聚乙二醇化重组人生长激素长效作用及在体生物活性研究

目的:观察聚乙二醇化重组人生长激素(PEGGH)在去脑垂体大鼠体内的(invivo)促进生长的生物活性功能和长效药理作用。方法:以摘除脑垂体的大白鼠为动物模型,PEGGHd1一次给药;rhGH(国家标准品)作为阳性对照,每天给药一次,连续6d,使总剂量与PEGGH一致。同时设模型组(去脑垂体大鼠),只给予0.1%牛血清白蛋白的生理盐水,d7处死大鼠,检测指标为:体重增加、尾长增长、胫骨骨骺板宽度和肝脏重量。结果:实验结果显示,与模型组比,PEGGH一次给药各剂量组体重显著增加(P<0.01),尾长也显著增长(P<0.01),胫骨骨骺板宽度显著增宽(P<0.01),中、高剂量组肝脏重量增加(P<0.01),并都具有量效关系;其促进动物生长的生物活性与每天给药的rhGH比没有差别(P>0.05),具有长效的作用,其中4.3、8.6IU·kg-1所至生物活性大于多次给药的普通rhGH8.6IU·kg-1效果;本批供试品测得生物效价为5.0IU·mg-1,比普通rhGH高1倍。结论:本批供试品PEGGH用药次数少、药效持续时间长,比普通rhGH具有更高的促进动物机体生长的生物活性。

HPLC多柱系统在重组人肿瘤坏死因子衍生物鉴别分析中的应用

采用反相高效液相色谱（ＲＰ－ＨＰＬＣ）、高效凝胶过滤色谱（ＨＰＳＥＣ）、高效疏水相互作用色谱（ＨＰＨＩＣ）和高效离子交换色谱（ＨＰＩＥＣ）及肽图谱测定等技术对国内３个厂家的重组人肿瘤坏死因子样品进行鉴别和同一性检定，对样品中存在的杂质峰给予了解释．为同类基因工程产品的质量控制提供了切实可行的方法和实验依据．

α-型重组人肿瘤坏死因子衍生物的稳定性研究

应用体外细胞毒实验对2种α－型重组人肿瘤坏死因子衍生物生物学效优的稳定性进行了考察。结果表明，这2种制品对温度和光照都比较敏感，受热后其生物学活性迅速下降。但在一20℃存放1a后，活性光明显变化。建议该2种制品应在低温条件下避光贮存。

α-型重组人肿瘤坏死因子衍生物体内抑瘤作用的初步研究

以荷瘤小鼠为模型 ,对 α-型重组人肿瘤坏死因子衍生物 rh TNF- α- Da的体内抑瘤作用进行了考察。结果表明 rh TNF- α- Da对 S180 小鼠肉瘤以及荷人肝癌 SMMC772 1和人结肠癌HCT- 8的裸鼠都具有明显的抑制效应 ,且这种作用存在剂量依赖关系 。

α－型重组人肿瘤坏死因子衍生物国家标准品的协作标定

应用首批α－型重组人肿瘤坏死因子（ｒｈＴＮＦ－α）国际标准品，通过体外细胞毒试验，对三种结构不同的ｒｈＴＮＦ－α衍生物制品的生物学效价进行了协作标定。根据对标化结果的统计学分析，将这三种ｒｈＴＮＦ－α衍生物制品建立为其相应物质的国家标准品，编号为６２８－Ｄａ－０１，６２８－Ｄ３ａ－０１和６２８－Ｋ－０１，它们的效价分别确定为每安瓿４００００，２４０００和１４０００国际单位。

海狗油对非酒精性脂肪肝肝细胞色素P450 2E1表达及与氧化抗氧化关系的影响

目的 :研究海狗油对非酒精性脂肪肝肝细胞色素P4 5 0 2E1表达及与氧化抗氧化关系的影响。方法 :于实验d 1一次性皮下注射小剂量四氯化碳并长期喂食高脂饲料复制大鼠脂肪肝模型 ,7周后 ,开始分别口服灌胃 (ig)给予模型组等体积橄榄油 ,阳性药辛伐他汀 4mg·kg-1,海狗油各组ig海狗油0 .5、1.6和 4 .8g·kg-1,每天 1次 ,连续 8周。观察肝组织病理形态的变化和肝细胞色素P4 5 0 2E1的表达 ;测定血清和肝内丙二醛 (MDA)、超氧化物歧化酶 (SOD)以及游离脂肪酸 (FFA)含量的变化。结果 :与脂肪肝模型组比较 ,海狗油不同给药组病理切片苏丹Ⅲ染色和HE染色显示肝细胞的脂变程度明显减轻 ,脂滴减少 ,免疫组化证明肝细胞色素P4 5 0 2E1表达受到不同程度的抑制 ,同时血清及肝内MDA、FFA显著降低 ,SOD活性升高。在模型组和各给药组不同的肝组织内 ,CYP2E1的表达强度及分布的方式存在着差异。结论 :海狗油能显著抑制大鼠脂肪肝CYP2E1的表达 ,减轻脂质过氧化反应。

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛇毒抗瘤蛋白的相对分子质量

目的建立改进的低分子SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛇毒抗瘤蛋白的相对分子质量 (Mr)。方法考察不同因素对电泳结果的影响 ,对Mr 标准进行直线回归分析 ,确定蛇毒抗瘤蛋白中组分的Mr。结果测得各条带的Mr 分别为 :2 35 0 0、15 4 0 0、1340 0、1130 0、930 0、80 0 0。结论此法供试品处理方便 ,用量少 ,在含 6mol/L尿素的分离胶 (交联度为 16 .5 % ,丙烯酰胺总浓度为 6 % )中能同时显示中、低Mr 的条带 ,是一种测定中、低Mr 的较好方法。

