超滤分离蛋白质过程快速优化新技术及其应用

介绍了蛋白质超滤分离快速优化新技术、新方法,包括脉冲进样技术,载体相超滤技术、参数连续变化超滤技术以及在这些技术基础上建立的超滤分离快速优化新方法,克服了常规蛋白质超滤分离过程优化中存在的实验工作量大、蛋白质消耗多、费时以及费用高等缺点。利用该方法对以溶菌酶和卵清蛋白为模型蛋白质的混合体系进行了研究,筛选出合适的超滤膜,优化了分离条件.结果表明,在本研究实验条件范围内,30 kDa Biomax膜要优于30 kDaYM膜.利用30 kDa Biomax膜对溶菌酶和卵清蛋白的超滤分离可取得较好的效果,采用载体相超滤技术经240 min后透过液中溶菌酶的纯度>90%,回收率>92%.

O-乙酰氨基葡萄糖(O-GlcNAc)修饰及其生物学功能研究进展

O-GlcNAc修饰系发生在蛋白质丝氨酸、苏氨酸羟基末端连接的乙酰氨基葡萄糖上的单糖基修饰。自1984年以来,针对O-GlcNAc糖基化修饰的研究日益升温。O-GlcNAc修饰是动态变化、可调控的,满足蛋白质翻译后修饰参与信号通路的必要条件。在多数情况下,O-GlcNAc修饰与磷酸化修饰发生在蛋白质的相同氨基酸残基上,故两种修饰之间常存在竞争性抑制,亦被称之为"阴阳"制衡。O-GlcNAc修饰参与细胞内多种信号通路的调控,调节着生长、增殖、激素响应等过程,在糖尿病、神经退行性疾病和肿瘤等代谢性疾病中扮演重要角色。探究O-GlcNAc修饰及其在生理、病理状态中的作用具有极为重要的意义。

壳寡糖抑制ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化的形成

壳寡糖具有抗氧化、抗炎、降血糖、降血脂等丰富的保健活性,但壳寡糖对动脉粥样硬化的改善作用并不明确。为深入探究壳寡糖是否可改善动脉粥样硬化,喂食ApoE^(-/-)转基因小鼠高脂饲料以构建动脉粥样硬化小鼠模型。试验分别设置3组小鼠(n=10):正常小鼠喂食普通饲料的对照组;ApoE^(-/-)转基因小鼠喂食高脂饲料的模型组;ApoE^(-/-)转基因小鼠喂食高脂饲料并给药壳寡糖的给药组。给药组给予该模型小鼠聚合度2~6的壳寡糖隔天灌胃处理,处理剂量为150 mg·kg^(-1),整个动物试验持续12周。结果表明:小鼠的脏器指数分析结果显示,壳寡糖对疾病小鼠的体重无明显影响,但可促进脾脏增重[(0.11±0.01)g]。分析小鼠的血液细胞组成发现,壳寡糖可有效提高白细胞含量[(6.9±1.3)×10~9·L^(-1)]以及白细胞中淋巴细胞比例[(73.2±15.2)%],提示壳寡糖可提高小鼠的免疫能力。小鼠的血液生化指标结果表明,壳寡糖可显著降低疾病小鼠的谷草转氨酶[(150.8±25.5)U·L^(-1)]、乳酸脱氢酶[(1119.1±252.9)U·L^(-1)]及血液中胆固醇含量[(3.1±0.5)mmol·L^(-1)],几乎达到正常小鼠水平。对肝脏组织进行的苏木素伊红染色,证明壳寡糖可有效逆转肝脏脂肪滴的累积。用特异性血管细胞黏附分子1(VCAM-1)及细胞间黏附分子1(ICAM-1)的抗体对动脉弓组织进行免疫组织化学检测,发现壳寡糖能够明显改善动脉粥样硬化条件下VCAM-1及ICAM-1的过表达。本研究制备的壳寡糖可有效逆转ApoE^(-/-)转基因小鼠的动脉粥样硬化疾病,本壳寡糖或可应用于保健品中防治老年人动脉粥样硬化。