论藏药“佐太(汞制剂)”的工艺发展历程及研究现状

佐太(汞制剂)是藏药类的珍宝,享誉“众药王”之称,具有治疗疾病、解毒、养生补养、增效等作用,以“佐太”为核心成分的珍宝类藏药复方在临床使用广泛。本文通过搜集与整理藏医药经典著作及近年来的研究文献,梳理了“佐太”炮制方法的发展历程及其现代应用研究进展。佐太炮制,主要有三个代表性的方法,分别为宇妥·元丹贡布(708-833年)所著《四部医典》中的水银炮制法、顿慢逊努嘉措(13世纪)所著《水银炮制经典》中的水银炮制法,以及新中国成立以来大力传授佐太炮制工艺的措如·才朗(1926-2004年)大师的水银炮制法。此外,研究人员从现代药物理化、药代动力学和毒理学等方面对“佐太”开展了大量研究。本文综述了藏医药经典古籍中佐太历代的炮制方法及现代药理毒理研究,为深入理解“佐太”的来龙去脉提供重要的参考价值。

中国被毛孢的化学成分和生物活性研究进展

中国被毛孢是冬虫夏草菌真正的无性型,其发酵产品已经被广泛用作保健品和药品的原料。本综述归纳总结了中国被毛孢的化学成分及生物活性研究进展,并对中国被毛孢的未来研究方向进行了展望。

冬虫夏草抗低氧疲劳作用研究

急性高原低氧环境暴露会损害机体的供氧能力和运动耐力,产生疲劳状态。随着高原旅游和高原作业人群的日益增多,如何提高高原人群的运动机能、缓解疲劳状态成为高原医学需迫切解决的问题之一。本研究模拟6000 m海拔氧浓度(空气氧含量11.35%)环境下给予冬虫夏草(300~900 mg/kg/d剂量,连续7天),以探究冬虫夏草对低氧环境下小鼠运动性疲劳的保护作用。研究结果表明,与模型组低氧疲劳小鼠相比,冬虫夏草组小鼠负重游泳力竭时间显著增加,血清尿素氮(BUN)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酐(CRE)和丙二醛(MDA)含量显著减少,血清总抗氧化能力(T-AOC)、肌糖原和肝糖原含量显著增加,肝脏组织和肌肉组织病理学变化得到明显改善。由此可见,冬虫夏草具有良好的抗低氧疲劳作用,其活性主要是通过提高肌肉强度、增强抗氧化能力、降低机体运动强度、调节能量代谢等途径来实现,特别是冬虫夏草中剂量(600 mg/kg/d)组效果最稳定。

基于网络药理学和分子对接技术探究天然冬虫夏草多糖抗抑郁作用机制

抑郁症作为一种常见的精神障碍性疾病已经严重危害人类的健康,其发生发展过程伴随着严重的免疫紊乱现象。而天然冬虫夏草多糖具有良好的免疫调节药理活性,因此,本研究采用网络药理学联合分子对接技术,对天然冬虫夏草多糖抗抑郁作用的潜在机制进行了研究。研究结果表明,天然冬虫夏草多糖可能通过调节PI3K-AKT、HIF-1和JAK-STAT等通路及EGFR、STAT3、PRKACA、TP53和IL-1β等靶点,发挥了其免疫调节功能,从而实现抗抑郁作用。

藏药炮制品“佐太”的质量标准研究

目的:建立藏药炮制品"佐太"的质量标准。方法:收集青海、西藏、四川、甘肃四省区的佐太样品,采用化学鉴别法进行佐太的汞盐鉴别;采用硫氰酸盐容量法测定佐太中硫化汞的含量。结果:硫氰酸盐容量法对藏药"佐太"中的硫化汞(HgS)含量测定,重现性好(RSD=0.68%),硫化汞(HgS)在0.0006～0.2128g线性关系良好(r=0.9999),平均回收率(n=6)为100.94%,RSD=0.66%,佐太中硫化汞(HgS)的平均含量为54.50%。结论:用硫氰酸盐容量法测定佐太中的硫化汞(HgS)含量方法简单,准确,重复性好;各地佐太样品中的硫化汞(HgS)的含量差别不大。

