药物设计中的生物核磁共振技术

核磁共振技术在方法学和硬件上的迅速发展 ,使其成为化学和结构生物学中最重要的波谱技术。特别是生物核磁共振技术在药物研发过程中 ,提供从药物设计结构信息到基于NMR技术进行配体的筛选的广泛应用 ,使得生物核磁共振技术在药物研究领域地位不断加强 ,成为药物研究的基础工具。

天然多糖免疫细胞受体的研究进展

天然多糖的抗肿瘤活性主要集中在对免疫系统的调节作用上,而对天然多糖的免疫细胞受体的研究将有助于阐明其免疫调节机制,本文综述了目前天然多糖免疫细胞的受体研究方法及其受体。

用于治疗葡萄膜炎的单克隆抗体

单克隆抗体在自身免疫性疾病的治疗中有着重要的作用,它通过封闭与病程有关的淋巴细胞、细胞因子和细胞因子受体起到治疗作用,简述几类以葡萄膜炎疾病相关因子为靶点的单克隆抗体及其在治疗葡萄膜炎等自身免疫疾病方面的应用。并对单克隆抗体治疗中可能的并发症进行了探讨。

肝素结构与抗人肾小球系膜细胞增殖活性的关系(英文)

目的:考察肝素结构中影响抗人系膜细胞增殖活性的因素,如不同位点的硫酸基团,羧基、肝素的主链结构以及相对分子质量大小。方法:采用化学修饰的方法,分别制备2,3-O-脱硫酸化,6-O-脱硫酸化肝素,N-脱硫酸化肝素、高碘酸钠氧化-硼氢化钠还原肝素、多硫酸化肝素。APTT比较肝素衍生物的抗凝活性,MTT法比较这些肝素衍生物对血清引起人肾小球系膜细胞增殖的抑制作用。结果和结论:2,3-O-硫酸基团相对于6-O-硫酸基团、N-硫酸基团来说对抗血清引起的人肾小球系膜细胞增殖活性影响更大,硫酸基团的含量以及羧基影响抗增殖活性,但不是决定性的因素。肝素抗增殖活性同样不依赖于肝素主链结构的完整性、抗凝活性;当肝素相对分子质量大于4.5kD时,其抗增殖活性同样不依赖于其相对分子质量大小。

重组人瑞替普酶基因在山羊胎儿成纤维细胞β-酪蛋白基因座的定点整合

目的 :利用体细胞基因打靶技术来获得定点整合有重组人瑞替普酶 (rPA)的山羊胎儿成纤维细胞株。方法 :构建了针对山羊 β- 酪蛋白基因座的定点打靶载体 ,其上游同源臂为 β 酪蛋白启动子端同时包含其信号肽编码区长约 6 .1kb的基因组片段 ,下游同源臂为 3.3kb从 β- 酪蛋白外显子 6至外显子 9的基因组片段。rPA小基因起始密码子位于 β- 酪蛋白信号肽编码区下游。将载体瞬时转染C12 7小鼠乳腺癌细胞 ,并通过激素进行诱导 ,酶联免疫吸附分析 (ELISA)检测细胞培养上清中的rPA表达量来验证载体表达功能。将载体通过电穿孔的方法转染同基因型的山羊胎儿成纤维细胞。利用G4 18和GANC进行药物筛选 ,并通过PCR和southern杂交的方法进行基因组DNA检测。结果 :获得了一株定点整合的细胞克隆 ,绝对基因打靶效率为 2× 10 7。结论 :本实验结果为后续利用核移植技术制备乳腺生物反应器提供了坚实的实验基础。

新型截短侧耳素衍生物的合成及抗菌活性研究

通过将含氮杂环与WL001的2-氨基噻唑侧链相连,设计合成了一系列新的截短侧耳素衍生物。用革兰阳性和革兰阴性菌对该系列化合物进行体外抗菌活性测定,合成的大多数化合物不仅在药物敏感菌株中表现出抗菌活性,而且在耐药菌株中也有相同效果。特别值得注意的是具有饱和氮杂环的化合物表现出显著的抗菌活性（0.062 5～8μg·m L-1）,优于或类似于阿莫西林、泰妙菌素和左氧氟沙星。此外,15a和15b含有哌啶或吗啉的化合物同样能够有效的抑制革兰阴性菌。本研究为相关截短侧耳素衍生物的设计提供了一个新视野,为进一步研究治疗耐药性致病菌奠定了基础。

南极海洋产耐有机溶剂变性剂氧化剂蛋白酶链霉菌菌株XE-1的初步鉴定及酶学性质(英文)

【目的】从南极海泥土壤中分离得到一株高产蛋白酶的放线菌(XE-1),对所产蛋白酶进行纯化以得到具有特殊性质的酶产物。【方法】通过对XE-1的生理生化和16S rRNA基因序列分析,初步将其确定为灰红链霉菌的变种。利用乙醇沉淀、离子交换、凝胶等方法纯化后,利用冻干浓缩获得其胞外蛋白酶,用SDSPAGE测定分子量并进行性质表征。【结果】得到一种对高浓度的有机溶剂、变性剂、氧化剂耐受的,表观分子量为14kDa的碱性丝氨酸蛋白酶,进一步分析,其最适pH 8.2,温度为55℃,米氏常数Km和Vmax分别为1.9mg/mL和973 u/mL。此蛋白酶活性于25%的有机溶剂为50%-180%的初始活性;在不同浓度的氧化剂中为110%-140%的初始活性,在0.2 mol/L到4 mol/L的变性剂中表现为100%-150%的初始活性。【结论】从南极海洋链霉菌XE-1中分离得到一种耐有机溶剂、变性剂、氧化剂,大小约为14kDa碱性蛋白酶,其特殊的酶学性质可用于工业生产或药学等领域。