泛素蛋白酶体在糖尿病肾脏疾病足细胞损伤中的作用研究进展

糖尿病肾脏疾病是长期高血糖引起的肾脏结构功能异常损伤疾病。糖尿病肾脏疾病中足细胞损伤是肾脏炎症、肾小球过滤屏障损伤和肾脏纤维化变化的主要原因。泛素蛋白酶体系统是细胞内蛋白清除的主要途径,近年来研究发现其在糖尿病肾脏疾病足细胞损伤中发挥重要作用。高糖相关损伤因素引起足细胞蛋白酶体功能异常、泛素连接酶表达水平改变、去泛素酶活动增加,进而造成足细胞内损伤性蛋白积累或者保护性蛋白异常降解,促进足细胞损伤。现对糖尿病肾脏疾病中足细胞损伤和泛素蛋白酶体参与的损伤机制进行综述。

中药物质基础新形式及其药动/药效研究

中药作为中华民族的瑰宝,拥有悠久的历史和丰富的文化内涵。过去几百年,大量结构明确、活性显著、机制清楚的活性化合物被发现,其研究初步明晰了中药的效应物质基础。然而,中药的天然成分具有骨架多样性和结构复杂性,除了单体小分子化合物,近年来越来越多的研究发现中药存在发挥药效的物质基础新形式,如活性单体化合物形成的超分子,以及具有药理活性的生物大分子等。聚焦中药物质基础新形式,通过新技术、新机制、新应用的分析,以期为中药药效物质基础、药动/药效相关性研究提供新思路。

年龄相关肝病中的肝脏细胞异质性研究进展

年龄相关肝病是成年人群中发病率随着年龄增加呈指数级增长的一系列肝脏相关疾病。肝脏细胞异质性是指年龄相关肝病患者体内的多种肝脏细胞的衰老表现形式不同,具体表现为蛋白质、生物标志物表达水平及细胞功能等方面的差异。随着全球老龄化的到来,慢性肝病发病率增加,肝脏细胞衰老在多种慢性肝病的发生与发展中发挥重要作用。靶向消除衰老肝脏细胞或抑制衰老相关分泌表型可显著改善相关疾病。现对近年来肝脏细胞衰老及相关疾病联系的最新研究进展进行综述。

黑素干细胞及其在白癜风复色过程中的作用研究进展

黑素干细胞具有无限自我更新能力,在一定条件(如伤口愈合、基因毒性药物处理和紫外线照射等)的刺激下,细胞或组织会通过再生来修复受损,即招募干细胞来分化为成熟的黑素细胞。近年来有研究发现黑素干细胞可作为皮肤和毛发的黑素细胞库,这为许多色素紊乱性疾病的治疗带来了新的希望。本文主要对黑素干细胞进行了介绍,并对黑素干细胞再生的关键信号通路、与邻近细胞之间的串扰及其在白癜风复色过程中的作用进行讨论。

HPLC-荧光检测法测定大鼠血浆中大黄酸的浓度及其药代动力学

目的:建立测定大鼠血浆中大黄酸浓度的HPLC荧光检测方法,并对大黄酸在大鼠体内的药代动力学行为进行研究。方法:血浆样品经乙醚萃取后,用HPLC荧光法(HPLCFLD法)进行测定分析。色谱柱为C18Hypersil,ODS2,5μm,250mm×4.6mmID,流动相为0.5%的冰醋酸-乙腈-甲醇(27∶10∶60),检测激发波长440nm,发射波长520nm,同时测定大鼠单次灌胃大黄酸70mg/kg后血药浓度,并利用DAS软件拟合其药代动力学参数。结果:大黄酸的血药浓度在0.052～80μg/mL范围内线性关系良好,最低检测限为2ng/mL,以质控样品计算,在各浓度水平下,此法的回收率均大于85%,日间和日内精密度小于15%,符合生物样品分析要求。大鼠灌胃大黄酸70mg/kg后,血药浓度-时间曲线呈二室模型。主要药动学参数Tmax,Cmax,AUC(0-t),MRT,T1/2α,T1/2β分别为0.50±0.27h,54.64±11.60μg/mL,164.29±44.77μg/h·mL,4.03±0.46h,1.48±0.77h,3.68±1.42h。结论:该法操作简便、快速、灵敏,适用于对微量生物样品进行大批量测定。