藏药印度獐牙菜提取物红外光谱分析及保肝活性比较研究

比较藏药材印度獐牙菜不同溶剂提取物指标成分及提取率较高的两种提取物之间的肝保护作用。采用HPLC和红外光谱分析技术分析不同溶剂提取物的指标成分变化;采用CCl4致小鼠肝损伤模型进行水提物和75%乙醇提取物保肝活性药效学研究。印度獐牙菜不同溶剂提取物的红外光谱图中能很好的对应獐牙菜苦苷1280 cm-1处,芒果苷1496和1464 cm-1处的特征峰。不同溶剂提取物的红外光谱之间及其所含目标成分的特征峰强度之间存在明显的差异。提取率较高的水提物和75%乙醇提取物均具有明显的保肝活性,且在0.5~2.0 g/kg的给药剂量范围内,印度獐牙菜75%乙醇提取物保肝活性呈明显的量效关系。

百日咳毒素联合卡介苗诱导CD-1小鼠抑郁症模型研究

为了构建具备良好的治疗性干预时间窗的新型抑郁症动物模型,本研究基于抑郁症发病的炎症假说,选用血脑屏障通透剂——百日咳毒素,联合低剂量免疫激活剂——卡介苗(牛结核分枝杆菌)对CD-1小鼠造模。实验发现,与单独低剂量卡介苗诱导相比,百日咳毒素联合低剂量卡介苗诱导可以增强小鼠的抑郁样行为,如行为绝望状态增加(悬尾实验中一动不动时间)、探索性行为降低(开场实验中的区域穿梭次数和抬头直立次数)、自发运动状态降低(开场实验总运动距离)等,促进小鼠中枢神经炎症和外周炎症(IL-1β、IL-6、IFN-γ等);同时,加剧脑中色氨酸-犬尿氨酸通路的激活,表现为其关键酶——吲哚胺2,3-双加氧酶1(IDO1)进一步显著升高。经口给予抗抑郁药丙咪嗪,可缓解百日咳毒素联合低剂量卡介苗诱导的小鼠抑郁样症状、炎症反应和激活的色氨酸-犬尿氨酸通路。另外,发现百日咳毒素联合低剂量卡介苗诱导的小鼠抑郁样症状可以从第7天至少持续到第28天。综上,本研究基于百日咳毒素和低剂量卡介苗构建的小鼠抑郁模型具有较好的表面效度、结构效度和预测效度,其长期持续性的抑郁表型可为抗抑郁疗法研究提供宝贵的治疗性干预时间窗。

干旱和水胁迫影响下盆栽青海冷地早熟禾中矿物元素蓄积性研究（英文）

[目的]为了解释高寒草地植物中矿物元素蓄积增加的机理。[方法]通过盆栽高寒草地植物青海冷地早熟禾,在干旱和水胁迫影响试验处理下,以及试验样品的采集与分析。[结果 ]结果表明:干旱和水胁迫影响下盆栽青海冷地早熟禾中多种矿物元素营养都具有蓄积增加的趋势,且Cu、Mn、Ni、P等元素具有显著性差异(P<0.05)。[结论]其对干旱或水胁迫等环境变化的适应与响应,也是矿物元素饥饿效应假说理论的再检验,而生物矿物元素饥饿效应是矿物元素蓄积分异行为发生的内动力之一。

关于气相色谱-外标法测定浓香型白酒中己酸乙酯含量的研究

己酸乙酯是浓香型白酒的主体香,其含量影响着浓香型白酒的品质。GB/T10345-2022《白酒分析方法》建议采用内标法进行己酸乙酯含量的测定,而气相色谱外标法具有简单、快速、准确、稳定等优点,比较适合于大批量白酒中己酸乙酯的测定。为此,本研究利用气相色谱外标法测定浓香型白酒中己酸乙酯含量,并通过外标法和内标法对己酸乙酯作出分析比较,结果表明内标法与外标法无显著性差异,而且使用外标法检测己酸乙酯可以简化操作步骤,提升检测效率,符合现代检测技术的要求,值得推广,并建议在国家标准中增加外标法测定白酒中己酸乙酯的方法。

