白藜芦醇通过诱导自噬减少肥胖小鼠骨骼肌组织GDF8表达的研究

目的研究白藜芦醇(resveratrol,RES)通过诱导自噬减少肥胖小鼠骨骼肌组织中GDF8的表达。方法将8周龄C57BL/6雄性(♂)小鼠随机分为标准饮食组(SCD)、标准饮食+白藜芦醇组(SCD+RES)、高脂组(HFD)及高脂+白藜芦醇组(HFD+RES),白藜芦醇(400 mg·kg^-1·d^-1)胃饲,共持续20周。分析血脂指标和骨骼肌组织的形态学变化,免疫组化、RT-PCR和Western blot检测SIRT1、LC3、p62、GDF8的定位和表达。结果HFD组小鼠体质量、血脂指标TC、TG、LDL-C水平升高,HDL-C水平明显降低;骨骼肌纤维间出现脂肪沉积;SIRT1、LC3表达量明显减少,GDF8、p62的表达增加,且均定位于胞质;SIRT1、LC3的表达明显降低。与HFD小鼠相比,HFD+RES组小鼠体质量、血脂指标明显下降,HDL-C水平升高,骨骼肌中的脂质沉积明显减少,SIRT1、LC3的表达水平增高,GDF8、p62的表达水平明显降低。结论白藜芦醇有降低骨骼肌GDF8表达的效应,其机制可能与其激活SIRT1进而增加自噬、促进GDF8的降解有关。

血清AFP、GP73水平检测对非肝癌慢性HBV感染者的临床价值

目的探讨血清甲胎蛋白(AFP)、高尔基体糖蛋白-73(GP73)检测对非肝癌慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者的临床价值。方法将中国科技大学附属第一医院2017年1月至2019年6月收治的非肝癌慢性HBV感染者157例纳入研究;根据慢性HBV感染的类型分为慢性乙型肝炎(CHB)肝硬化失代偿期组40例、CHB肝硬化代偿期组44例、CHB组43例、HBV携带者组30例;另外,选取同期体检合格的健康者30例作为健康组。检测上述人群血清AFP、GP73水平并进行组间比较;采用受试者工作特征(ROC)曲线进行分析,得出AFP、GP73单项和联合检测用于诊断CHB肝硬化失代偿期的灵敏度、特异度及准确度。结果CHB肝硬化失代偿期组血清AFP水平高于健康组(P<0.05),与其他各组比较无差异无统计学意义(P>0.05);各组间GP73水平两两比较差异均有统计学意义(P<0.05),水平由低至高依次为HBV携带者组、CHB组、CHB肝硬化代偿期组、CHB肝硬化失代偿期组。AFP和GP73联合检测ROC曲线下面积最大,为0.813,特异度为96.60%,准确度为83.42%。结论血清AFP、GP73水平能为肝硬化失代偿期的诊断和HBV感染者病情判断提供参考。

多位点序列分型技术在热带念珠菌中的应用研究

目的探讨上海瑞金医院临床分离的热带念珠菌MLST (Multilocus sequence types,MLST)型别。方法连续收集上海市瑞金医院临床分离的热带念珠菌菌株,用PCR技术扩增热带念珠菌的6对管家基因,并对扩增片段进行纯化测序后与热带念珠菌MLST数据库比对得到临床菌株的二倍体序列型别DSTs (Diploid sequence types,DSTs),再利用eBURST V3软件对结果进行分析,用MEGA 6.0软件建立系统发育树,最后对部分临床菌株进行药物敏感性实验,探讨菌株耐药与基因型别之间的关系。结果临床分离的92株热带念珠菌分属于47个DSTs,其中15个DSTs是已经报道的,32个DSTs在本次研究中首次得到;DST507和DST376是本次研究中的优势型别,且属于同一个克隆簇。药敏实验显示属于优势型别的27株临床菌株中21株为唑类药物耐药菌株。结论 MLST技术是一种高效的基因分型技术;DST507和DST376是上海瑞金医院热带念珠菌的优势型别;唑类药物耐药菌株表现为DST507和DST376的聚集分布。

少见尖端赛多孢子菌致脑组织感染1例及系列研究

目的报道尖端赛多孢子菌脑脓肿感染1例,并探讨真菌的鉴定及其对抗真菌药物体外药敏试验。方法取患者颅内引流物标本进行真菌培养和形态学鉴定,对分离菌做基因测序和抗真菌药物体外药敏试验。结果根据菌株的形态学特点和基因测序结果鉴定为尖端赛多孢子菌,药敏试验显示对两性青霉素B、氟康唑耐药,对伏立康唑敏感。结论尖端赛多孢子菌导致的真菌感染较少见,其鉴定主要依靠形态学特征和基因分析。伏立康唑对该菌株有较好的治疗作用。

