)技术,原位实时观测了EAFP单斜晶体生长过程中的{10 0}表面形貌动态变化,并分别在不同的过饱和度下测量了其生长速率.结果表明,EAFP晶体生长的速率与蛋白质溶液的过饱和度相关,在过饱和度高时(σ =1 78)晶面生长极快;在中等过饱和度(σ =1 5)下,其晶面台阶的生长速率沿b,c方向分别为 12nm/s和 2 4 2nm/s,比溶菌酶生长速率(6~ 7nm/s)快很多;在蛋白质浓度很低的情况下,其生长速率仍与其他蛋白质相当.EAFP晶体快速生长可能与该分子尺寸较小,内部结构紧凑,分子骨架呈刚性和分子表面性质等其固有特性密切相关.沉淀剂浓度对EAFP晶体生长也有影响.过饱和度很低时,提高沉淀剂浓度会干扰晶体生长. 展开更多
关键词 杜仲抗真菌蛋白 晶体生长 原子力 显微成像 晶面生长速率
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人源化抗体研究历程及发展趋势 被引量:11
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作者 林芸 阎锡蕴 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期1-5,共5页
单克隆抗体从问世到目前广泛应用于临床 ,经历了一段曲折的发展历程。其中人源化抗体是一个重要的里程碑 ,并伴随着一系列重大的技术革新 ,如PCR技术、抗体库技术、转基因动物等。人源化抗体的形式也从最初的嵌合抗体、改型抗体等逐步... 单克隆抗体从问世到目前广泛应用于临床 ,经历了一段曲折的发展历程。其中人源化抗体是一个重要的里程碑 ,并伴随着一系列重大的技术革新 ,如PCR技术、抗体库技术、转基因动物等。人源化抗体的形式也从最初的嵌合抗体、改型抗体等逐步发展为今天的人抗体。抗体人源化已经成为治疗性抗体的发展趋势 ,同时各种抗体衍生物也不断涌现 ,它们从不同角度克服抗体本身的应用局限 ,也为治疗人类疾病提供了更多利器。对单克隆抗体进行改造使之应用于临床治疗 ,不仅需要对抗体效应机制进行更细致深入的研究 ,同时还有赖于对人类免疫系统调控机制的全面精确认识。 展开更多
关键词 抗体药物 治疗性抗体 人源化 人抗体 单克隆抗体
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突变对嗜热古菌蛋白[P62A]Ssh10b主链构象影响的核磁共振研究
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作者 罗权 方显扬 +1 位作者 邓志威 王金凤 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2008年第3期546-550,共5页
嗜热古菌蛋白Ssh10b突变体[P62A]Ssh10b具有良好的热稳定性.[P62A]Ssh10b的结构测定结果显示,其α2螺旋上残基K48和D51之间形成了一对盐键,而且,突变D51将影响蛋白的热稳定性.为了探索D51的突变对蛋白热稳定性的影响,构建了突变体[D51N/... 嗜热古菌蛋白Ssh10b突变体[P62A]Ssh10b具有良好的热稳定性.[P62A]Ssh10b的结构测定结果显示,其α2螺旋上残基K48和D51之间形成了一对盐键,而且,突变D51将影响蛋白的热稳定性.为了探索D51的突变对蛋白热稳定性的影响,构建了突变体[D51N/P62A]Ssh10b的质粒,并获得了高纯度的15N和13C双标记[D51N/P62A]Ssh10b.通过对异核三共振NMR实验数据的解析,完成了对[D51N/P62A]Ssh10b的主链共振近乎完全的指认.比较突变以及未突变蛋白质的主链1HN和15N化学位移,在[P62A]Ssh10b的结构基础上进行分析发现,D51N突变显著地影响了α2螺旋骨架构象,并进一步影响到古菌Lβ2α2loop区域、β4的N端区域、Lβ3β4loop的C端区域以及β3与Lβ3β4loop的交界区域.结果表明,由于D51N突变破坏了α2螺旋上K48和D51之间的盐键,影响了[D51N/P62A]Ssh10b的α2螺旋构象,并影响到蛋白的其它相关部位的局部构象,说明[P62A]Ssh10b的高热稳定性可能与其溶液构象密切相关.为进一步运用NMR研究[D51N/P62A]Ssh10b分子结构特性与耐热机制间的关系奠定了基础. 展开更多