仿生提取ICP-MS法测定冬虫夏草8种重金属含量及健康风险评价

目的:建立冬虫夏草中铅(Pb)、镉(Cd)、汞(Hg)、砷(As)、铜(Cu)、银(Ag)、锡(Sn)和锑(Sb)8种重金属的仿生提取含量测定方法,并对其健康风险进行评价。方法:采用人工胃液、人工肠液仿生提取冬虫夏草中可溶性重金属,ICP-MS法测定重金属含量,靶标危害系数(THQ)法评价健康风险。结果:8种重金属在各自质量浓度范围内线性关系良好(R2> 0.997 0),平均回收率84.05%~114.71%(RSD 2.9%~4.9%)。冬虫夏草中As、Hg、Cu、Cd、Sb、Pb、Ag总量均值依次为12.122、0.644、15.828、0.095、0.027、0.636、0.075 mg·kg-1,未检出Sn。As、Hg、Cu、Cd、Pb、Ag在人工胃液溶出率大于人工肠液,其在人工胃液中的溶出率均值为19.69%~52.62%,在人工肠液中的溶出率均值为0%~16.05%;Sb在人工肠液的溶出率25.54%大于人工胃液的溶出率14.68%。健康风险评价结果显示,As、Hg、Cu、Cd、Pb、Ag、Sb的THQ均<1,表明冬虫夏草中上述8种重金属不会对人体造成明显的健康危害。结论:建立的方法简便、准确、可靠,适用于冬虫夏草中上述8种重金属的测定和健康风险评价,仿生提取测定冬虫夏草8种重金属的含量数据及基于该数据的健康评价结果可为冬虫夏草重金属安全性深入研究提供参考。

木樨草素等抗心肌缺血/再灌注损伤及抑制脂代谢和细胞凋亡作用研究

目的探讨香青兰中木樨草素、山奈酚和木樨草苷对大鼠离体心肌缺血/再灌注损伤(MIRI)模型的保护作用及其抑制脂代谢相关酶11β-羟基类固醇脱氢酶1型(11β-HSD1)、溶血磷脂酸酰基转移酶(LPAATs)和细胞凋亡相关蛋白磷酸酯酶和张力蛋白同系物(PTEN)、蛋白酪氨酸磷酸酶2(SHIP-2)的作用,探讨中药多成分、多靶点抗MIRI的机制。方法采用Langendorff装置,以洛-林二氏溶液为灌流液,通过停灌和复灌心脏建立MIRI模型,检测心率(HR)、左室舒张末压(LVEDP)、左室发展压(LVDP)、(-dp/dt)/(+dp/dt)、冠脉流量(CF)、乳酸脱氢酶(LDH)、心肌梗死面积。ELISA法测定LPAATβ和11β-HSD1活性。分光光度法测定PTEN和SHIP-2活性。结果木樨草素、山奈酚和木樨草苷保护HR,降低LDH过量释放,升高LVEDP、LVDP和(-dp/dt)/(+dp/dt),恢复CF,降低心肌梗死面积。LPAATβ、11β-HSD1、PTEN、SHP-2等蛋白活性受木樨草素等的抑制。结论木樨草素、山奈酚和木樨草苷具有通过抗脂代谢紊乱和抗细胞凋亡分子机制保护大鼠离体心脏MIRI的作用。

野生和栽培川西獐牙菜醇提物红外光谱分析及药效比较研究

比较野生和栽培川西獐牙菜醇提物的成分及其肝保护、镇痛、抑制肠蠕动等药理作用。采用HPLC方法,红外光谱分析技术分析两种醇提物的成分;采用CCl4致小鼠肝损伤模型、小鼠扭体实验和小鼠小肠推进功能实验对其进行药效学研究。野生和栽培川西獐牙菜原药材中含獐牙菜苦苷、龙胆苦苷和芒果苷的总量分别为3.949%和4.539%,两种原药材的一维和二维红外光谱间均没有明显差异;两种醇提物的二维红外光谱之间差异较显著,但均有显著的预防肝损伤的作用,明显抑制醋酸所致的炎性疼痛和正常小鼠的肠蠕动功能,二者药效没有明显差异,且栽培品随给药剂量的增加而增强药效的趋势比野生品明显。

