中药新药临床前安全性评价

1 概述 药物是用于治疗、预防和诊断人类疾病的一类特殊商品。所以,安全、有效和质量可控是对药品的基本要求。

缺血性脑卒中后小胶质细胞吞噬作用的研究进展

缺血性脑卒中是影响人类健康的重大疾病,目前有关它的病理机制并未完全阐明。小胶质细胞是中枢神经系统中重要的免疫细胞。缺血性脑卒中后,大量小胶质细胞激活,并向损伤区域迁移聚集,吞噬坏死的细胞或碎片,释放炎症因子或营养因子,参与了缺血性脑卒中的病理过程。其中小胶质细胞的吞噬作用在脑缺血损伤以及康复中发挥重要的作用。本文总结小胶质细胞吞噬作用的分子机制,并综述小胶质细胞吞噬作用在缺血性脑卒中的研究进展,探讨小胶质细胞吞噬作用在脑缺血损伤和康复中的多样性和复杂性,旨在为缺血性脑卒中的治疗和药物研发提供新的思路。

基于LC-MS/MS同时测定小鼠血浆中对乙酰氨基酚及其毒性代谢产物对乙酰氨基酚半胱氨酸的浓度

目的建立一种同时测定小鼠血浆中对乙酰氨基酚(APAP)及其毒性相关代谢产物对乙酰氨基酚半胱氨酸(APC)的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)方法。方法以茶碱为内标,采用蛋白沉淀后取上清液挥干复溶的方法进行血浆样品前处理。采用Agilnet Zorbax SB-C_(18)(3.0 mm×100 mm,3.5μm)色谱柱进行梯度洗脱,水相为含0.1%甲酸的水溶液,有机相为含0.1%甲酸的甲醇溶液。选择三重四极杆质谱仪(TSQ Quantum Ultra),采用电喷雾离子化方式(ESI),在选择反应离子监测(SRM)模式下进行正离子检测,同时对APAP(152.1行正离子检测)和APC(271.0行正离子检测)进行定量分析。结果APAP在60~3000 ng·mL^(-1)的范围内线性关系良好,APC在20~1000 ng·mL^(-1)的范围内线性关系良好,该方法选择性、批内和批间准确度、批内和批间精密度、基质效应、提取回收率均符合生物样品分析要求。结论本研究所建立的LC-MS/MS方法可应用于APAP及APC在小鼠体内药代动力学研究。

选择性剪接在肿瘤化疗耐药中的研究进展

恶性肿瘤是威胁人类健康的重大疾病之一,治疗过程中肿瘤细胞对化疗药物产生耐药性是化疗失败的重要原因。肿瘤细胞耐药机制复杂,许多化疗耐药机制涉及基因和蛋白质的突变和表达改变。近年来,发现选择性剪接是导致肿瘤化疗耐药的新机制之一。为了全面了解选择性剪接对癌症生物学和化疗的影响,本文总结了选择性剪接调节癌细胞获得耐药性的作用,通过分析总结这些分子调节剪接事件为应对肿瘤耐药性提供新思路。

土茯苓总苷中的非黄酮类化学成分研究

目的:研究土茯苓总苷中的非黄酮类化学成分。方法:采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶色谱及半制备液相色谱等分离技术,对土茯苓总苷中的化学成分进行分离纯化。结合理化性质,通过MS、NMR和CD等波谱数据鉴定化合物结构。结果:从土茯苓总苷中分离得到28个化合物,分别鉴定为:薯蓣皂苷元(1)、β-谷甾酮(2)、豆甾醇(3)、白藜芦醇(4)、咖啡酸(5)、5-O-咖啡酰莽草酸(6)、4-O-咖啡酰莽草酸(7)、3-O-咖啡酰莽草酸(8)、反式肉桂酸(9)、蝉翼藤糖酯A(10)、华中冬青素(11)、(+)-南烛木树脂酚(12)、肉桂酸乙酯(13)、毛色二孢素(14)、糙叶败酱碱(15)、金色酰胺醇酯(16)、交链孢酚(17)、没食子酸(18)、豆甾-4-烯-3,6-二酮(19)、异细交链孢素(20)、3,4-二甲氧基咖啡酸(21)、thunberginol C(22)、3,5-二羟基香豆素-7-O-α-L-鼠李糖苷(23)、白皮杉醇(24)、原儿茶酸(25)、莽草酸甲酯(26)、甲基岩藻糖苷(27)、8-甲氧基蜂蜜曲菌素(28)。结论:其中,化合物15~17、19、20、22、23和28为首次从菝葜属植物中分离得到,化合物2、11、21和27为首次从该植物中分离得到。