关键词 D51N突变 [D51N/P62A]Ssh10b 核磁共振 主链指认 化学位移比较
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沉淀剂类型对蛋白质晶体分子堆积的影响 被引量:6
7
作者 代小虎 毕汝昌 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期394-398,共5页
以不对称单位只有一个分子的牛胰核糖核酸酶和T4溶菌酶晶体为材料,着重研究了无机盐、有机溶剂和PEG三类不同的沉淀剂对晶体分子堆积的影响。经研究发现两种蛋白质中用无机盐做沉淀剂的晶型几乎都含有面积较大的二次轴对称接触面和较少... 以不对称单位只有一个分子的牛胰核糖核酸酶和T4溶菌酶晶体为材料,着重研究了无机盐、有机溶剂和PEG三类不同的沉淀剂对晶体分子堆积的影响。经研究发现两种蛋白质中用无机盐做沉淀剂的晶型几乎都含有面积较大的二次轴对称接触面和较少的相邻分子数,同时其含有的参与接触的非极性残基集中分布于二次轴对称接触面,而盐键则在二次轴对称接触面上分布稀少。用有机溶剂作沉淀剂的晶型却含有面积较小的非二次轴对称接触面和较多的相邻分子数,而参与接触的非极性残基和盐键在各个非二次轴对称接触面上随机分布。用PEG作沉淀剂的晶型其分子堆积特征总体上类似于用有机溶剂作沉淀剂的晶型,但个别晶型具有与用无机盐做沉淀剂的晶型相似的分子堆积特征。以上结果提示,用三类沉淀剂得到的不同的分子堆积特征可能与三类沉淀剂不同的诱导结晶机理密切相关。 展开更多
关键词 牛胰核糖核酸酶 T4溶菌酶 分子堆积 二次轴对称接触 分子间接触面
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生物物理学的几个热点领域 被引量:4
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作者 黄耀江 陈润生 《物理》 CAS 北大核心 2002年第6期344-348,共5页
物理学与生物科学的交叉由来已久 ,这不仅解决了自然界许多重大的理论问题 ,并且在高层次上开辟了新的技术领域 ,如生物信息学、纳米生物学和脑与认知科学等 .
关键词 生物物理学 生物信息学 纳米生物学 认知科学 脑科学
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银杏叶提取物对星形胶质细胞诱导型一氧化氮合酶基因表达的调控 被引量:4
9
作者 张申 李树平 卫涛涛 《中国药学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第18期1424-1427,共4页
目的研究银杏叶提取物(EGh761)对星形胶质细胞合成一氧化氮(NO)的作用以及对共培养的小脑颗粒神经元的作用。方法以脂多糖(LPS)和IFN-γ诱导体外培养的大鼠星形胶质细胞表达诱导型一氧化氮合酶(iNOS),产生NO作为病理条件下胶质细胞过度... 目的研究银杏叶提取物(EGh761)对星形胶质细胞合成一氧化氮(NO)的作用以及对共培养的小脑颗粒神经元的作用。方法以脂多糖(LPS)和IFN-γ诱导体外培养的大鼠星形胶质细胞表达诱导型一氧化氮合酶(iNOS),产生NO作为病理条件下胶质细胞过度活化的实验模型,应用逆转录基因扩增技术和蛋白质印迹技术检测EGb761对星形胶质细胞中iNOS基因表达的影响,并探讨这一调控作用的分子机制。结果EGb761能明显降低星形胶质细胞中iNOS mRNA和蛋白质的表达、减少NO 的生成、防止活化的胶质细胞损伤共培养神经元,抑制IκB-α的降解和阻止p65/RelA进入细胞核,提示EGb761对iNOS基因表达的抑制作用依赖于NF-κB信号通路。结论EGb761可能对与胶质细胞过度活化有关的神经系统疾病具有治疗、预防的作用。 展开更多