血小板对人肺癌细胞株A549凋亡的影响及机制初探

目的探讨血小板(PLT)对肺癌细胞株A549的影响及其可能的机制。方法通过流式细胞术检测PLT对A549细胞的凋亡作用;Westernblot检测PLT和A549细胞共培养后A549细胞中ERK1/2、JNK、p-ERK、p-JNK、MMP–2、M M P–9、 B c l–2、 B a x蛋白的表达情况。结果应用流式细胞术的检测结果发现,血小板抑制A 549细胞的凋亡并能阻止化疗药物吉西他滨诱导的A549细胞凋亡。Westernblot结果显示PLT和A549细胞共培养48h后,A549细胞中ERK1/2、JNK、p-E R K、 p-J N K、 M M P-2、 M M P-9、 B c l-2蛋白表达明显增加, B a x蛋白表达明显降低。结论血小板可增加A 549细胞中ERK1/2、JNK、p-ERK、p-JNK磷酸化,增加MMP-2、MMP-9和Bcl-2蛋白的表达;降低Bax蛋白表达,并抑制肺癌细胞株A549的凋亡。血小板可抑制A549细胞的凋亡,且与血小板的浓度呈正相关。

金黄色葡萄球菌PV杀白细胞素S组分体外诱导单核白血病细胞株THP-1巨噬细胞的研究

目的目前关于金黄色葡萄球菌PV杀白细胞素S组分(LukS-PV)体外诱导人源单核白血病细胞株THP-1巨噬细胞研究较少。文中主要探讨LukS-PV能否体外诱导人源THP-1巨噬细胞极化。方法佛波酯体外诱导THP-1为THP-1巨噬细胞,THP-1经佛波酯刺激48 h、72 h后,流式检测细胞表面标志物CD11b、CD14。采用0.1、0.2、0.4μmol/L的LukS-PV作用THP-1巨噬细胞,分别为0.1μmol/LLukS-PV组、0.2μmol/LLukS-PV组和0.4μmol/LLukS-PV组,另采用佛波酯诱导THP-1巨噬细胞为对照组。流式细胞术检测各组24 h、48 h CD80、CD206的表达,qRT-PCR检测细胞IL-12、TNF-α、TGF-β的mRNA表达水平。结果0.1μmol/LLukS-PV组、0.2μmol/LLukS-PV组、0.4μmol/LLukS-PV组细胞表面CD80表达量较对照组明显增高(P<0.01),0.2μmol/L LukS-PV组表达量最高(P<0.01)。0.2μmol/L LukS-PV组24h IL-12、TNF-αmRNA表达水平(7.32±0.91、5.29±0.51)较对照组(0.71±0.11、0.73±0.14)明显升高(P<0.01),48 h时IL-12、TNF-αmRNA表达水平(11.16±0.78、6.70±0.68)较对照组亦明显升高(P<0.01)。0.2μmol/L LukS-PV组24h、48h细胞表面CD80的表达较对照组明显升高(P<0.000)。结论LukS-PV能够刺激人源THP-1巨噬细胞向M1极化。

血清AFP-L3%和GP73检测在AFP低浓度肝癌诊断和鉴别诊断中的应用评价

目的探讨血清甲胎蛋白异质体比率(AFP-L3%)和高尔基体蛋白73(GP73)单独和联合检测在甲胎蛋白(AFP)低浓度肝癌诊断和鉴别诊断中的应用价值。方法选取中国科技大学附属第一医院2017年1月至2020年1月AFP低浓度肝癌患者42例、乙型肝炎肝硬化失代偿期患者40例、乙型肝炎肝硬化代偿患者44例、慢性乙型肝炎患者43例、乙肝病毒携带者30例及健康体检者30例血清标本,检测AFP、AFP-L3%和GP73含量,并计算AFP-L3%在AFP中的比率。比较AFP、AFP-L3%和GP73的表达水平和阳性率,通过受试者工作特征曲线(ROC)进行分析,并比较3个指标单项和联合检测的灵敏度、特异度及准确度。结果AFP低浓度肝癌组血清AFP水平与健康组比较差异有统计学意义(P<0.01),与其他各组比较差异无统计学意义(P>0.01);AFP低浓度肝癌组血清GP73水平与乙型肝炎肝硬化代偿组、慢性乙型肝炎组、乙肝病毒携带者组和健康组水平比较差异均有统计学意义(P<0.01),AFP低浓度肝癌组与乙型肝炎肝硬化失代偿组GP73均处于高水平,中位数水平分别为203.75 ng/mL和157.61 ng/mL;单项检测GP73曲线下面积最大为0.807,AFP-L3%联合GP73曲线下面积为0.831;GP73灵敏度、特异度和准确度均高于AFP,AFP-L3%单项检测,AFP-L3%联合GP73检测特异度均高达98.93%;AFP低浓度肝癌组的AFP、AFP-L3%、GP73阳性率与乙肝病毒携带者组和健康组比较均有一定差异;AFP低浓度肝癌组GP73阳性率为71.40%,与其余各组比较均有一定差异。结论GP73单项检测在AFP低浓度肝癌中的诊断价值优于AFP,有利于减少漏诊率;AFP-L3%单项检测或联合GP73检测在AFP低浓度肝癌鉴别诊断中的特异性好,有利于降低误诊率。

