海洋放线菌WBF7的鉴定及其抗肿瘤代谢产物的初步研究

目的对海洋放线菌WBF7进行菌种鉴定,并对其抗肿瘤代谢产物进行初步研究。方法通过形态学观察、培养特征和生理生化特性检测、细胞壁组分以及16S rDNA基因序列分析,鉴定菌株;将其发酵液pH调至2、7或10后100℃加热处理1h,研究活性物质的稳定性;用石油醚、乙酸乙酯及其水饱和正丁醇对其发酵液依次进行萃取,研究活性物质的极性;通过MTT法对处理后样品进行抗肿瘤活性研究。结果通过菌种鉴定,将菌株WBF7归属为灰略红链霉菌(Streptomyces griseorubens);其抗肿瘤活性物质具有较强的酸碱稳定性和热稳定性,并且易于被乙酸乙酯萃取。结论海洋放线菌WBF7是第一次从海洋中分离得到的灰略红链霉菌,其抗肿瘤代谢产物稳定性好,大部分极性中等,具有较好的开发前景。

具有抗肿瘤活性的海洋链霉菌WBF7发酵条件的初步研究

目的对海洋链霉菌WBF7的发酵条件进行优化。提高抗肿瘤活性物质的产量。方法采用单因素实验、正交实验,应用MTT法,检测发酵液活性的变化．对其发酵条件进行优化。结果抗肿瘤活性代谢产物产生的最优发酵培养基确定为:蔗糖4％,马铃薯20％,酵母粉0.4％和氯化钙0.18％,陈海水,pH7.2。最佳发酵时间为7d。结论以最优发酵条件发酵WBF7,其发酵液的活性明显提高。

基因重组别藻蓝蛋白对小鼠S_(180)肉瘤的抑制作用

研究基因重组别藻蓝蛋白 (RAPC)的抑瘤作用 ,给皮下接种S180 瘤细胞的小鼠 ,每天分别ig及ipRAPC 13 4mg/kg ,6 7mg/kg和 3 4mg/kg ,共 10d ,第 11d处死小鼠 ,称瘤重和胸腺重 ,计数白细胞。结果表明 ,RAPC对小鼠S180 肉瘤有显著抑制作用 ,瘤重抑制率在 45 %～ 64 %之间 ,ig及ip均有效 ,对荷瘤小鼠的胸腺指数和白细胞数量无明显影响。

北极放线菌AFN2001培养基和发酵条件的优化实验

从北极王湾地区湖泊沉积物中分离出的菌株AFN2001,其代谢产物对金黄色葡萄球菌有明显的抑制作用,抑菌圈直径达23 mm,对大肠杆菌和绿脓杆菌没有抑制作用。为了确定AFN2001菌株发酵获得最多的活性物质,对单因素确定的营养因素淀粉、黄豆浸出物、蔗糖和NaNO3及另外的MgSO4、K2HPO3和水质进行7因素3水平正交优化实验。对结果进行直观分析及方差分析,发现NaNO3对发酵液活性的影响最大,其次依次为淀粉、K2HPO3、MgSO4、黄豆浸出物、蔗糖和水质对发酵液活性的影响;并找出产生活性物质的最佳组合。确定优化培养基(淀粉为10 g、蔗糖为10 g、黄豆浸出物为6 g、MgSO4为0.5 g和自来水为1 000 mL)和优化发酵条件(发酵温度为28℃、起始pH值为6.0和装液量为50%)。利用优化培养基和优化发酵条件发酵的菌株AFN2001,其发酵液的抑菌活性是基础培养基发酵液的1.6倍。

海洋放线菌WB-F5发酵液抗菌活性及活性物质分离纯化的研究

研究海洋放线菌WB-F5发酵液的抑菌活性,并分离纯化其抑菌作用物。通过琼脂打孔法测定WB-F5发酵液对各菌株的抑制活性。本实验选用大孔树脂吸附法、硅胶柱层析法等方法,分离纯化活性物质。WB-F5发酵液对金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、枯草杆菌等革兰氏阳性菌有较好的抑制作用,同时确定大孔吸附树脂AB-8和硅胶柱层析作为分离手段较为适宜,并且得到化合物WBF5-F,经结构解析证明其为5,7,4′-三羟基异黄酮,即染料木素。WB-F5是一株能产生高效抗菌活性物质的海洋放线菌,对WB-F5及其代谢产物进行研究,将有助于抗生素药物的开发研究。