关键词 银杏叶提取物 可诱导型一氧化氮合酶 一氧化氮 星形胶质细胞 小脑颗粒神经元
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抗氧化剂芦丁对星形胶质细胞iNOS基因表达的影响 被引量:1
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作者 张申 李晓阳 卫涛涛 《生命科学研究》 CAS CSCD 2004年第1期41-45,共5页
研究抗氧化剂芦丁对星形胶质细胞可诱导型一氧化氮合酶基因表达的抑制作用,并探讨其作用的机制。以脂多糖和γ-干扰素诱导星形胶质细胞表达可诱导型一氧化氮合酶,应用蛋白质印迹分析以及ESR自旋捕集技术研究了芦丁对星形胶质细胞产生内... 研究抗氧化剂芦丁对星形胶质细胞可诱导型一氧化氮合酶基因表达的抑制作用,并探讨其作用的机制。以脂多糖和γ-干扰素诱导星形胶质细胞表达可诱导型一氧化氮合酶,应用蛋白质印迹分析以及ESR自旋捕集技术研究了芦丁对星形胶质细胞产生内源性一氧化氮的作用。研究结果表明芦丁能够有效地抑制星形胶质细胞可诱导型一氧化氮合酶基因的表达、减少内源性一氧化氮的生成,而这一抑制作用是通过NF-κB信号通路实现的。芦丁对星形胶质细胞的活化具有明显的调控作用。 展开更多
关键词 抗氧化剂 芦丁 星形胶质细胞 可诱导型一氧化氮合酶 基因表达 一氧化氮 活化 调控作用
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抗氧化剂EseroS-GS对巨噬细胞iNOS基因表达的影响
11
作者 张申 卫涛涛 《实用预防医学》 CAS 2004年第2期256-259,共4页
目的 研究抗氧化剂EseroS -GS对巨噬细胞iNOS基因表达的抑制作用 ,并探讨其作用的机制。 方法 本项研究以脂多糖和γ -干扰素诱导巨噬细胞表达可诱导型一氧化氮合酶 ,应用蛋白质印迹分析以及ESR自旋捕集技术研究了EseroS -GS对巨噬... 目的 研究抗氧化剂EseroS -GS对巨噬细胞iNOS基因表达的抑制作用 ,并探讨其作用的机制。 方法 本项研究以脂多糖和γ -干扰素诱导巨噬细胞表达可诱导型一氧化氮合酶 ,应用蛋白质印迹分析以及ESR自旋捕集技术研究了EseroS -GS对巨噬细胞产生内源性一氧化氮的作用。 结果 研究结果表明EseroS -GS能够抑制巨噬细胞可诱导型一氧化氮合酶基因表达、减少内源性一氧化氮的生成 ,而这一抑制作用是通过NF -κB信号通路实现的。 结论 EseroS -GS对巨噬细胞的活化具有显著的调控作用。 展开更多
关键词 EseroS—GS 巨噬细胞 INOS 一氧化氮 NF—κB
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EGb761对星形胶质细胞iNOS基因表达的调控
12
作者 张申 李树平 卫涛涛 《怀化医专学报》 2004年第2期9-13,共5页
目的:以脂多糖(LPS)和γ-干扰素(WN-γ)诱导体外培养的大鼠脑星形胶质细胞表达可诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、产生大量一氧化氮(NO)为病理条件下胶质细胞过度活化的实验模型,研究了银杏叶提取物(EGb761)对星形胶质细胞合成一氧化氮的... 目的:以脂多糖(LPS)和γ-干扰素(WN-γ)诱导体外培养的大鼠脑星形胶质细胞表达可诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、产生大量一氧化氮(NO)为病理条件下胶质细胞过度活化的实验模型,研究了银杏叶提取物(EGb761)对星形胶质细胞合成一氧化氮的作用以及对共培养的小脑颗粒神经元的作用。方法:应用逆转录基因扩增技术和蛋白质印迹技术检测了EGb761对星形胶质细胞中iNOS基因表达的影响,并探讨了这一调控作用的分子机理。结果:EGb76l能明显降低星形胶质细胞中iNOSmRNA和蛋白的表达、减少一氧化氮的生成、防止活化的胶质细胞损伤共培养神经元,抑制IKB-α的降解和阻止p65/RdA进入细胞核,结果提示EGb761对iNOS基因表达的抑制作用依赖于NF-κB信号通路。结论:实验结果提示EGb761可能对与胶质细胞过度活化有关的神经系统痰病具有治疗、预防的作用。 展开更多