X连锁凋亡抑制蛋白在肝细胞癌中的研究进展

X连锁凋亡抑制蛋白是一种高度保守、广泛表达的蛋白,是凋亡抑制蛋白家族中的成员之一。X连锁凋亡抑制蛋白通过直接结合或泛素化降解半胱天冬酶以抑制其活性,从而拮抗凋亡受体及线粒体介导的细胞凋亡。肝细胞癌中X连锁凋亡抑制蛋白表达异常升高,可拮抗肝细胞癌细胞的凋亡,是肝细胞癌预后不良的重要因素。因此,通过抑制肝细胞癌细胞中X连锁凋亡抑制蛋白的表达,是一种潜在的有效治疗肝细胞癌的策略。正在开发的靶向X连锁凋亡抑制蛋白的药物有反义寡核苷酸和Samc类似物等。本文总结了靶向X连锁凋亡抑制蛋白药物治疗肝细胞癌的作用机制及研究进展,以期为肝细胞癌的药物开发和临床治疗提供理论依据。

L-天冬酰胺酶在肿瘤中的研究进展

氨基酸代谢与细胞氧化应激、细胞增殖和细胞凋亡等多种细胞过程相关,参与糖尿病、衰老、肿瘤等生理病理过程。L-天冬酰胺酶(L-asparaginase,L-ASP)是氨基酸代谢途径中的关键酶,能够水解天冬酰胺生成天冬氨酸和氨,参与细胞增殖、凋亡、迁移以及侵袭等生物过程。研究表明,L-天冬酰胺酶影响白血病、乳腺癌、胃癌、肺癌、胰腺癌、肝癌等多种肿瘤的发生和发展。本文主要从L-天冬酰胺酶的结构、酶学作用、与其他药物联用对多种肿瘤治疗的潜力进行综述。

PD-1/PD-L1小分子抑制剂临床进展

PD-1/PD-L1是维持机体稳态的免疫检查点共抑制分子,与肿瘤免疫逃逸密切相关。目前全球已有22款PD-1/PD-L1单抗获批用于治疗各类恶性肿瘤,然而小分子抑制剂的研发却进展缓慢。自2015年百时美施贵宝公司公开第一份联苯类化合物专利以来,至今已有15款PD-1/PD-L1小分子抑制剂进入临床开发。本文从简介PD-1/PD-L1的结构和信号通路出发,分析部分PD-1/PD-L1小分子抑制剂的临床前研究,侧重综述该类小分子抑制剂临床研究的进展。

中药对一氧化氮的影响研究

目的 :深入开展中药对一氧化氮的研究 ,加速中药现代化。方法 :回顾近年来我国中药对一氧化氮的研究概况 ,对今后的发展提出建议和看法。结果 :中药对一氧化氮的研究内容丰富 ,涉及面广 ,但目前研究主要集中于阐明中药治疗机制 ,其研究的深度也有待提高。涉及一氧化氮的中药新药研究开发尚未见报道。结论 :中药对一氧化氮的深入研究有利于中药新药的研究开发 ,有利于中药整体水平的提高 ,可加速中药走向世界。

3D打印技术在药物高端制剂中的研究进展

3D打印作为一种制造技术在许多科技领域得到迅速发展,由于其操作简单、灵活性好、重复性高、适应面广等优点而得到药物制剂研发人员的重视,目前在速释制剂、缓控释制剂、植入剂和复方制剂等药物高端制剂中有较广泛的研究和应用,尤其在制备具有多种释放机制的药物制剂方面占有特殊地位。本文介绍了近年来用于该领域的3D打印技术研究进展,分析评价其在该领域应用的前景及挑战。

