中药川贝母定量分析方法研究

目的:研究常用中药川贝母的定量分析方法。方法:应用高效液相色谱法。以4种川贝母共有的有效成分贝母辛为指标;采用AgilentHypersilBDS C18(4. 0mm×2 5 0mm ,5 μm)色谱柱,以乙腈水 二乙胺(37∶6 3∶0 .0 3)为流动相,流速1 0mL·min-1;Alltech 2 0 0 0蒸发光散射检测器检测,外标两点法定量。结果:贝母辛在0 . 0 3188～1. 0 2 0mg·mL-1呈线性,回收率为10 2. 1% (n =5 ) ,RSD 3. 86 %。根据33批不同产地或来源的川贝母药材中贝母辛的含量结果,确定贝母辛的含量限度为0 . 0 0 70 %。结论:本法为良好的贝母辛的定量分析方法,可用于川贝母药材的质量控制。

固定化脂质体色谱研究中药复方的细胞膜通透性成分及其质量控制

提出了固定化脂质体色谱(immobilizedliposomechromatography,ILC)研究中药复方的细胞膜通透性成分及其质量控制的方法。以当归补血汤及其组分为例,考察了它们在ILC色谱柱上的分离效果;当归补血汤水提取液和75%乙醇提取液在ILC色谱柱上各有8个保留峰,当归水提取液、甲醇提取液和75%乙醇提取液在ILC色谱柱上分别有3、6、9个保留峰,黄芪水提取液、甲醇提取液和75%乙醇提取液在ILC色谱柱上各有7个保留峰;建立了当归补血汤及其组分中阿魏酸和蒿本内酯的定量分析方法,当归补血汤水提取液和75%乙醇提取液中阿魏酸的含量分别为0.0743%和0.0688%,蒿本内酯的含量分别为0.0472%和0.457%,当归水提取液和75%乙醇提取液中阿魏酸的含量分别为00694%和0.0691%,蒿本内酯的含量分别为00781%和0.455%。

HPLC法同时测定金银花中8种黄酮的含量(英文)

目的 建立同时测定金银花不同种(忍冬、山银花、红腺忍冬、灰毡毛忍冬、细毡毛忍冬)中芦丁、金丝桃苷、木犀草素7 O β D 半乳糖苷、忍冬苷、苜蓿苷、金圣草素 7 O 新橙皮糖苷、苜蓿素 7 O 新橙皮糖苷、槲皮素8种黄 酮的HPLC分析方法。方法 色谱柱为AglientZorbax80A,Extend C18(250mm×4.6mmID,5μm)。梯度洗脱,流动 相A为1.2%THF,0.5%HAc;B为甲醇 乙腈(40∶60)。流速1.0mL·min-1,检测波长355nm。结果 线性范围内 8个黄酮化合物的标准曲线呈良好的线性关系,平均加样回收率均在97%-102%。所有化合物的精密度和重复性 的RSD均<3%,定量限(S/N=10)低于6.0ng。结论 该分析方法简单、灵敏、准确、重复性好,可同时分析金银花 中的黄酮类成分。

透析-高效液相色谱法在当归补血汤药效物质基础研究中的应用

将脂质体作为模拟生物膜,采用平衡透析与液相色谱联用技术,建立了一种研究中药成分与模拟生物具有相互作用的新方法。应用该方法对当归补血汤进行了分析,同时考察了模拟生物膜的浓度、pH值、缓冲系统和胆固醇的加入等因素对当归补血汤与模拟生物膜相互作用的影响。结果表明:当归补血汤中有7个组分与模拟生物膜相互作用明显;模拟生物膜的浓度影响最大,pH值对酸性组分阿魏酸的作用影响较大,其它因素的影响较小。该方法可用于预测药物在体内的吸收情况,进而研究中草药及复方的药效物质基础。

灰毡毛忍冬花蕾中的化学成分

目的:对灰毡毛忍冬花蕾的化学成分进行研究。方法:应用溶剂萃取及柱层析方法进行化学成分分离、纯化,并利用各种光谱技术分析鉴定结构。结果:从灰毡毛忍冬花蕾中分离得到11个化合物,其中3个绿原酸类成分、4个黄酮类成分、4个其他成分,分别为:1O咖啡酰基奎宁酸(Ⅰ),4O咖啡酰基奎宁酸(Ⅱ),5O咖啡酰基奎宁酸丁酯(Ⅲ),槲皮素(Ⅳ),苜蓿素7OβD葡萄糖苷(Ⅴ),槲皮素3OβD葡萄糖苷(Ⅵ),木犀草素7OβD半乳糖苷(Ⅶ),肌醇(Ⅷ),β谷甾醇(Ⅸ),正十九烷醇(Ⅹ),葡萄糖(Ⅺ)。结论:化合物Ⅰ、Ⅱ为首次从忍冬属植物中分离得到,化合物Ⅲ～Ⅺ为首次从该种植物中分离得到。