70味珍珠丸对CCl_4致急性肝损伤小鼠的保护作用及机制研究(英文)

目的 70味珍珠丸是珍宝类藏药,由金、银、珍珠、珊瑚、麝香、牛黄、藏红花等70余味动物、植物和矿物药组成,主要用于心血管系统疾病,其保肝作用尚未见报道,本实验研究其对四氯化碳致急性肝损伤小鼠的保护作用及机制研究。方法 (1)将小鼠随机分为5组,分别为正常对照组、模型对照组、70味珍珠丸(150、500 mg/kg,po x 7d)和齐墩果酸(25 mg/kg,ipx3 d)组。于末次给药6h后腹腔注射0.1%CCl4(10 m L/kg),建立急性肝损伤模型。于CCl4造模18 h后时取材测定小鼠血清ALT和AST活性,HE染色观察肝脏病理组织学变化,RT-PCR观察肝毒性及炎性相关因子表达水平。(2)随机取小鼠5只,单独给药70味珍珠丸(500 mg/kg,po),连续4 d,RT-PCR检测抗氧化损伤通路基因金属硫蛋白1(MT-1)、核因子相关因子2(Nrf2)、NAD(P)H:醌氧化还原酶1(Nqo1)及血红素氧合酶-1(HO-1)、抗氧化物酶GSH相关基因(Gclc,GST-mu,GST-pi)的表达水平。结果与正常对照组比较,模型组CCl4肝损伤小鼠ALT,AST的活性明显升高,与模型组比较,70味珍珠丸高剂量组(500 mg/kg)能显著降低CCl4所引起的ALT,AST的升高(P<0.05)。70味珍珠丸高剂量组及齐墩果酸组小鼠肝脏病理损伤程度明显减轻,肝细胞肿胀、变性坏死程度减轻,灶区坏死明显减少,炎性细胞浸润程度有所改善。CCl4肝损伤模型组肝毒性相关基因Gadd45和Gadd153以及炎性相关因子MIP2,IL-6表达明显升高,70味珍珠丸高剂量组及齐墩果酸组(500 mg/kg)能明显减少Gadd45、Gadd153以及炎性因子MIP2,IL-6的表达(P<0.05);单独给药组与正常组比较,抗氧化损伤通路基因金属硫蛋白1(MT-1)表达明显升高(P<0.01),核因子相关因子2(Nrf2)、NAD(P)H:醌氧化还原酶1(Nqo1)及血红素氧合酶-1(HO-1)表达明显升高(P<0.05),抗氧化物酶GSH相关基因(Gclc,GST-mu,GST-pi)表达明显升高(P<0.05)。结论 70味珍珠丸对CCl4致小鼠急性肝损伤具有一定的保护作用,其保护机制与激活MT-1、Nrf2、GSH抗氧化损伤的通路有关。

藏药佐太安全性研究及其复方当佐的临床安全观察初探

佐太是含重金属藏药的典型代表,迄今仍缺乏现代安全性评价数据。该研究通过佐太的急性毒性试验、亚急性毒性试验、单次给药汞分布试验、长期汞蓄积毒性试验及其复方当佐的临床安全性初步观察,以期获得佐太的药用安全数据。急性毒试验发现:半数致死量试验的各组KM小鼠未出现死亡和中毒现象,未做出佐太LD50;佐太的最大耐受量为80 g·kg-1。亚急性毒性试验发现:佐太在低剂量(13.34 mg·kg-1·d-1)和中剂量(53.36 mg·kg-1·d-1)时可降低Wistar大鼠血清ALT,AST,Crea水平,且在低剂量时具有显著性差异;高剂量(2 000 mg·kg-1·d-1)佐太可显著增加血清ALT,AST,Crea,MDA水平;血清BUN和GSH水平随着剂量增加而降低,呈显著性量效关系。单次给药分布试验发现:佐太单次给药24 h后,Wistar大鼠的肾脏、肝脏及肺中汞含量出现升高趋势,且在肾脏中呈显著剂量依赖性。长期蓄积毒性试验发现:KM小鼠在临床等效剂量(6.67 mg·kg-1·day-1)给药佐太4.5个月、停药1.5个月,从2.5个月时肾脏开始出现显著性汞蓄积,停药后又逐步降低,而肝、脾和脑中汞含量及血清ALT,AST,TBIL,BUN,Crea均无显著性变化;在给药4.5个月时KM小鼠肾、肝和脾组织有轻微结构性变化,停药后又恢复正常;佐太组动物体重增加与对照组之间无显著性差异。当佐临床安全观察发现:受试者在临床剂量下服药当佐1个月,血清生化、血常规和尿常规各指标均无不良变化。该研究证实了传统藏药佐太的毒性极低,其临床配伍药用安全性较好,在临床剂量下和临床服药周期内对机体无不良作用,但长期大剂量用药可能会对肾脏等产生一定的影响。

