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枯草杆菌蛋白酶E的蛋白质工程 被引量:3
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作者 朱榴琴 季永梅 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期13-17,共5页
用定点突变和随机突变的方法,对枯草杆菌碱性蛋白酶E基因进行改造。突变后的基因插入大肠杆菌枯草杆菌穿梭质粒pBE2中,在碱性和中性蛋白酶缺陷型的枯草杆菌DB104中进行表达,得到突变种的碱性蛋白酶,它们的突变位点分... 用定点突变和随机突变的方法,对枯草杆菌碱性蛋白酶E基因进行改造。突变后的基因插入大肠杆菌枯草杆菌穿梭质粒pBE2中,在碱性和中性蛋白酶缺陷型的枯草杆菌DB104中进行表达,得到突变种的碱性蛋白酶,它们的突变位点分别是(M222A)、(M222A、N118S)、(M222A、N118S、Q103R)、(M222A、N118S、Q103R、D60N)。各突变种酶的性质测定结果表明,M222A突变使酶抗氧化,N118S突变使酶增加热稳定性,Q103R和D60N突变虽然能增加酶的比活,但使酶的热稳定性大大下降,尤其是D60N突变使酶变得极不稳定。野生型碱性蛋白酶与(M222A)突变种的等电点均为892,而(M222A,N118S),(M222A,N118S,Q103R)和(M222A,N118S,Q103R,D60N)突变酶分别为888,910和917。用NsucAAPFpNA作为底物时酶反应最适pH值为75~95,而用酪蛋白作底物时最适pH值为10~12。 展开更多
关键词 枯草杆菌 碱性蛋白酶E 蛋白质工程
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用国产装置进行的空间蛋白质结晶实验 被引量:7
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作者 毕汝昌 《空间科学学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期208-215,共8页
使用国内研制的管式汽相扩散结晶装置,在我国返回式卫星上,成功地完成了两次空间蛋白质晶体生长实验,10种不同种类的蛋白质配制的48个样品在空间的出晶率分别达52%和80%,其中少数蛋白质生长出了较高质量的蛋白质晶体.结... 使用国内研制的管式汽相扩散结晶装置,在我国返回式卫星上,成功地完成了两次空间蛋白质晶体生长实验,10种不同种类的蛋白质配制的48个样品在空间的出晶率分别达52%和80%,其中少数蛋白质生长出了较高质量的蛋白质晶体.结果表明,空间的微重力环境利于改善蛋白质晶体的生长,而且在结晶条件优化足够好的条件下,在空间里能生长出比地面晶体尺寸较大、形态较好和内部有序性较高的蛋白质晶体.本文还就微重力对蛋白质晶体生长的具体作用及其开发利用做了讨论. 展开更多
关键词 晶体生长 蛋白质 结晶实验 微重力 航天实验
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凝血酶介导肾小球系膜细胞细胞间粘附分子1表达上调及水蛭素的阻断作用 被引量:39
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作者 陈香美 傅博 +4 位作者 叶一舟 田巍 徐启河 王建中 韩玉珉 《中华肾脏病杂志》 CSCD 北大核心 1998年第4期211-214,共4页
目的为了阐明凝血酶对肾小球系膜细胞细胞间粘附分子1(ICAM-1)表达的影响。方法利用体外培养的人肾小球系膜细胞,分别采用噻唑蓝掺入法、流式细胞术、间接免疫荧光、Northern杂交等方法分别观察了凝血酶对系膜细胞增... 目的为了阐明凝血酶对肾小球系膜细胞细胞间粘附分子1(ICAM-1)表达的影响。方法利用体外培养的人肾小球系膜细胞,分别采用噻唑蓝掺入法、流式细胞术、间接免疫荧光、Northern杂交等方法分别观察了凝血酶对系膜细胞增殖和表达ICAM-1蛋白和mRNA的影响,并同时进行了人工重组水蛭素的阻断实验。结果凝血酶可以显著促进系膜细胞增殖以及系膜细胞ICAM-1蛋白和mRNA的表达,水蛭素可以特异地阻断凝血酶的这些作用。结论凝血酶不仅是肾小球内凝血过程的关键酶,而且具有促进系膜增殖和促进系膜细胞表达ICAM-1的作用。 展开更多
关键词 凝血酶 水蛭素 系膜细胞 ICAM-1 肾小球肾炎
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有限元方法在量子化学中的应用 被引量:1
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作者 陈飞武 黎乐民 陈志达 《化学通报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第8期19-22,共4页
简述了有限元方法发展的历史,介绍了有限元方法在量子化学中的应用现状,详细讨论了有限元方法在量子化学计算中的优点、存在的困难,以及解决问题的可能途径,并指出了最新发展动向。
关键词 量子化学 有限元法 精度
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