关键词 银杏叶提取物 可诱导型一氧化氮合酶 一氧化氮 星形胶质细胞 小脑颗粒神经元
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银杏叶提取物对胶质瘤细胞NF-κB表达和NO生成的调控
13
作者 张申 李晓阳 卫涛涛 《怀化医专学报》 2005年第1期11-14,F003,共5页
目的 研究银杏叶提取物(EGb761)对C6胶质瘤细胞核转录因子-κB(NF-κB)表达和可诱导型一氧化氮合酶(iNOs)、一氧化氮(NO)生成的影响。方法 以脂多糖(LPS)和佛波酯(PMA)诱导体外培养的C6胶质瘤细胞表达可诱导型一氧化氮合酶、产生大量NO... 目的 研究银杏叶提取物(EGb761)对C6胶质瘤细胞核转录因子-κB(NF-κB)表达和可诱导型一氧化氮合酶(iNOs)、一氧化氮(NO)生成的影响。方法 以脂多糖(LPS)和佛波酯(PMA)诱导体外培养的C6胶质瘤细胞表达可诱导型一氧化氮合酶、产生大量NO,应用激光共聚焦成像系统和NO荧光探针监测细胞内NO浓度变化,逆转录基因扩增技术和蛋白质印迹技术检测EGb761对C6胶质瘤细胞中iNOs基因表达的影响,并探讨这一调控作用的分子机制。结果 EGb761能明显降低C6胶质瘤细胞中iNOs mRNA和蛋白的表达、减少NO的生成,抑制IκB-α的降解和阻止p65/RelA进入细胞核。结论 结果提示EGb761可通过NF-κB信号通路对C6胶质瘤细胞iNOs基因表达和NO的生成进行调控。 展开更多
关键词 银杏叶提取物 胶质瘤细胞 可诱导型一氧化氮合酶 一氧化氮 核转录因子-ΚB
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褪黑激素对巨噬细胞呼吸爆发和iNOS基因表达的作用
14
作者 张申 卫涛涛 《怀化医专学报》 2003年第1期11-15,共5页
目的:研究褪黑激素对巨噬细胞呼吸爆发和iNOS基因表达的作用,并探讨其作用的机制。方法:本项研究以佛波酯刺激巨噬细胞产生呼吸爆发,以脂多糖/γ—干扰素诱导巨噬细胞表达可诱导型一氧化氮合酶,应用化学发光技术以及ESR自旋捕集... 目的:研究褪黑激素对巨噬细胞呼吸爆发和iNOS基因表达的作用,并探讨其作用的机制。方法:本项研究以佛波酯刺激巨噬细胞产生呼吸爆发,以脂多糖/γ—干扰素诱导巨噬细胞表达可诱导型一氧化氮合酶,应用化学发光技术以及ESR自旋捕集技术研究了褪黑激素对巨噬细胞产生内源性超氧阴离子、一氧化氮的作用。结果:研究结果表明褪黑激素能够清除巨噬细胞呼吸爆发产生的超氧阴离子自由基、抑制可诱导型一氧化氮合酶基因表达、减少内源性一氧化氮的生成,而这一抑制作用是通过NF—κB信号通路实现的。结论:褪黑激素对巨噬细胞的活化具有显著的调控作用。 展开更多
关键词 褪黑激素 巨噬细胞 呼吸爆发 诱导型一氧化氮合酶 NF-ΚB 内源性超氧阴离子
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一氧化氮诱导小脑颗粒神经元凋亡
15
作者 卫涛涛 忻文娟 《怀化医专学报》 2003年第1期1-6,共6页