海狗油保肝作用的实验研究

目的：观察海狗油对化学毒物所致小鼠、大鼠急性肝损伤及对长期喂食高脂饲料大鼠的影响。方法：实验分为6组(n=10)：即空白组、模型组、阳性药组、海狗油低、中、高剂量组。化学毒物乙硫氨酸或四氯化碳致急性肝损伤实验：小鼠和大鼠各组分别灌胃(ig)给供试药9d或7d；d7ig DL-乙硫氨酸，实验结束时测定肝脂；d6ip四氯化碳，实验结束时测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和组织学检查。长期喂食高脂饲料大鼠实验：于实验d1一次性皮下注射小剂量四氯化碳并长期喂食高脂饲料造成脂肪肝模型大鼠，同时各组分别ig供试药，每天1次，连续10周后，称肝脏重量并计算肝脏系数，测定血脂、肝脂、脂质过氧化指标和组织学检查。结果：对乙硫氨酸致急性肝损伤的小鼠和大鼠ig给予海狗油(小鼠7．2 g·kg^(-1)，大鼠4．8g·kg^(-1))后，与模型组比较甘油三酯(TG)分别降低23％和16％(P＜0．01)；对四氯化碳致急性肝损伤的大鼠，海狗油4．8mg·kg^(-1)组使ALT降低24％(P＜0．01)、AST降低16％(P＜0．01)。长期喂食高脂饲料大鼠，与模型组比较，海狗油4．8mg·kg^(-1)组血清总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)、肝重量及肝细胞内TG、TC、FFA和丙二醛(MDA)含量显著降低(P＜0．01)，超氧化物歧化酶(SOD)活性升高(P＜0．01)，组织学检查显示肝细胞内脂变程度减轻，脂滴减少。结论：海狗油对化学毒物所致急性肝损伤的肝细胞有保护作用，对脂肪肝的形成具有明显的预防作用。

血清胸腺因子对放化疗保护作用的实验研究

目的:观察血清胸腺因子在对抗辐射和抗化疗副作用方面的作用。方法:抗辐射实验:KM小鼠,共6组,除空白组外,其它小鼠接受钴(Co)60照射后,模型组皮下(S.C.)注射0.1 ml生理盐水,FTS低、中、高剂量组分别S.C.注射FTS 0.025、0.25、2.5mg.kg-1,每天一次,连续7 d;阳性药组于实验d 1一次性口服灌胃尼尔雌醇2.5 mg.kg-1,检测免疫活性;对分别接受Co60的600或700拉德辐射小鼠,记录30 d内存活率。抗化疗副作用实验:对肝癌H22细胞的荷瘤小鼠,当日腹腔注射环磷酰胺100mg.kg-1,同时各组给药,每天一次,连续19 d,记录20 d内小鼠存活率。结果:小鼠经辐射后,与模型组比较,FTS各剂量组白细胞总数、对碳粒的吞噬速率和吞噬指数、胸腺系数显著提高(P<0.05);脾脏系数比尼尔雌醇组的脾脏系数略高(P>0.05);对700拉德的辐射小鼠,与模型组比,FTS 0.25 mg.kg-1组30 d内存活率显著增加(P<0.05)、平均存活天数明显延长(P<0.01),与阳性药组一致。荷瘤小鼠接受环磷酰胺化疗,皮下注射FTS给予荷瘤小鼠经化疗后的20 d内存活率增加。结论:血清胸腺因子具有抗辐射、抗化疗副作用,前景广阔。

海狗油对实验性脂肪肝脂代谢和血栓素A_2及丙二醛的影响

目的:探讨海狗油抑制脂肪肝的作用机理。方法:小剂量四氯化碳合并高脂饲料复制大鼠脂肪肝模型7周后,模型组灌胃(ig)给予等体积橄榄油;辛伐他汀组给予辛伐他汀4mg·kg-1·d-1,海狗油低、中、高剂量组ig海狗油0.5、1.6、4.8g·kg-1·d-1,连续8周,正常大鼠作为空白组。测定肝脂、肝内前列环素的代谢产物(6ketoPGF1α)与血栓素A2的代谢产物(TXB2)含量,观察脂质过氧化作用和组织学检查结果。结果:海狗油各组肝细胞内TXB2含量降低,6ketoPGF1αTXB2比值增加,超氧化物歧化酶(SOD)活性升高,甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、丙二醛(MDA)、游离脂肪酸(FFA)含量显著降低,组织学检查显示肝内脂变减轻,细胞色素P4502E1(CYP2E1)免疫组织化学染色显色指数减小。结论:海狗油使实验性脂肪肝的肝脂和肝内血栓素A2的代谢产物减少,即抑制肝脂合成、促进肝脂代谢(直接作用);使肝内血液粘度减少、血液流动性增加(间接作用),从而对实验性脂肪肝有抑制作用;同时海狗油使MDA含量降低、SOD活性升高而有抗氧化作用。

肿瘤坏死因子检测技术的进展

肿瘤坏死因子检测技术的进展林缨（中国药品生物制品检定所，生化药品与基因工程药物室北京１０００５０）肿瘤坏死因子（ＴｕｍｏｒＮｅｃｒｏｓｉｓＦａｃｔｏｒ，ＴＮＦ）是一种具有多种生物学活性的细胞因子，它参与机体免疫系统的功能调节，并在感染性疾病的发生、组...