中药鬼箭羽提取物对脂肪细胞葡萄糖摄取作用的影响

目的 :在对中药鬼箭羽药效学研究的基础上 ,初步探讨其各提取组份SML 1,SML 2 ,SML 3,SML 4对于脂肪细胞的降糖作用机制。方法 :采用分离的大鼠脂肪细胞 ,用高浓度葡萄糖和胰岛素诱导脂肪细胞胰岛素抵抗模型 ,观察鬼箭羽各提取组份对于胰岛素抵抗模型脂肪细胞的葡萄糖摄取的影响以及对于正常脂肪细胞 ,低浓度胰岛素刺激脂肪细胞的影响。结果 :鬼箭羽各提取组份SML 1,SML 2 ,SML 4 ( 10 μg/ml)对脂肪细胞葡萄糖的基础摄取率有所提高。SML 2 ,SML 3( 10 0 μg/ml) ;SML 1,SML 2 ,SML 3,SML 4 ( 10 μg/ml) ;SML 1,SML 3,SML 4 ( 1μg/ml) ;SML 1,SML 2 ,SML 3( 0 1μg/ml)对于低浓度胰岛素 ( 1 2nmol/L)刺激的外周葡萄糖摄取均有协同增强作用。SML 1,SML 2 ,SML 3,SML 4 ( 10 0 μg/ml) ;SML 1,SML 2 ,SML 3,SML 4 ( 10 μg/ml) ;SML 1,SML 2 ( 1μg/ml) ;SML 1,SML 2 ( 0 1μg/ml)可以提高胰岛素抵抗脂肪细胞的葡萄糖摄取水平。 结论 :鬼箭羽各提取组份可以促进正常脂肪细胞低浓度胰岛素刺激脂肪细胞的葡萄糖摄取 ,促进胰岛素抵抗脂肪细胞的葡萄糖摄取可能是其降糖作用机制之一。

大分子物质对中药注射剂的安全性影响

目的去除中药注射剂中大分子物质,观察其主要功效是否改变,安全性是否提高,试图为提高中药注射剂的安全性提供技术策略。方法用不同截留分子量的分子筛去除两种上市中药注射剂(清开灵注射液和双黄连注射液)大分子,获得去除大分子的中药注射液和富含大分子的中药注射液,用HPLC检测去大分子中药注射剂的指纹图谱变化;用脂多糖家兔发热模型检测两种去大分子注射液的退热作用;参照药典方法检测富含大分子中药注射剂的一般毒性或过敏毒性。结果经截留分子量10k的分子筛处理后,两种去大分子中药注射液的指纹图谱变化小于5%,退热作用基本不变;而两种富含大分子注射剂具有明显的一般毒性或过敏毒性。结论采用适当截留分子量的分子筛去除中药注射剂大分子物质能在确保疗效无明显变化的前提下提高中药注射剂的安全性。

一氧化氮供体型创新药物的研究进展

一氧化氮(NO)作为信使物质或效应分子在心血管、神经和免疫等诸多系统发挥非常重要的作用。设计和研究NO供体型药物已成为创新药物研究的重要策略之一。本文结合作者的科研实践,对NO供体型抗癌药、心血管药和非甾体抗炎药的化学特征、生物学意义、潜在用途及其作用机理作一综述,并对今后的发展趋势进行展望。

RP-HPLC法测定银黄冲剂中黄芩苷在大鼠体内的血药浓度及药代动力学研究

采用高效液相色谱法测定银黄冲剂中黄芩苷在大鼠血浆中的浓度，并研究其药代动力学。色谱柱为Diamonsil^TMC18（250 mm×4.6 mm，5μm）柱，流动相：甲醇-磷酸二氢钠缓冲液（pH 2.6），体积比为52：48，检测波长275 nm，流速：1.0 mL/min。结果血浆中黄芩苷在0.05-20μg/mL范围呈良好的线性关系，r^2=0.9997，最低定量限为6 ng/mL。大鼠按1.6 g/kg灌胃银黄冲剂后，黄芩苷的血药浓度时间曲线符合口服吸收有滞后时间的二房室模型，主要药动学参数为t1/2：0.17 h，Vd：2.65 L，K12：5.36/h，K21：0.71/h，Ke：4.25/h，AUC：2.01μg·h/mL。HPLC测定黄芩苷的血药浓度操作便捷，灵敏度高，适用于黄芩苷的药代动力学研究。