血清AFP-L3%和GP73检测在AFP低浓度肝癌诊断和鉴别诊断中的应用评价

目的探讨血清甲胎蛋白异质体比率(AFP-L3%)和高尔基体蛋白73(GP73)单独和联合检测在甲胎蛋白(AFP)低浓度肝癌诊断和鉴别诊断中的应用价值。方法选取中国科技大学附属第一医院2017年1月至2020年1月AFP低浓度肝癌患者42例、乙型肝炎肝硬化失代偿期患者40例、乙型肝炎肝硬化代偿患者44例、慢性乙型肝炎患者43例、乙肝病毒携带者30例及健康体检者30例血清标本,检测AFP、AFP-L3%和GP73的含量,并计算AFP-L3%在AFP中的比率。比较AFP、AFP-L3%和GP73的表达水平和阳性率,通过受试者工作特征曲线(ROC)进行分析,并比较3个指标单项和联合检测的灵敏度、特异度及准确度。结果AFP低浓度肝癌组血清AFP水平与健康组比较差异有统计学意义(P<0.01),与其他各组比较差异无统计学意义;AFP低浓度肝癌组血清GP73水平与乙型肝炎肝硬化代偿组、慢性乙型肝炎组、乙肝病毒携带者组和健康组水平比较差异均有统计学意义(P<0.01),AFP低浓度肝癌组与乙型肝炎肝硬化失代偿组GP73均处于高水平,中位数水平分别为203.75 ng/mL和157.61 ng/mL;单项检测GP73曲线下面积最大为0.807,AFP-L3%联合GP73曲线下面积为0.831;GP73灵敏度、特异度和准确度均高于AFP,AFP-L3%单项检测,AFP-L3%联合GP73检测特异度均高达98.93%;AFP低浓度肝癌组的AFP、AFP-L3%、GP73阳性率与乙肝病毒携带者组和健康组比较均有一定差异;AFP低浓度肝癌组GP73阳性率为71.40%,与其余各组比较均有一定差异。结论GP73单项检测在AFP低浓度肝癌中的诊断价值优于AFP,有利于减少漏诊率;AFP-L3%单项检测或联合GP73检测在AFP低浓度肝癌鉴别诊断中的特异性好,有利于降低误诊率。

病原体宏基因组高通量测序医院实验室本地化之路:现状和挑战

病原体宏基因组高通量测序(mNGS)检测流程高度复杂,对环境、设备和人员技术能力要求高。如何在本地化有序发展、规范管理及合理使用mNGS技术,是从业者必须审慎对待的科学课题。本文对mNGS医院实验室本地化系统的建立模式,检测系统的分析性能确认,来自生物因子、检测流程、生物信息学分析及信息传输的风险管理,以及适用于临床的病原体数据库、生物信息学分析人才和诊断报告的需求等几个层面的问题进行了思考和讨论,以促进mNGS在医院内规范应用和健康发展。

《WS/T 807-2022临床微生物培养、鉴定和药敏检测系统的性能验证》解读

中华人民共和国卫生行业标准《WS/T 807-2022临床微生物培养、鉴定和药敏检测系统的性能验证》已于2022年11月2日发布,2023年5月1日起实施。该卫生行业标准(推荐标准)是制定和实施微生物检验程序性能验证方案的依据和实验室质量管理的准则,其目的是促进临床微生物检验领域的性能验证更加规范化和同质化。本文就卫生行业标准立项背景、编写情况、主要内容和实施难点及意义等进行解读和分析,以帮助临床微生物实验人员更充分地理解和执行卫生行业标准的相关规定,促进行业标准化和学科发展。

