低温保存的血小板胞内冰晶形成温度测定

血小板胞内冰晶形成 (IIF)的温度是指导血小板低温保存最重要的物理参数之一。本研究通过生物学和物理学的两种方法同时测定血小板IIF温度范围。在分步降温法中 ,每降 5℃取出血小板样本 ,测定 37℃直接复温(T37℃ )和经液氮处理后再 37℃复温 (LN)两种方法处理的血小板样本磷脂酰丝氨酸 (PS) ,血浆乳酸脱氢酶 (LDH)和血小板聚集功能的变化。同时利用差式扫描量热计 (DSC)记录加和不加 5 %DMSO的血小板在降温过程中的放热峰。结果表明 ,PS ,LDH和血小板聚集功能在 - 35℃左右不再发生变化。DSC测定结果表明 ,代表血小板IIF的第二个小放热峰在 - 35℃左右。结论 :血小板IIF温度在 - 30℃至 - 4 0℃之间 (- 35℃左右 )。

丙二醇-氯化钠-水三元溶液相图及其在血小板低温保存中的应用(英文)

为了获得血小板冰冻保护液 (丙二醇 氯化钠 水 ,PG NaCl H2 O)冰冻降温的数学模型 ,本研究使用差示扫描量热仪分别测定出不同浓度和不同比例条件下丙二醇 氯化钠 水三元溶液的凝固点 (Tf) ,然后将已有的公式和实验所得的数据通过计算机进行拟合。结果获得了一个数学模型 ,该数学模型描述的是在PG NaCl H2 O溶液中Tf变化与溶质浓度和PG NaCl(质量比 )两个参数变化之间的函数关系。结论 :把该方程与血小板的渗透性特性的参数相结合 ,可以描述在平衡冷冻状态下 ,不同PG浓度时血小板的体积变化 ,指导血小板低温保存。

冰冻血小板战时运输和储存的允许温度

为了探索战时冰冻血小板运输和储存的允许温度范围 ,取 11袋血小板 ,各袋加入终浓度为 5 %DMSO后等分为 8份 ,随机分为配对的A、B、C、D、E、F、G、H组 ,置于 - 80℃冰箱保存 1天后。取B、C、D、E、F、G、H组分别于 - 6 0℃、- 5 0℃、- 4 0℃、- 30℃、- 2 0℃、-10℃、0℃冰箱保存 4h ,然后将各组复温。测定各组血小板磷脂酰丝氨酸 (PS)阳性率、CD6 2p再表达、SPAT、aPCT变化。连续测定A组复温后 4h(PS)阳性率、CD6 2p再表达、SPAT、aPCT变化。结果显示 :①与对照组比较B、C、D、E组PS阳性率、CD6 2p再表达率、SPAT差异无显著性意义 (P >0 0 5 ) ;F、G、H组发生显著变化。各组aPCT均无显著变化。②A组复温后 4h内PS阳性率、CD6 2p再表达、SPAT、aPCT均无显著变化。结果提示 :5 %DMSO冰冻血小板保存的可行性温度为 - 4 0℃以下 ,而 - 30℃～ 0℃温度段为冰冻血小板致死温度 ;复温成为液体状态后可以在 2 2℃振荡保存 4h。

冰冻保存血小板新亚群及其膜表面分子分析

目的 :探索冰冻血小板新特性的获得与其新亚群膜表面分子变化之间的可能关系。方法 :与新鲜血小板进行比较 ,采用流式细胞术分析冰冻保存血小板膜表面功能分子变化。结果 :根据表达和再表达CD6 2p能力不同可将冰冻血小板分为三个亚群 ,新鲜血小板只有一个明显的亚群。结合磷脂酰丝氨酸 (PS)、CD6 2 p和CD4 2b分子变化可将冰冻血小板分出新的亚群 ,其显著特征包括PS阳性和CD4 2b分子密度显著降低 ;而CD6 2 p阴性亚群对钙离子的激活更为敏感。结论 :血小板通过冰冻保存后 ,产生了新亚群。

血小板对溶液渗透压变化耐受能力的测定及其意义

为了测定血小板对溶液渗透压变化的耐受能力 ,将等渗条件下新鲜血小板置于 4 7- 6 11mOsm的系列晶体盐溶液中 15分钟 ,然后恢复至等渗。测定对应渗透压溶液处理后及其恢复至等渗后血小板磷脂酰丝氨酸 (PS)阳性率和CD6 2p阳性率。结果表明 ,当渗透压低于 2 2 4 - 2 38mOsm时血小板CD6 2p和PS阳性率显著增高 ,已经有部分血小板被激活 ;当渗透压不超过 6 11mOsm时血小板仍然没有明显的激活。不同渗透压溶液中的血小板恢复至等渗状态时血小板CD6 2p和PS阳性率没有明显增加。结论 :血小板对低渗溶液敏感而能耐受较高的晶体渗透压 ;晶体溶液对血小板的渗透损伤本质可能是超出血小板安全体积限度。

冰冻血小板的运输及其在野战医院应用的可行性研究

目的 建立和测试低温冷冻血小板无电源运输保存技术。方法 采用高效发泡材料为主要隔热材料 ,以食品级干冰砖为冷源 ,低温冷冻血小板与干冰砖体积比为 2 :1,共同置于箱内保存。记录温度变化曲线和箱温分别在 -70℃ ,-4 0℃ ,-2 0℃以下的维持时间 ;60袋 -80℃冰箱保存低温冷冻血小板按上述方法保存至 -4 0℃后重新放回 -80℃冰箱保存。随机取始终保存于 -80℃冰箱冷冻血小板为对照组 ,取测试冷冻血小板其中 2 0袋为测试组 ,比较两组血小板计数、血小板平均体积 (MPV)、血小板分布宽度 (PDW )、血浆乳酸脱氢酶 (LDH)、乳酸、磷脂酰丝氨酸 (PS)阳性率和CD62p再表达率。结果 在 2 3℃～ 2 6℃环境无电条件下将低温冷冻血小板的保存温度在 -70℃以下可维持 95h ;-4 0℃以下可维持 113h ;-2 0℃以下可维持 118h。测试组和对照组血小板计数、MPV、PDW、LDH、乳酸、pH、PS阳性率和CD62p再表达率差异无显著性。结论 无电源条件下低温冷冻血小板和新鲜冰冻血浆储存运输技术 ,满足在低温冷冻血小板和新鲜冰冻血浆在野战医院的应用所需的基本条件。