血浆蛋白制品SARS冠状病毒特异性抗体检测

国内外研究已经证实,"非典型性肺炎"(严重的急性呼吸道综合症,severeacute respiratory syndrome,SARS)是一种新的冠状病毒为主要病原体的呼吸系统传染病.目前国内外尚无特异性预防和治疗药物,理论上,输注针对SARS冠状病毒的人特异性免疫球蛋白将使受注者避免病毒的感染.本文作者在所承担的国家"八六三"专项研究(2003AA208202)中,采用国家药品管理当局批准的SARS冠状病毒抗体(IgG)检测试剂盒,通过样品系列稀释和ELISA方法,进行了多种血浆蛋白制品的SARS冠状病毒抗体(IgG)检测.

重组人促红素体内、体外生物学活性差异成因分析

目的分析造成重组人促红素(rHuEPO)体内、体外生物学活性差异的原因。方法按《中国药典》三部(2005版)方法检测rHuEPO样品体内、体外生物学活性,并通过等电聚焦电泳分析、唾液酸含量、纯度、N-糖链糖基化和相对分子质量检测,探讨样品体内、体外生物学活性产生差异的原因。结果体内、体外生物学活性有差异的rHuEPO样品中,存在糖链末端N-乙酰神经氨酸残基不完整的rHuEPO成分。纯度、N-糖链糖基化和相对分子质量检测结果未见异常。结论为提高rHuEPO产品质量,应在生产过程中有效去除N-乙酰神经氨酸残基不完整的rHuEPO。

SARS特异性免疫球蛋白的制备及相关指标的检定

目的 分析人SARS特异性免疫球蛋白的抗体效价和S D病毒灭活残留物含量。方法 采用ELISA和蚀斑实验 ,检测SARS康复患者血浆及免疫球蛋白制品的SARS病毒IgG抗体和中和抗体效价 ;以HPLC和气相色谱检测制品中TritonX 10 0和TNBP残留量。结果 由多人份SARS康复患者混合血浆制备的静脉注射用人SARS特异性免疫球蛋白样品IgG抗体和中和抗体效价提高 5倍以上 ;TritonX 10 0和TNBP残留量均低于规定值。结论 经S D病毒灭活的静脉注射用人SARS特异性免疫球蛋白符合现行规程要求。

重组人红细胞生成素质量控制体系研究

目的研究重组人红细胞生成素(rHuEPO)质量控制体系。方法用网织红细胞分析仪测活法测定rHuEPO体内生物学活性。比较不同的等电聚焦电泳条件、蛋白含量测定方法和牛血清白蛋白检测方法。按rHuEPO特点进行其他项目的检测。结果采用全自动网织红细胞计数仪检测rHuEPO体内生物学活性方法简便可靠;电泳时添加尿素可增加区带清晰度和条带清晰度;采用BSAELISA检测牛血清白蛋白含量可准确定量;免疫印迹试验可有效地检测rHuEPO成品质量。结论本研究建立了一套完善的rHuEPO质量控制体系。

水痘-带状疱疹免疫球蛋白研究进展

水痘-带状疱疹免疫球蛋白来自于含有高滴度抗水痘-带状疱疹病毒抗体的健康献血员血浆,在暴露于危险因素后的特定时间段内应用,可以有效避免罹患水痘或使水痘/带状疱疹症状减轻,特别是对免疫低下或免疫缺陷的人群具有重要意义。本文就水痘-带状疱疹免疫球蛋白的生产、应用、检测方法以及研究新方向等进行了简要综述。

原料血浆混样HCV/HIV-1核酸检测的方法学研究

目的 建立原料血浆混浆核酸检测方法。方法 以国产HCV和HIV核酸扩增 (PCR)荧光定量检测试剂进行WHO标准品的灵敏度、重现性和精密度实验 ,并对 19196份国内原料血浆进行HCVRNA和HIV 1RNA核酸扩增分析。结果 扩增系统能够确保高拷贝数 (2 0 0IU/ml)标准品核酸的检出率 ,对于 <10 0IU/ml的低拷贝数标准品核酸检出率逐渐降低 ;受检原料血浆样本没有检出HCVRNA和HIV 1RNA阳性。结论 核酸扩增方法适用于原料血浆病毒筛查。

PEG化猪血红蛋白偶联物的设计与产物分析

目的 采用结构分析和分子模拟方法修饰猪血红蛋白,制备人血代用品的可行性。方法 通过蛋白质结构分析方法比较猪血红蛋白αβ二聚体晶体表面氨基的数量及其反应活性,以分子模拟方法确定修饰产物的可能结构,以mPEG修饰猪血红蛋白,并分析修饰产物理化性质。结果 修饰产物的相对分子质量增大,平均偶联程度达到27％。结论 计算机模拟技术可以用于异源血红蛋白的修饰。

血红蛋白类红细胞代用品理化性质的色谱分析

目的建立血红蛋白类红细胞代用品的色谱分析方法.方法通过高效液相系统与二极管矩阵检测器、多角度激光散射检测器和蒸发光散射检测器进行组合,检测聚乙二醇(PEG)化牛血红蛋白(PEG-bHb)的色谱纯度、相对分子质量分布和磷脂含量.结果PEG-bHb为多位点不均一修饰的混合物,数均相对分子质量为1.211×105,重均相对分子质量为1.347×105,残余磷脂含量低于1μg/ml.结论色谱分析方法是进行血红蛋白类红细胞代用品理化性质分析的适宜方法.

SARS康复患者血浆蛋白谱的双向凝胶电泳分析

以蛋白质双向凝胶电泳(2DE),比较不同中和抗体效价的SARS康复患者血浆样本(实验组)与正常人单采血浆样本(对照组)蛋白谱的异同.结果显示,对照组样本的2DE图谱出现蛋白斑点338±24个,实验组样本出现蛋白斑点348±45个,二者主要斑点的位置与数量基本一致;对照组中少量蛋白斑点的出现频度不同,且有4个蛋白点群的灰度值存在明显的差异;实验组有6个蛋白点群与对照组出现差异,并在相同区域Ⅲ内有4个蛋白斑点的灰度值出现变化,且灰度值变化与样本的中和抗体效价值呈正相关性.结果表明,实验组与对照组的蛋白2DE图谱存在差异.

3种方法分析白蛋白空气微球的球壁蛋白

采用高效液相色谱（HPLC）、醋酸纤维膜电泳和半微量定氮法测定5％声振人血白蛋白空气微球制剂中球壁蛋白的含量。HPLC确证了球壁蛋白主要成分为人血白蛋白；醋酸纤维膜电泳测定空气人血白蛋白微球制剂中人血白蛋白纯度＞90％；半微量定氮法测出球壁蛋白含量为3．56％左右，99％正常值范围为2．52％～4．60％。