血清微小RNA在中药肝毒性临床前评价中的应用研究

通过对19种具有潜在肝脏毒性的中草药进行临床前安全性评价,在观测体重、摄食量、血清生化指标、脏器系数与肝脏组织病理学改变的同时,探讨血清微小RNA(miRNA)作为新型候选标志物在中草药肝损伤诊断中的应用价值。结果表明:与溶剂对照组相比,血清miRNA-122水平显著升高的给药组有6组,而血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)水平显著升高的分别为2组和3组,其中五倍子组表现为急性药源性肝损伤。在血清miRNA-122的时间相关性和剂量相关性分析中,与血清ALT和AST相比,血清miRNA-122呈现出更高的敏感性,表现为更早期和更大幅度的显著升高。说明血清miRNA-122可作为中草药肝损伤的新型候选诊断标志物,与肝脏组织病理学改变具有良好的相关性,且较传统血清生化学指标更为敏感。

中药中马兜铃酸肾毒性研究进展

马兜铃酸（aristolochicacid，AA）是一种硝基菲类化合物，是马兜铃属植物如关木通、马兜铃中的主要成分。含有AA的中药或中成药，在临床上曾用于风湿病、毒蛇咬伤和癌症的辅助治疗等。我国也曾将以马兜铃酸I（AAI）为主的总酸称为“增噬力酸”，并应用于临床。1993年Van—heiweghemjI。等报道了比利时妇女因服用含有广防己的减肥药而出现急性肾间质纤维化、。肾功能不全，并提出“中草药肾病（Chineseherbnephropathy，CHN）”的概念。

中药注射剂国家药品标准提高及进展情况分析

目的:掌握并分析目前中药注射剂品种的基本信息、分布和使用、质量标准等情况,为进一步推进未完成标准提高的中药注射剂国家药品标准提高工作提供基础研究数据,为国家药品标准监督管理部门更科学合理地评价和保障中药注射剂的质量、安全、有效提供研究分析资料和技术支撑。方法:通过国家食品药品监督管理总局数据库、中国药学会数据库搜索查询中药注射剂基本信息,包括:文号状态、生产企业分布、品种产量及市场销售额、临床应用情况;通过国家药典委员会档案库查询确定这些品种的标准沿革及其现执行标准和标准内容,对已完成标准提高品种的原标准及现行标准进行检测项目的比对分析,对部分企业(10家)的品种(14个)标准提高有关情况进行调研,梳理出未完成标准提高品种的标准项目收载情况并对其标准水平进行初步评估。结果与结论:通过本课题研究,梳理出129个中药注射剂的文号、生产企业、规格、标准沿革并明确了最终执行标准。结合已完成标准提高的品种检测项目修订、提高后标准对产品质量的影响、未完成标准提高品种标准现状及标准提高等情况,提出了下一步标准提高工作的建议:一是分批提高、分步纳入标准正文的标准提高方案。建议综合临床疗效、适用范围、安全性及不良反应等情况,对中药注射剂未完成标准提高品种重新进行全面评估定位,制定出分类逐步提高的方案。二是应综合国家引导、强制实施、企业参与并负责、临床应用及反馈、上市后再评价再研究等多方面力量,进一步加强中药注射剂质量标准提高的逐步推进工作。