冬虫夏草中砷及其安全性评价研究进展

传统名贵中药冬虫夏草Cordyceps sinensis中砷超标及其安全性问题近年来备受关注,针对冬虫夏草中砷的研究逐渐增加并不断深入。在文献查阅的基础上,从冬虫夏草砷及砷形态的分析方法,砷的含量、分布、存在形态,安全性评价,以及野生和人工仿生繁育冬虫夏草中砷含量等方面进行归纳总结,并对冬虫夏草中砷的认知及研究进行展望,以期为冬虫夏草安全性评价的深入研究提供参考。

藏药川西獐牙菜及其不同提取物的红外光谱分析

利用红外光谱三级鉴定方法对藏药川西獐牙菜及其不同溶液提取物进行分析研究。选择川西獐牙菜中含量相对较高的药用成分龙胆苦苷作为不同溶液提取物的对照成分进行红外光谱和二阶导数光谱的分析;同时对不同浓度乙醇提取物进行二维相关光谱分析。结果显示,龙胆苦苷红外光谱中1 611和1 075cm-1处的两个主要特征峰强度的变化趋势,和川西獐牙菜不同溶剂提取物中龙胆苦苷含量变化趋势一致;提取溶剂极性相近时,提取物的红外光谱图相似;随着提取溶液极性的逐渐降低,提取物的红外谱图中2853,1 733,1 464,1 277和1 161cm-1等处吸收峰强度逐渐增强,提取物中酯类化合物含量逐渐增加,萜类化合物的提取率逐渐增加;红外光谱图极为相近的不同浓度乙醇提取物在二维红外光谱图中有很明显的差异。龙胆苦苷特征峰强度的变化趋势和不同提取物中龙胆苦苷含量变化趋势的一致性说明红外光谱分析结果能体现分析对象中所含有成分的含量变化;川西獐牙菜原药材,水提物和不同浓度乙醇提取物谱图的相似性和相似度的变化规律,说明传统用药水煎液和低浓度醇提物的科学性;红外光谱技术可成为川西獐牙菜不同提取物后期药理活性成分宏观控制,和多以复方入药的藏药研究中准确、快速、有效的分析方法。

藏药仁青常觉临床安全性评价

目的:观察藏药仁青常觉的临床安全性。方法:患者服药15d,于服药前、服药15d和停药15d分别收集血样、尿样、粪便,检测血常规、尿常规、肝肾功能,以及血尿便中铅、砷、汞的含量。结果:与服药前比较,服药15d总蛋白、白蛋白水平显著降低(P<0.05),血肌酐水平、尿液pH值显著升高(P<0.05,P<0.01),血、尿、便的汞、铅、砷含量显著升高(P<0.01);与服药15d比较,停药15d总蛋白、白蛋白、球蛋白和总胆红素水平显著升高(P<0.05),尿素氮水平、尿液pH值显著降低(P<0.05),血汞、血铅、血砷、尿砷、便汞和便砷含量显著降低(P<0.01)。结论:按藏医理论服用仁青常觉,短期内对肝脏和肾脏部分指标有一定影响,但停药后均有恢复趋势,显示仁青常觉临床用药的安全性。