酶联免疫法测定知母中菝葜皂苷元的含量

应用菝葜皂苷元多克隆抗体建立检测知母中菝葜皂苷元含量的酶联免疫分析方法,结果显示其检测线性范围为20～1311ng/mL,最低检出浓度为20ng/mL。样品加样回收率为92.2%～97.1%,日内日间RSD均小于14.3%。以所建立的方法检测5个产地知母中菝葜皂苷元的含量,检测结果与HPLC-ELSD分析结果一致。本实验建立的菝葜皂苷元免疫分析方法具有简便、灵敏、快速的特点,可简化中药复杂体系中单一成分的含量测定。

UPLC-UV法测定不同产地青蒿中青蒿素的含量

目的:建立快速简便检测青蒿素的超高效液相-紫外(UPLC-UV)法,并对不同产地青蒿中青蒿素的含量进行检测。方法:色谱柱Agilent Eclipse Plus C18(2.1 mm×50 mm,1.8μm),流动相乙腈/水(45/55),流速1.0mL/min,柱温28℃,波长200 nm。结果:该方法对青蒿素的分离度较好,保留时间缩短为1.5 min。并且,整个分析过程可以在2 min内完成。线性范围0.101 17～10.117μg,进样量与峰面积线性相关,A=109.4C+6.7026,R2=0.9 993(n=9),加样回收率为99.3%(RSD=2.6%,n=6)。结论:UPLC-UV法分析时间短、样品前处理简单、精密度、稳定性、加样回收率等符合分析检测要求,对于青蒿中青蒿素的含量能进行快速准确的分析。

葛根芩连配方颗粒标志性成分含量分析及指纹图谱研究

采用反相高效液栩色谱法-二极管阵列检测器，以甲醇-水（内含1％三乙胺、1％乙酸，用磷酸调pH至3）为流动相，对中药复方制剂葛根芩连配方颗粒中3种主要标志性成分的含量同时分析测定，并采用相同的流动相对其指纹图谱进行研究。实验结果显示，3种主要标志性成分葛根素、黄芩苷和小檗碱在含量分析测定条件下，各组分分离良好，相关系数均为0．9999，线性范围分别为0．042～1．05、0．13～3．25和0．060～1．50μg，加样回收率在95％～106％之间；在指纹图谱研究中，以黄芩苷为参照物峰，标定了32个共有峰，分析的11批葛根芩连配方颗粒与共有模式之间具有良好的相似性，相似度均在0．9以上。建立的含量测定及指纹图谱分析方法灵敏度高、专属性强，可用于葛根芩连配方颗粒的质量控制。

固定化脂质体色谱与动物小肠吸收模型的相关性研究方法及其应用

固定化脂质体色谱(ILC)是一种新颖的筛选经被动吸收药物的技术,建立了ILC与常用的动物小肠吸收模型的相关性研究方法,考察了当归补血汤在ILC上有保留的成分的保留值与其在大鼠在体和离体小肠吸收模型中被吸收值的相关性。结果显示, 当归补血汤在ILC上有保留成分的保留值与其通过大鼠在体小肠灌流和离体小肠实验测得的吸收值具有很好的相关性,其相关系数分别为 0. 9356和 0. 9350;当归补血汤在ILC上有保留的成分主要以被动扩散的方式被机体吸收。

霍山地区4种石斛属植物的遗传多态性分析

利用AP-PCR方法对4种霍山来源的石斛属植物基因组DNA进行了多态性分析,从75种随机引物中筛选出10种扩增条带清晰、稳定的随机引物,通过PCR扩增共获得250条DNA片段,其中呈多态性的片段数为165条,占扩增条带数的66%,显示了霍山来源的石斛植物具有较高的遗传多态性;利用NT-syspc分析软件对不同石斛品种间的平均遗传距离进行了分析,并利用UPGMA聚类分析方法构建它们的亲缘关系聚类图,结果表明4种霍山来源的石斛品种具有较近的亲缘关系,它们之间的平均遗传相似系数为0.63,其中铁皮石斛和铜皮石斛的亲缘关系最近,两者间的遗传相似系数为0.78,它们与串珠石斛的遗传相似系数分别为0.6和0.61,与霍山石斛的遗传相似系数分别为0.63和0.58;但是,相对于形态接近的铜皮石斛,铁皮石斛与霍山石斛的亲缘关系更近。