应用电镜观察、ELISA、流式细胞分析等技术方法研究了一氧化氮对原代大鼠小脑颗粒神经元的细胞毒性。结果表明小脑颗粒神经元经一氧化氮供体S—亚硝基谷腕甘肽(GSNO;20μmol/L)处理后逐渐发生细胞凋亡,主要表现为DNA链断裂、染色质凝... 应用电镜观察、ELISA、流式细胞分析等技术方法研究了一氧化氮对原代大鼠小脑颗粒神经元的细胞毒性。结果表明小脑颗粒神经元经一氧化氮供体S—亚硝基谷腕甘肽(GSNO;20μmol/L)处理后逐渐发生细胞凋亡,主要表现为DNA链断裂、染色质凝缩、核破裂、形成凋亡小体。在这一过程中线粒体跨膜电位下降、细胞内ATP含量减少,同时线粒体内过氧化亚硝基合量及细胞内过氧化物合量均增加,说明一氧化氮抑制了线粒体的氧化磷酸化,并引发了氧化应激。在神经元凋亡的过程中伴随有Caspase3的活化以及p53、p21^WAF1/CIP1基因表达量的增加,说明一氧化氮引发的氧化应激可能导致了DNA氧化损伤。超氧阴离子自由基清除剂SOD可以有效抑制一氧化氮导致的氧化应激、阻断细胞凋亡,提示由过氧化物造成的氧化应激是一氧化氮具有神经毒性的重要原因。 展开更多
关键词 一氧化氮 小脑颗粒神经元 细胞凋亡 氧化应激
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银杏叶提取物对胶质瘤细胞NF-κB表达和NO生成的调控 被引量:4
16
作者 张申 李晓阳 卫涛涛 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期397-400,476,共5页
目的研究银杏叶提取物(EGb761)对C6胶质瘤细胞核转录因子-κB(NF-κB)表达和可诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、一氧化氮(NO)生成的影响。方法以脂多糖(LPS)和佛波酯(PMA)诱导体外培养的C6胶质瘤细胞表达可诱导型一氧化氮合酶、产生大量NO,... 目的研究银杏叶提取物(EGb761)对C6胶质瘤细胞核转录因子-κB(NF-κB)表达和可诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、一氧化氮(NO)生成的影响。方法以脂多糖(LPS)和佛波酯(PMA)诱导体外培养的C6胶质瘤细胞表达可诱导型一氧化氮合酶、产生大量NO,应用激光共聚焦成像系统和NO荧光探针监测细胞内NO浓度变化,逆转录基因扩增技术和蛋白质印迹技术检测EGb761对C6胶质瘤细胞中iNOS基因表达的影响,并探讨这一调控作用的分子机制。结果EGb761能明显降低C6胶质瘤细胞中iNOSmRNA和蛋白的表达、减少NO的生成,抑制IκB-α的降解和阻止p65/RelA进入细胞核。结论EGb761可通过NF-κB信号通路对C6胶质瘤细胞iNOS基因表达和NO的生成进行调控。 展开更多
关键词 银杏叶提取物 胶质瘤细胞 可诱导型一氧化氮合酶 一氧化氮 核转录因子-ΚB
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细胞色素c氧化酶薄膜中还原型双铜簇的MLCT吸收带的辨认
17
作者 王敖金 徐建兴 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第3期243-245,共3页
低浓度的连二亚硫酸钠可以诱导浸在酸性磷酸缓冲液中的固态薄膜中细胞色素c氧化酶的双铜和血红素A中心还原,但铁铜双核中心仍处在氧化态.这种变化在差光谱上表现为426 nm的负峰和408 nm左右的正峰.前者表示氧化型血红素A的减少,即Fea3+... 低浓度的连二亚硫酸钠可以诱导浸在酸性磷酸缓冲液中的固态薄膜中细胞色素c氧化酶的双铜和血红素A中心还原,但铁铜双核中心仍处在氧化态.这种变化在差光谱上表现为426 nm的负峰和408 nm左右的正峰.前者表示氧化型血红素A的减少,即Fea3+→Fea2+变化.后者来自还原型双铜簇的金属配位电荷转移(MLCT)跃迁,而非来自血红素A.这种较强的Cu(I)的SoretMLCT带的分辨将有利于克服金属蛋白中铜的吸收被铁所掩盖而产生的研究障碍. 展开更多
关键词 不原型双铜簇 MLCT 吸收带 金属配位电荷转移跃迁 还原型双铜中心 细胞色素c氧化酶薄膜 酶活性
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