HIV-1跨膜蛋白gp41重组抗原的表达及其免疫反应性

目的为开发和建立敏感、特异的抗HIV-1抗体的检测方法研制重组gp41抗原。方法根据HIV-1的基因序列,设计并合成了1对PCR扩增引物,应用PCR技术从HIV-1外膜基因组中扩增出HIV-1的gp41截短体,将扩增的基因片段插入质粒pET-28a中构建成重组表达质粒pET-gp41。诱导表达并纯化gp41重组抗原,对gp41进行了初步应用分析。结果gp41在大肠埃希菌BL21(DE3)中获得高表达,表达量占菌体总蛋白量的26.08%。纯化后截短体gp41的纯度为97.94%。经间接ELISA和免疫印迹检测,纯化后的表达产物gp41具有很高的抗原特异性和免疫反应性。结论研制的重组抗原gp41有较强的抗原性和潜在的应用价值。