“三明治”教学法在药物代谢动力学教学中的应用

本论文将"三明治"教学法理论运用于药物代谢动力学的小班教学中,为未来的小班教学改革探索新的方向。经过教学实践,发现课堂效率明显提高,学生乐于接受"三明治"教学法,调动了学习积极性,锻炼了独立学习能力和合作学习能力。

中药注射剂药物代谢动力学研究现状

中药注射剂的安全性问题正受到越来越多的关注。药代动力学研究是揭示中药注射剂效应物质基础及其体内过程的重要途径,对于临床合理用药、提高中药注射液质量控制标准与临床用药的有效性、安全性具有十分重要的意义。本文简要分析了中药注射剂药物代谢动力学研究相关进展,指出对中药注射液药代动力学的重视程度尚有待提高。随着近年来中药药代动力学研究技术方法的进步,已逐步具备条件开展中药注射液的体内过程研究,中药注射液的质量控制、安全性评价、工艺优化以及临床合理用药研究等方面应充分利用和结合中药注射液体内过程的研究结果,以保障和提高中药注射液临床用药的有效性与安全性。

三维细胞模型在抗肿瘤药物早期药代动力学筛选中的应用进展

肿瘤治疗是近年来药物研发的热点,但肿瘤仍是全球致死率最高的疾病之一。造成这一现象的主要原因之一在于药物的PK/PD行为不佳,临床转化失败率极高。因此,完善药物临床前的动力学评价体系十分必要。由于在体动物模型的评价体系无法解释大量靶点在细胞内的抗肿瘤药物的动力学特征;单层细胞模型作为主流的体外评价模式,与实体瘤内的真实情况相差甚远。因此,亟需建立一种新的评价体系。三维细胞模型与传统的二维单层细胞相比,能够更真实地模拟实体瘤的生理状态及微环境,可以基于类组织水平、细胞水平、亚细胞水平全面评价药物的动力学行为,弥补了体内外研究的不足。本综述将基于以下两个方面对三维细胞及其在药代动力学中的应用进行全面的介绍:(1)三维细胞的培养方法及其与在体肿瘤组织的相似性;(2)三维细胞在抗肿瘤药物的药代动力学评价中的优势及应用。

达立通浸膏中延胡索乙素、川陈皮素和木香烃内酯在大鼠体内的药代动力学及组织分布研究

目的:研究达立通浸膏给药后大鼠体内主要药物成分及药代动力学特点。方法:建立同时检测延胡索乙素、川陈皮素和木香烃内酯的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)方法,应用于测定大鼠血浆和组织中药物浓度及药代动力学特征。结果:建立了同时定量测定延胡索乙素、川陈皮素和木香烃内酯方法,单次灌胃给予达立通浸膏后,延胡索乙素、川陈皮素和木香烃内酯可以快速吸收进入体内,在血中峰浓度(C_(max))分别为(13.73±7.50)、(27.01±17.69)、(66.73±29.94)ng/mL,曲线下面积(AUC_(0-t))分别为(80.43±40.03)、(41.30±28.69)、(303.90±136.69)ng·h·mL^(-1),消除半衰期(t_(1/2))分别为(5.82±2.22)、(1.08±0.01)、(4.95±2.53)h。多次给药能明显增加各物质体内暴露水平。各成分在大鼠的主要组织/器官中广泛分布,在胃肠道中暴露水平最高,其次是肝和肾。各成分存在明显的雌雄差异,在雌性大鼠中的暴露量(C_(max)和AUC)均显著高于雄性大鼠(P<0.05)。结论:UPLC-MS/MS测定延胡索乙素、川陈皮素和木香烃内酯的方法准确、灵敏、可靠。达立通浸膏中延胡索乙素、川陈皮素和木香烃内酯可吸收进入血液、广泛分布于体内组织、器官、较快代谢/消除,为达立通浸膏潜在的体内药代标记物。

临床前药物代谢动力学关键技术与研究体系

临床前药物代谢动力学研究在创新药物研发中占有十分重要的作用,贯穿于创新药物研发的每一环节。我国临床前药物代谢动力学研究水平在"九五"以前相当落后,本课题组在国家自然科学基金、国家高技术研究发展计划("八六三"计划)、国家重点基础研究发展计划("九七三"计划)及江苏省药物代谢动力学重点实验室建设等多项课题的资助下,围绕我国药物代谢动力学研究的薄弱环节和亟待解决的关键问题,通过近十年的创新攻关研究,解决了生物样品中微量/痕量药物高灵敏度、快速定量分析,体内外吸收、分布、代谢与排泄特性快速筛选与评价等11项关键技术,建立了较为完善的先导/候选化合物快速筛选体系、创新药物体内外临床前药物代谢动力学评价体系以及中药整体药物代谢动力学研究体系,项目研究成果对促进我国药物代谢动力学水平的整体提高、推动创新药物研发与中药现代化研究进程具有重要意义。