自建MALDI-TOF MS微生物鉴定数据库专家共识

自20世纪80年代末开始,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorptionionization time-of-flightmass spectrometry,MALDI-TOF MS)技术以其对微生物种属鉴定的快速、准确、低成本优势,逐步在临床微生物鉴定领域得到广泛认可。该技术对微生物鉴定的理论基础是将设备采集的未知样品图谱与数据库中已知菌种的图谱进行统计学聚类分析,获得鉴定结果。

单个核细胞EB病毒DNA载量在鼻咽癌患者中的变化初探

目的探讨外周血单个核细胞EB病毒DNA(Epstein-Barr virus DNA,EB-DNA)在鼻咽癌患者诊疗中的变化和临床意义。方法选择2014年4月至2017年10月期间,在中国科技大学附属第一医院西区门诊和住院部初诊经病理学确诊为鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)患者220例,年龄12～80岁,按≤30岁～≥71岁的每10岁间隔分为6组,用实时荧光定量聚合酶链反应检测外周血单个核细胞中EB-DNA载量在NPC患者不同性别、年龄、病理类型、临床分期的阳性率和载量的差异;对接受放化疗治疗前后的82例NPC患者的EB-DNA载量变化连续定期随访2年以上,以分析评价其变化与NPC患者复发与转移的关系。结果 220例NPC患者外周血单个核细胞EB-DNA阳性率为41.4%(91/220例),EB-DNA载量为0.0(0.0～612.5)拷贝/ml,但EB-DNA阳性率和载量在不同性别[男42%,女40%;男0.0(0.0～568.0)拷贝/ml,女0.0(0.0～899.5)拷贝/ml]、病理类型患者间的差异均无统计学意义(χ~2=0.079,Z=-0.106;χ~2=0.024,Z=-1.182;P均>0.05),但EB-DNA阳性率随年龄增长(≤30岁～≥71岁的6个年龄组阳性率分别为23.1%、47.1%、38.6%、36.8%、52.9%、63.6%)和临床分期(TNM分期Ⅱ+Ⅲ期27.4%、Ⅳa期45.7%、Ⅳb期75.0%)不断增高(χ~2=3.683,P=0.031;χ~2=16.996,P<0.001)。82例随访NPC患者治疗后有57例EB-DNA载量中位数明显低于治疗前[前1390.0(550.0～6535.0)拷贝/ml,后0.0(0.0～0.0)拷贝/ml;Z=-5.997,P<0.001],有25例患者治疗后EB-DNA载量[1490.0(348.5～3965.0)拷贝/ml]高于治疗前[0.0(0.0～205.0)拷贝/ml,Z=-4.529,P<0.001],且两组治疗后EB-DNA载量差异有统计学意义(Z=-6.911,P<0.001),治疗后EB-DNA载量升高的25例NPC患者中有18例发生局部复发或远处转移。结论 NPC患者外周血单个核细胞中EB-DNA载量阳性率随着年龄增长和临床分期的上升不断增高,治疗后定期监测患者EB-DNA载量变化对其预后有一定临床应用价值。

846例泌尿生殖道支原体感染及药敏结果分析

目的了解本院门诊患者泌尿生殖道支原体的感染及抗生素的耐药情况,为临床治疗生殖泌尿支原体感染提供依据。方法回顾性分析2013年8月至2018年5月本院846例患者泌尿生殖道支原体分离培养鉴定及药敏试验,取男性尿道分泌物或前列腺液、精液,女性阴道、外阴分泌物或宫颈分泌物标本,于一次性试管中送检标本。结果 846例患者支原体感染阳性率为41.3%,其中单纯解脲支原体(Uu)阳性率为22.5%(190/846),单纯人型支原体(Mh)阳性率为3.2%(27/846),Uu+Mh混合阳性率为15.6%(132/846),Uu+Mh混合感染率明显高于Mh单纯感染,差异有统计学意义(P<0.05)。支原体感染阳性患者以20~岁为主,男性患者感染率为6.6%,女性患者感染率为34.6%,女性患者支原体感染率为男性患者的5.24倍,差异有统计学意义(P<0.05)。单纯Uu感染时,交沙霉素、美满霉素、强力霉素和克拉霉素的用药敏感性达80%;单纯Mh感染时,美满霉素、强力霉素和交沙霉素敏感率较高;Uu和Mh混合感染时,耐药率增加,仅强力霉素和美满霉素对其有较好的疗效,敏感率大于50%。结论 Uu在泌尿生殖道感染的阳性率要高于Mh,强力霉素和美满霉素对泌尿生殖道支原体的感染有较好的治疗作用,临床应根据支原体药敏试验合理选择抗生素,从而大大减少耐药性产生。