黄酮类化合物在Caco-2细胞模型中的吸收规律

目的:研究黄酮类化合物—槲皮素、木樨草素、芹菜素、大豆苷元、染料木素、木樨草苷、忍冬苷、黄芩苷及芦丁在Caco-2细胞模型中的吸收特性,探讨其吸收与结构的关系。方法:分别测定Caco-2细胞在各种条件下对9种黄酮类化合物的吸收。结果:Caco-2细胞对9种黄酮类化合物吸收均以偏酸性介质为佳;吸收量均随着浓度的增加而呈线性增加;当pH5·5时,5种黄酮苷元的吸收量顺序为:槲皮素>木樨草素>染料木素>芹菜素>大豆苷元;4种黄酮苷的吸收量的顺序为:木樨草苷>忍冬苷>黄芩苷>芦丁。结论:①酸性介质有利于9种黄酮类化合物在Caco-2细胞模型中的吸收,介质pH的改变对槲皮素在Caco-2细胞模型上吸收的影响最大,而对芹菜素、染料木素和大豆苷元的影响较小。②9种黄酮类化合物在Caco-2细胞模型上的吸收均为被动扩散。③黄酮苷元母核上的-OH数目及B-环的连接位置均对黄酮苷元的吸收有影响,而苷元糖苷化后,其连接糖的数目、种类及连接位置在黄酮苷的吸收中起主导作用。本实验中黄酮苷元的吸收均高于黄酮苷。

栀灯注射液中栀子苷、灯盏花素的大鼠药代动力学初步研究

目的建立大鼠血浆样品中栀子苷和灯盏花素的高效液相色谱检测方法,并研究栀灯注射液在大鼠体内的药代动力学特征,为其剂量设置提供依据。方法大鼠尾静脉注射栀灯注射液高、中、低3个剂量后检测不同时间血浆中栀子苷和灯盏花素的浓度,并估算药代动力学参数。结果所建立的测定方法对灯盏花素的线性范围为0.2-40μg/mL,对栀子苷的线性范围为0.5-200μg/mL,回收率大于85%,日内及日间RSD均小于10%。静注给予栀灯注射液后,灯盏花素和栀子苷的平均消除半衰期分别为21.6和72.6 min,分布容积分别为0.23-1.24和0.37-1.05 L/kg。结论建立的大鼠血浆中灯盏花素和栀子苷HPLC测定方法适合于药代动力学研究。

采用模式生物斑马鱼评价三种中药成分的急性毒性

目的:以模式生物斑马鱼为实验对象,观察3种中药有效成份雷公藤甲素、大黄素和苦参碱的急性毒性。方法:将药物添加到鱼只生活的水中为给药方式,观察给药后24h鱼只的死亡情况,以此为判断待测药物毒性大小的依据,并用B liss法计算各药物对斑马鱼的半数致死浓度(LC50)。结果:雷公藤甲素、苦参碱和大黄素对于斑马鱼的LC50值依次为5.02×10-3、113.2和1.18×103μg/mL,毒性大小顺序与文献报道基本一致。结论:以斑马鱼作为初步评价药物毒性的模型可用于中药成分毒性的快速筛选和评价。

两种筛选玄参中清除过氧亚硝基活性成分的在线检测方法比较研究

建立柱后HPLC-DAD-(Luminol-ONOO^-)-CL(方法 1)和柱前ONOO^--HPLC-DAD(方法 2)两种简单、快速在线检测清除ONOO^-的方法,将这两种方法应用于从玄参中筛选具有清除ONOO^-作用的活性物质,并结合HPLC-ESI-Q-TOF MS/MS对主要的活性成分进行鉴定。方法 1从玄参中共筛选出了P1(decaffeoylacteoside)、P9(acteoside)、I6(6″-O-feruloylharpagide)、P11(cis-acteoside)、P13(angoroside)等5个具有清除ONOO^-作用的活性成分,方法 2从玄参中筛选出了P9和P13两个具有清除ONOO^-作用的活性成分。两种筛选方法各具特点:方法 1需要的仪器系统较为复杂,操作简单检测灵敏度高;方法 2需要的仪器简单,操作相对方法 1繁琐且灵敏度低。但是筛选结果表明,方法 1和方法 2均可以从复杂体系中快速地筛选出具有清除ONOO^-作用的活性物质,这两种方法可以为中药复杂体系中天然ONOO^-清除剂的快速发现提供技术平台。