角蒿中的环己乙醇类化学成分研究

利用Sephadex LH-20及硅胶等柱色谱技术从药用民族植物角蒿(Incarvillea dissectifoliolaQ.S.Zhao)的根茎中分离得到了11个环己乙醇类化合物。经理化数据对照和波谱分析,确定它们的结构分别为rengyolone(1),(3aS,6R)-2,3,3a,6,7,7a-hexahydrobenzofuran-3a,6-diol(2),(3aR)-hexahydro-3a-hydroxybenzofuran-6(2H)-one(3),(3aR,6R)-octahydrobenzofuran-3a,6-diol(4),(3aR,6S)-octahydrobenzofuran-3a,6-diol(5),4-hydroxy-4-(2-hydroxyethyl)cyclohexanone(6),(3aS,4S)-hexahydro-3a,4-dihydroxybenzofuran-6(2H)-one(7),(3aR,4S)-hexa-hydro-3a,4-dihydroxy benzofuran-6(2H)-one(8),rengyol(9),isorengyol(10)和rengyoside B(11)。这11个化合物均为首次从角蒿中分离得到。化合物4,5,6,7,8,9,10的细胞毒活性未见报道,对它们的细胞毒活性进行了测定,结果表明它们对HL-60细胞株的IC50分别为102,44.7,24.6,98.0,47.8,25.3,92.3和47.2μmol/L。

蛋白质包被PVDF膜吸附法检查中药注射剂缩合鞣质

目的试图建立一种操作简便、检查限量极低并适合中药注射剂缩合鞣质检查方法。方法将蛋白质包被的PVDF膜片安装在一滤过孔径为2 mm的过滤装置上,将一定体积的中药注射剂溶液通过蛋白质包被PVDF膜,用有机溶剂脱去杂色,根据膜片颜色深浅判断缩合鞣质限量。结果当通过蛋白质包被PVDF膜的样品体积为0.5 mL时检查限量约为0.07 mg/mL,检查限量低于2010年版《中华人民共和国药典(一部)》。本法能直接检测出4种上市中药注射液(清开灵注射液、双黄连注射液、丹参注射液和灯盏细辛注射液)存在微量缩合鞣质。结论本法操作简便并具有较强的抗干扰能力,检测限低,可以用于中药注射剂微量缩合鞣质限量的严格控制。

中药广防己与粉防己总提取物利尿效应及肾毒性比较研究

目的在药效剂量下,观察中药广防己总提取物利尿效应及其肾脏毒性出现程度,并与粉防己总提取物进行比较。方法采用大鼠代谢笼法,观察广防己和粉防己对正常大鼠尿量和尿液电解质的影响以及与肾功能相关指标的变化,比较两者利尿效应及产生肾毒性情况。结果广防己、粉防己各组在给药第3、5天广防己高、中剂量组在0-2 h时间段及24 h总尿量显著增加,与对照组比较差异有显著性（P〈0.05,P〈0.01）;广防己、粉防己各剂量组大鼠尿液中Na^＋、K^＋、Cl^-浓度及尿渗量（Uosm）与对照组比较未出现明显差异;广防己各剂量组尿素氮（BUN）均显著升高,中、低剂量组尿液肌酐（CR）升高,高剂量、中剂量组均能增加尿液中β2-微球蛋白的表达（P〈0.05）。结论广防己各剂量组单位时间段尿量及总尿量均略高于等剂量粉防己各组,但无统计学意义;相关指标显示广防己在药效剂量范围内就具有一定的肾毒性,且其肾毒性主要与近曲小管病变有关;粉防己在等剂量下未见明显肾脏毒性表现。

新药研究开发的进展与展望

综述了近年来国际国内新药研究开发的最新进展和重要成就，提出了加速我国新药研究的若干思考，并对２１世纪初期新药研究开发的一些发展趋势进行了展望。

齐墩果酸预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤中PI3K-AKT-GSK-3β信号传导通路的影响