同步辐射X射线荧光法分析藏药材和藏药制剂中金属元素

同步辐射X射线荧光(SR-XRF)技术具有光强高、能量范围宽、信噪比高、检测限低、无损伤分析等特点,在元素分析中具有极为显著的优势。采用SR-XRF技术,对临床治疗肝胆疾病常用的藏药材(川西獐牙菜)及藏药制剂中的金属元素进行较为准确的定量半定量分析,以期揭示藏药中这些金属元素与其药效的关系。SR-XRF分析结果发现,藏药材川西獐牙菜中含有钾(K)、钙(Ca)、钛(Ti)、钒(V)、铬(Cr)、锰(Mn)、铁(Fe)、锌(Zn)、铅(Pb)共九种金属元素(含量均处于ppb或亚ppm级别),且不同来源样品间的元素组成具有明显的差异性。另外,发现研究的藏药复方制剂含有钾(K)、钙(Ca)、钛(Ti)、钒(V)、铬(Cr)、锰(Mn)、铁(Fe)、镍(Ni)、铜(Cu)、锌(Zn)、铷(Rb)、铅(Pb)、汞(Hg)、钴(Co)、镓(Ga)15种金属元素及一种非金属元素砷(As),各元素含量均在ppb至ppm级别,不同复方制剂中的元素组成具有显著性的差异。利用SR-XRF技术对常用藏药材和藏药制剂中元素进行了,初步揭示了传统藏药中微量金属元素与其生物学效应的关系,并发现该技术可用于藏药微量金属元素的直接、快速检测。

藏药佐太在两种抑郁小鼠模型中的抗抑郁活性

目的通过行为绝望模型—悬尾实验(TST)、不可预测性慢性温和应激(CUMS)模型,探索藏药佐太(硫化汞、硫磺等煅制品的混合物)的抗抑郁作用。方法行为绝望模型—悬尾实验中,KM小鼠给予佐太14 d后,通过测定悬尾实验不动时间、开场实验(OFT)、血清中皮质酮(CORT)变化,评价佐太的抗抑郁活性。构建CUMS模型KM小鼠,给予佐太42 d,通过糖水偏好实验、开场实验和强迫游泳实验,进一步评价佐太的抗抑郁作用。通过ELISA法测定小鼠血清中5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)和海马中脑源性神经营养因子(BDNF)的水平。结果行为绝望模型—悬尾实验中,与空白组相比,佐太在剂量为60.697、303.49 mg/kg时能显著降低小鼠悬尾不动时间和血清中CORT水平。CUMS模型实验中,与CUMS模型组相比,佐太在剂量为6.069 7、60.697、606.97 mg/kg时,均可显著提高受试小鼠的糖水偏好率、开场实验中的自主活动,同时可显著降低强迫游泳实验(CFST)中的不动时间,表明佐太能缓解慢性应激引起的抑郁样行为。另外,佐太在上述3个剂量下,可显著增加CUMS模型小鼠血清中NE和海马中BDNF的水平,并在剂量为6.069 7、60.697 mg/kg下,可显著增加CUMS模型小鼠血清中5-HT的水平。结论藏药佐太在行为绝望模型和CUMS模型小鼠中表现出一定的抗抑郁活性,可能是通过降低CORT,提高5-HT、NE、BDNF的水平而发挥作用。

藏药佐太中汞在小鼠体内的蓄积

目的探索给予KM小鼠不同剂量和不同时间的佐太后,汞在体内的蓄积情况。方法 KM小鼠随机分为空白组,佐太低、中、高剂量组(42 d,6.07、60.70、606.97 mg/kg;14 d,606.97 mg/kg),给药后,测定小鼠脑(嗅球、皮层、海马、下丘脑、脑干、小脑)、心脏、肺脏、肾脏、肝脏、脾脏、血清、肌肉中汞含有量。结果与空白组相比,给予42 d低剂量佐太后,能够显著增加小鼠海马、小脑、肺脏、肾脏、肝脏、血清中汞含有量;给予42 d中剂量佐太后,能够显著增加小鼠嗅球、皮层、海马、脑干、小脑、心脏、肺脏、肾脏、肝脏、脾脏、血清中汞含有量;给予42、14 d高剂量佐太后,能够显著增加小鼠嗅球、皮层、海马、下丘脑、脑干、小脑、心脏、肺脏、肾脏、肝脏、脾脏、肌肉、血清中汞含有量。结论小鼠灌胃佐太后,汞在不同组织中产生蓄积,且表现出剂量和时间依赖性,提示佐太及其复方制剂不宜过量、长期使用。