雷公藤甲素亚急性中毒对Wistar大鼠的肾脏毒性作用

目的:观察雷公藤甲素对Wistar大鼠的毒性及肾脏损伤作用,并初步探讨其机理。方法:大鼠灌胃雷公藤甲素0,200和300μg/kg 14 d,分别于给药0,7和14 d时测定大鼠体重。实验结束时取肾脏进行免疫组织化学和蛋白质印迹法(western blot)检测。结果:给药后动物体重呈现增长减慢以及下降现象,肾脏切片中死亡受体(Fas)及其配体(FasL)表达增加,肾脏细胞中细胞色素c由线粒体转移至胞浆。结论:雷公藤甲素可引起受试动物肾脏出现凋亡损伤。

中药鸡骨草的化学成分及其研究近况

中药鸡骨草(Abrus cantoniens Hance)为豆科相思子属植物,具有清热解毒,疏肝止痛之功效,是临床常用中药,亦是我国出口中草药品种之一。我国对这一中药资源的研究和开发工作已进行多年。根据文献报道,综述了近年来有关中药鸡骨草化学成分、药理药效和作用机制以及毒性方面的研究进展。

大黄酸的HPLC-荧光检测及其在人体药代动力学中的应用

建立大黄酸在健康志愿者血浆及尿粪中的HPLC-荧光检测方法(HPLC-FLD),色谱柱为Hypersil C18(25 cm×4.6 mm,2.5μm),流动相为甲醇-乙腈-1%冰醋酸(61∶15∶24),柱温为40℃,内标为1,8-二羟基蒽醌,检测激发波长为440 nm,发射波长为520 nm。在所建立的色谱条件下,大黄酸与各杂质分离良好,在血浆、尿、粪中线性范围分别为0.05～10.00μg/mL,0.10～25.00μg/mL,0.20～100.00μg/mL,最低定量限分别为0.05,0.10和0.20μg/mL。健康受试者单次口服200 mg大黄酸后,血药浓度-时间曲线呈二房室模型。主要药代动力学参数cmax,tmax,AUC0-∞,t1/2以及MRT分别为(16.0±3.4)μg/mL,(4.0±0.6)h,(152.7±45.7)μg.h/mL,(5.5±1.1)h以及(8.9±2.2)h;原药大黄酸在尿、粪中累积排泄分数分别为(8.19±1.84)%和11.00%。该法操作简便、灵敏,适用于对微量生物样品进行大批量测定。

LncRNA调控肝脏疾病中信号转导通路的研究进展

肝脏疾病的发病率逐年上升,由于肝脏疾病发病诱因复杂和发病机制尚未阐明,治愈率不够理想,迫切需要明确其作用机制以找到更有效的治疗靶点与药物。长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)作为一种长度超过200 nt的非编码RNA,是近年来肝脏疾病的研究热点。本文以肝脏疾病中主要的信号转导通路为主线,对近年来lncRNA调控肝脏疾病相关信号通路的最新研究进展进行归纳总结,详细阐述lncRNA通过调节肝脏疾病中关键的信号通路,参与细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移等多种生理过程,从而促进肝脏疾病的发生发展,为肝脏疾病的机制研究提供新的思路,为寻找治疗肝脏疾病的新靶点及生物标志物提供新的研究方向。

黄酮类化合物在调节肿瘤细胞周期阻滞中的作用及其机制研究进展

1引言黄酮类化合物（flavonoids）,又称生物类黄酮（bioflavonoids）,是一类广泛存在于蔬菜、水果、花和谷物中的多酚类天然色素,属植物次级代谢产物。类黄酮及其衍生物具有许多生物活性,包括调节血脂、消除氧自由基、抗氧化、抗炎、抗肿瘤、