痰热清注射液的清热作用及其主要活性成分在LPS诱导发热大鼠中的药物动力学研究

目的 研究痰热清注射液的清热作用及其主要活性成分在发热大鼠体内的药物动力学变化。方法 SD大鼠随机分成4组,分别为正常对照组、发热模型对照组、正常给药组、发热模型给药组。发热模型对照组和发热模型给药组腹腔注射LPS 100μg·kg^-1造模,正常对照组和正常给药组同时给予同剂量生理盐水。所有大鼠30 min后尾静脉给5 mL·kg^-1痰热清注射液,于给药后8 h内每0.5 h测1次体温,给药后不同时间取血浆,同时从血浆中提取3种成分,LC-UV法测定黄芩苷（BG）的浓度,LC-MS法测定熊去氧胆酸（UDCA）和鹅去氧胆酸（CDCA）的浓度。采用WinNonlin 6.3计算药动学参数。结果 痰热清注射液对LPS诱导发热大鼠有显著降温作用,能使发热大鼠体温降至与正常大鼠体温接近,并且在给药后5～8 h血药浓度较低时仍有较好的降温作用。发热模型大鼠和正常大鼠iv 5 mL·kg^-1痰热清后估算BG的半衰期分别为（41.42±7.65）和（50.32±19.10）min,AUC0～τ分别为（2 411.95±523.80）和（2 187.74±447.14）μg min.mL-1,估算UDCA的半衰期分别为（60.22±14.97）和（71.85±18.82）min,AUC0～τ分别为（1 687.59±319.65）和（1 581.38±101.48）μg min·mL^-1,AUC0～∞分别为（1 754.39±311.16）和（1 659.51±110.23）μg min·mL^-1,估算CDCA的半衰期分别为（96.47±25.04）和（94.35±27.41）min,AUC0～τ分别为（407.35±87.29）和（356.89±39.16）μg min·mL^-1,结果表明发热模型大鼠和正常大鼠iv 5 mL·kg^-1痰热清后BG、UDCA和CDCA的药物动力学行为相似。结论 痰热清注射液对LPS诱导发热大鼠有显著降温作用,发热状态下大鼠静脉注射痰热清注射液不影响其主要活性成分BG、UDCA和CDCA的药物动力学行为。

LC-MS法测定Beagle犬血浆中人参皂苷20(R)-Rh_2及其药代动力学研究

目的：建立测定人参皂苷20（R）-Rh2血浆药物浓度的液相色谱．电喷雾离子化．质谱联用的分析方法（LC-ESI-MS），探讨其在Beagle犬体内的药代动力学研究中的应用。方法：Beagle犬6只，随机分为2组，采用单剂量双周期自身交叉设计，分别给犬单剂量静注（0．1mg·kg^-1）或灌胃（1mg·kg^-1）20（R）-Rh2，用LC-MS法测定给药后的血浆中药物浓度，计算其药代动力学参数，以及在Beagle犬体内的绝对生物利用度。结果：20（R）．Rh2在0.5～200ng·ml^-1浓度范围内线性关系良好（r^2=0．9998），样品在血浆中的提取回收率大于70％，批内和批间的RSD均小于15％，静注后主要药代动力学参数T1/2，CL，AUC 0-∞ 分别为8．0±2．8h、0．1±0．03L·kg^-1·h、857．0±209．6ng·h·ml^-1；口服后主要药代动力学参数Tmax，Cmax，T1-2，AUC0-∞分别为2．6±1．3h、371．0±199．6ng·ml^-1。、5．8±2．6h、1215．7±598．6ng·h·ml^-1。绝对生物利用度为（16．1±11．3）％。结论：该法专属性强，灵敏度高，可用于20（R）-Rh2的体内定量分析。人参皂苷20（R）-Rh2在Beagle犬体内的绝对生物利用度较低。