目的:齐墩果酸(oleanolic acid,OA)预处理可使大鼠肝糖原增加并使肝脏缺血再灌注损伤(hepatic ischemic reperfu-sion injury,HIRI)减轻,但机制不详。本研究拟探讨OA预处理对大鼠HIRI前后的PI3K-AKT-GSK-3β信号传导通路的影响。方法:128只SD大鼠随机分为假手术组(SH组)、缺血再灌注组(IR组)、0.5%羧甲基纤维素钠组(CM组)和齐墩果酸预处理组(OA组)。OA组以100mg/kg的齐墩果酸混悬液,SH和IR组以相同容积的水,CM组以相同容积的0.5%CMC-Na分别每日灌胃1次,连续7天。第8天建立70%肝脏缺血再灌注模型,肝脏缺血60min后行再灌注。于术前(第8天)、再灌注0、3、6h取肝组织。用Western blot法测定肝组织的p-PI3K(p85)、p-AKT(ser473)、AKT、p-GSK-3β(ser9)、GSK-3β的蛋白表达量。结果:术前、再灌注0h时,OA组的p-PI3K(p85)、p-AKT(ser473)、p-GSK-3β(ser9)的蛋白表达量分别比其他3组明显增加(P<0.05);此时SH组、IR组、CM组的各蛋白表达量之间比较未见统计学差异(P>0.05)。再灌注3、6h时,OA组的p-PI3K(p85)、p-AKT(ser473)、p-GSK-3β(ser9)蛋白含量分别比其他3组显著增加(P<0.05),SH组相应时点的各蛋白含量均比其他3组的含量明显降低(P<0.05),IR组与CM组相应时点的各蛋白含量之间比较未见差异(P>0.05);各组的AKT与GSK-3β蛋白含量在各个时间点之间均未见统计学差异(P>0.05)。结论:OA预处理可使HIRI前后的p-PI3K(p85)、p-AKT(ser473)和p-GSK-3β(ser9)蛋白含量增加,激活肝脏PI3K-AKT-GSK-3β信号通路,此可能是OA减轻HIRI的机制之一。

齐墩果酸预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤过程中IKK/I-κB/NF-κB通路的影响

目的:探讨齐墩果酸(oleanolic acid,OA)预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤(hepatic ischemic/reperfusion injury,HIRI)过程中IKK/I-κB/NF-κB信号转导通路的影响。方法:将128只SD大鼠随机分为假手术组(SH组)、缺血再灌注组(IR组)、0.5%羧甲基纤维素钠组(CM组)和齐墩果酸预处理组(OA组)。OA组以100 mg/kg的齐墩果酸混悬液,SH和IR组以相同容积的水,CM组以相同容积的0.5%CMC-Na分别每日灌胃1次,连续7天。第8天建立70%肝脏缺血模型,缺血60 min后再灌注。于术前、再灌注0、3、6 h取肝组织。用Western blot法测定肝脏细胞内IKK2,I-κBα及细胞核内NF-κB p65蛋白含量。结果:术前、0 h,各组胞浆未检测到IKK2,核内仅检测到极少量NF-κB,各组I-κBα蛋白量之间没有统计学差异。3、6 h时,SH组胞浆IKK2和核内NF-κB的蛋白含量均分别明显低于其余3组(P<0.05);此时OA组该两个蛋白含量分别明显低于CM组和IR组(P<0.05)。3、6 h时,SH组I-κBα的蛋白含量均分别明显高于其余3组(P<0.05),OA组此值分别明显高于CM组和IR组(P<0.05),CM组和IR组各时点之间的细胞内IKK2,I-κBα及细胞核内NF-κB p65蛋白量均无统计学差异(P>0.05)。结论:HIRI能促进胞浆内IKK2蛋白的表达,使I-κB磷酸化水解,NF-κB活化进入细胞核内介导炎症反应,损伤肝细胞。缺血前使用OA可抑制IKK/I-κB/NF-κB信号传导通路的激活,这可能是OA预处理减轻HIRI的机制之一。