中国华东汉族人群细胞色素酶CYP3A4新基因型的发现与序列分析

目的:探讨中国华东地区汉族人群细胞色素P4503A4基因的基因型差异。方法:采用RT-PCR与DNA测序技术相结合的方法对来自华东地区的6份汉族成人肝组织P4503A4基因的cD-NA进行了扩增与序列分析。结果:本研究从6份汉族人肝组织中首次检测到了一种新的基因型,该基因型存在三处氨基酸突变和一处核苷酸缺失,即第71位氨基酸发生V(GTG)→A(GCG)突变;第225位氨基酸发生V(GTC)→I(AIC)的突变;第393位氨基酸发生W(TGG)→V(GTG)突变;第671～673位核苷酸CAG发生缺失。结论:本研究首次发现中国华东地区汉族人群存在一种CYP3A4新基因型。

卵清蛋白致过敏性腹泻小鼠血清和胃组织中5-羟色胺系统的代谢分析

目的探讨卵清蛋白(OVA)致过敏性腹泻小鼠5-羟色胺(5-HT)信号系统的变化。方法 7~8周龄雌性BALB/c小鼠分为模型组、色甘酸钠处理组和对照组。模型组和色甘酸钠处理组分别在0 d和14 d,腹腔注射OVAⅠ(50μg/只)。28 d后,隔天对小鼠进行口服灌胃OVAⅡ(50 mg/只)激发(共8次)。色甘酸钠处理组从28 d开始,隔天(口服灌胃激发前)给予色甘酸钠(78.0 mg/kg)(共8次)。OVA口服灌胃后对小鼠进行综合评分、粪便评分及测定体温变化。43 d后,处死动物。摘眼球取血离心取血清并取胃组织。ELISA检测血清OVA特异性Ig E(OVA-SIg E)。液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)测定血清中的5-HT及其上下游代谢产物犬尿酸(KYN)、色氨酸(TRP)、5-羟色胺酸(5-HTP)和5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)含量,利用实时定量PCR检测过敏小鼠胃组织5-HT代谢相关基因色氨酸羟化酶1(TPH1)、吲哚胺-2,3-双加氧酶1(IDO1)、单胺氧化酶A(MAO-A)、5-HT选择性再摄取转运体(SERT)及其受体5-羟色胺1A受体(HTR1A)、HTR3A、5-羟色胺4受体(HTR4)的mRNA水平。结果 OVA致敏后,小鼠产生严重的过敏性腹泻,血清中的OVA-SIg E明显升高。血清中的KYN显著上升,5-HT、5-HIAA和5-HTP显著下降。胃组织IDO1及其受体HTR1A、HTR3A的mRNA水平增加,TPH1、MAO-A mRNA水平降低。给予色甘酸钠后综合评分、粪便评分、体温及OVA-SIg E明显降低,并且腹泻率也低于模型组,血清中的5-HIAA及胃组织中MAO-A mRNA水平升高,胃组织IDO1、5-HT1A、5-HT3A mRNA水平降低。结论 OVA致过敏性腹泻小鼠5-HT信号系统激活,给予色甘酸钠后,缓解过敏症状并使5-HT代谢相关产物、代谢基因和受体基因的表达发生改变。

金刚纂中木脂素对食管鳞癌细胞的抑制作用

金刚纂(Euphorbia neriifolia L.)是大戟科植物,采用硅胶柱色谱以及制备HPLC等多种色谱技术,从金刚纂地上部分中分离出5个已知的木脂素成分,并对这5种木脂素的潜在抗肿瘤活性进行体外研究,其中化合物2对食管鳞癌细胞,特别是KYSE-410和KYSE-450细胞,表现出增殖抑制和细胞毒性。机制研究进一步证明化合物2可通过激活caspase-3/9及下调Bcl-2/Bax蛋白表达比例,诱导癌细胞发生显著凋亡。实验结果显示,化合物2在体外对食管鳞癌细胞,尤其是KYSE-410细胞具有显著抑制作用,表明化合物2具有良好的抗肿瘤活性,应对其进行深入研究。