固定化脂质体色谱研究二至丸及其组成药物的经肠吸收成分

目的:应用固定化脂质体色谱(ILC)分析中药复方二至丸及其组成药物的经肠吸收成分及质量控制。方法:分别观察不同溶剂提取时提取液在ILC色谱柱上的色谱保留与分离,同时对在ILC色谱柱上保留的槲皮素及芹菜素进行了定量分析。结果:从ILC色谱柱保留峰的数目和峰面积两方面观察,墨旱莲的75%乙醇提取优于水提取。二至丸75%乙醇提取液中槲皮素的含量为9.6μg.g-1,芹菜素的含量为2.7μg.g-1。墨旱莲提取液中槲皮素的含量为2.8μg.g-1,芹菜素的含量为3.8μg.g-1。女贞子提取液中槲皮素的含量为9.1μg.g-1,而芹菜素用ILC未检测到。结论:槲皮素和芹菜素是二至丸中主要的可在ILC色谱上保留的成分,其中槲皮素来源于两个组成药物女贞子和墨旱莲,芹菜素仅来源于墨旱莲。槲皮素和芹菜素可能是二至丸的经肠吸收活性成分。固定化脂质体色谱有望成为中药及其复方肠吸收成分的初筛选和定量评价方法之一。

魔鬼爪化学成分的研究

目的 研究魔鬼爪中的化学成分。方法 运用各种色谱方法进行化学成分的分离纯化，用理化方法解析其化学结构。结果 从该植物块茎中分得9个化舍物，其中1—5为苯乙醇苷类化合物，6为三萜皂苷，结构分别被鉴定为martynoside（1），6．acetylacteoside（2），β-（3′，4′-dihydroxyphenyl）ethyl-O-α—L—rhanmopyranosyl（1→3）-′-D-glucopyranoside（3），acteoside（4）＋isocteoside（5），7α，23-dihydroxytormentic acid ester glucoside（6），阿魏酸乙酯（7），二十五酸（8）及β-胡萝卜苷（9）。结论化舍物1，6，7，8均为从该植物中首次分离得到。

非洲植物药魔鬼爪的化学成分

目的:对胡麻科Harpagophytum属植物H.procumbens D.C.的化学成分进行研究。方法:运用各种色谱方法进行化学成分的分离纯化,用理化方法及波谱手段解析其化学结构。结果:从该植物块茎中分得10个化合物,分别鉴定为nigaichigoside F1(1),nigaichigoside F2(2),Chebuloside Ⅱ(3),7α-羟基-β-谷甾醇(4),7β-羟基-β-谷甾醇(5),pagoside(6),procumboside(7),β-谷甾醇(8),反式桂皮酸(9)和果糖(10)。结论:化合物1～5为从该植物中首次分离得到。

续断药材的HPLC指纹图谱研究

目的:建立续断药材的HPLC指纹图谱,为续断药材质量控制提供有效方法。方法:采用HPLC测定10个不同产地的续断药材,制定指纹图谱。色谱柱为SinoChrom ODS-BP(250mm×4.60mm,5μm);流动相:乙腈-0.05%磷酸水线性梯度洗脱;流速:1.0mL.min-1;检测波长:220nm;进样量:20μL;柱温:25℃。结果:10个不同产地续断药材的指纹图谱相似度较高,有18个共有峰,各共有峰之间的分离度较好。结论:不同产地续断的化学组成存在一定差异,固定产地来源对保障续断药材质量的稳定性极为重要。续断药材的指纹图谱特征性及专属性强,可用于续断药材的鉴别和质量控制。

连云港沿海5种贝类生物的遗传多样性分析

利用随机引物多聚酶链式反应(AP-PCR)技术对来自江苏省连云港海区5种重要的水产贝类(文蛤、青蛤、杂色蛤仔、四角蛤蜊和缢蛏)的遗传多样性进行了分析。由选取的28条随机引物共扩增出482个DNA片段,遗传多态性高达100%,而帘蛤科内的3种贝类的遗传多态性平均为91%。利用NTSYSpc生物学软件计算出5种贝类种间的遗传相似系数和相对遗传距离,聚类分析(UPGAM)结果表明:5种贝类在系统进化上的关系较远,它们可聚类为3组,它们的平均遗传相似系数为0.520,其中Ⅰ组有文蛤和青蛤,组内遗传相似系数为0.570;Ⅱ组有四角蛤蜊,它与Ⅰ组的遗传相似系数为0.561;Ⅲ组有杂色蛤仔和缢蛏,组内的遗传相似系数为0.544。

金银花nrDNA ITS区聚合酶链反应条件的研究

目的 :金银花nrDNAITS区序列G +C含量为 6 8% ,用常规的PCR方法扩增效果差。本研究通过改变扩增程序及使用改性剂的方法显著提高了金银花nrDNAITS区的扩增效率。方法 :分别从金银花叶及药材中提取总DNA ,通过优化扩增条件 ,对nrDNAITS区进行扩增 ,并比较了两种优化方法的差别及适应性。方法 1:提高变性温度至 97℃ ;方法 2 :添加混合改性剂 (DMSO 4 % 甘油 10 % )。结果 :与方法 1相比 ,方法 2可降低变性温度 5℃ ,升高退火温度 9℃ ,降低镁离子浓度至 0 .5mmol/L ,降低TaqDNA聚合酶用量至 0 .1U(30 μl体系 ) ,PCR产物量显著提高 ,且可消除植物DNA粗提物中杂质的干扰。结论 :通过提高退火温度及添加改性剂可克服高G +C含量金银花nrDNAITS区序列扩增的困难 ,该方法的建立有助于解决植物来源DNA模板的PCR扩增问题。

五种海桑属植物的遗传多样性分析

利用AP-PCR技术对来自于海南东寨港红树林自然保护区的5种海桑属植物的遗传多态性进行了分析。由选用的46条随机引物共扩增出908个DNA片段,其中有403个DNA片段分别为不同种海桑所特有的,占总扩增条带数的44.4%,呈现出较高的多态性,它们是海桑属植物不同种间潜在的分子标记。以NT- SYSpc分析软件对这5种海桑属植物进行了聚类分析,结果表明:5种海桑属植物可聚类为3个组,其中Ⅰ组有海桑和拟海桑,Ⅱ组有无瓣海桑和海南海桑,Ⅲ组仅包括卵叶海桑一种,与传统的植物分类学研究结果略有不同,其原因有待进一步认识。

生地黄化学成分研究

用硅胶柱色谱及重结晶等方法并根据理化性质和光谱数据从生地黄中分离鉴定了7个化合物,分别为豆甾醇、十七烷酸、2 [ 4-’hydroxyphenyl] -ethylhexacosanoate、rehmapicrogenin、阿魏酸、胡萝卜苷、8 表番木鳖酸。其中2[4’- hydroxyphenyl]- ethylhexacosanoate、rehmapicrogenin、阿魏酸、8 表番木鳖酸为首次从生地黄中分得。

怀牛膝HPLC指纹图谱研究

目的:建立怀牛膝药材的HPLC指纹图谱。方法:采用HPLC法测定10个不同产地的怀牛膝药材,制定指纹图谱。色谱柱为C18,流动相为乙腈-水梯度洗脱,流速为1.0mL/min,检测波长为250nm,进样量为20μL,柱温为30℃。结果:得到分离度、重现性均较好的怀牛膝药材HPLC/UV指纹图谱,得到15个共有峰。结论:该方法简便、可靠、重现性好,可用于怀牛膝的质量控制。

虎杖醇提物抗氧化及抑制多酚氧化酶作用研究

探讨了虎杖醇提物抗氧化及抑制多酚氧化酶的活性.采用70%乙醇水溶液提取虎杖中的有效成分,以化学发光法测定提取物对超氧阴离子自由基(O2.-)、羟自由基(.OH)、过氧化氢(H2O2)的清除作用;以左旋多巴为底物测定其抑制多酚氧化酶的活性.结果表明:虎杖醇提物对超氧阴离子自由基、羟自由基和过氧化氢均具有良好的清除作用,IC50值分别为0.82 mg/mL、0.39 mg/mL和0.008 9 mg/mL,均优于对照品Vc乙基醚;对多酚氧化酶活性抑制作用与浓度呈量效关系,IC50为0.14 mg/mL,优于对照品熊果苷.