五味子醇甲在大鼠肝微粒体内的代谢动力学和性别差异

体外研究五味子醇甲(schizandrin,SZ)在大鼠肝微粒体内的代谢动力学和性别差异。制备正常雌、雄大鼠肝微粒体,与SZ共同温孵,以高效液相色谱法测定SZ及其代谢产物。SZ在雄鼠肝微粒体内代谢反应的最大速率Vmax、米氏常数Km和清除率Clint分别为(21.88±2.30)μmol·L-1.min-1·mg-1(protein),(389.00±46.26)μmol·L-1和(0.0563±0.0007)min·mg-1(protein);在雌鼠肝微粒体内代谢反应的最大速率Vmax、米氏常数Km和清除率Clint分别为(0.61±0.07)μmol·L-1·min-1.mg-1(protein),(72.64±13.61)μmol·L-1和(0.0084±0.0008)min·mg-1(protein),雌、雄鼠肝微粒体内SZ的主要代谢物不同,分别为7,8-顺二羟基五味子醇甲(M1)和7,8-顺二羟基-2-去甲基五味子醇甲(M2b)。酮康唑、奎尼丁和奥芬得林对SZ的在雌、雄大鼠肝微粒体内代谢均有不同程度的抑制作用,西咪替丁对其在雄鼠肝微粒体内的代谢也有一定的抑制作用。SZ在雌、雄大鼠肝微粒体中代谢动力学及代谢产物存在明显的性别差异,这种差异可能主要是由CYP3A和CYP2C11在大鼠肝微粒体内的性别差异引起的。

西嗪伪麻缓释胶囊中盐酸伪麻黄碱在犬血浆中LC-MS法测定及其药代动力学

目的建立LCMS法测定犬血浆中盐酸伪麻黄碱浓度,以缓释成分盐酸伪麻黄碱为指标,观察犬单剂量ig西嗪伪麻缓释胶囊后血药浓度经时过程,估算相应的药代动力学参数。方法血浆中加入内标苯丙醇胺,碱化后用乙醚提取,采用选择性离子检测方法测定其血药浓度。色谱柱为ShimpackODS(50μm,250mm×20mmID),流动相为超纯水(内含02%醋酸+0005mmol/L醋酸铵溶液)乙腈(80∶20,v/v),流速02ml/min,柱温40℃。Beagle犬给药采用双交叉实验设计,剂量为120mg。结果盐酸伪麻黄碱线性范围0016～200μg/ml;最低检测浓度为0016μg/ml,方法回收率大于90%,日内日间变异均小于10%。Beagle犬单剂量ig西嗪伪麻缓释胶囊后,测得盐酸伪麻黄碱cmax为(071±016)μg/ml,tmax为(23±08)h,t1/2为(715±108)h,MRT为(1136±154)h,AUC0τ为(586±093)μg·h/ml。以扑尔伪麻片为对照,西嗪伪麻缓释胶囊相对生物利用度为(963±109)%,两制剂经方差分析显示tmax和cmax有显著差异。西嗪伪麻缓释胶囊具有一定的缓释特征。结论本方法专属性强,准确性好,可用于盐酸伪麻黄碱血药浓度测定和药代动力学研究。

有机阴离子转运肽在药代动力学中的作用

近年来,药物转运体在药物的吸收及代谢过程中发挥着重要的作用。有机阴离子转运肽(organic anion transporting polypeptides,OATPs)家族作为摄取转运体中的一员,由于其在肝、肠、肾等重要组织中的表达而影响着临床药物的药代动力学,尤其是OATP1B1,OATP1B3和OATP2B1。同时,众多临床药物被认为是OATP的底物药物(例如许多他汀类药物是OATP1B1的底物)。一些药物可能抑制OATP而导致药物相互作用(例如环孢素A)。此外,由OATP介导的基因多态性也导致了某些药物显著的个体差异。本文重点评述OATP家族不同成员在人体内的表达及其底物、OATP基因多态性、OATP介导的药物相互作用及其在临床药物的药动学与药效学中的作用。

光动力药物血卟啉单甲醚HPLC-荧光检测法的建立及其药代动力学研究

目的建立测定血浆中血卟啉单甲醚(HMME)的HPLC-荧光检测法,并用以进行HMME在犬体内的药代动力学研究.方法血浆中的HMME采用乙酸乙酯液-液萃取,荧光素为内标.选用C18柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),0.02 mol/L 醋酸钠(用冰醋酸调pH 6.0)-四氢呋喃(60∶40)组成为流动相,荧光检测器激发波长为 395 nm,发射波长为 613 nm.结果 HMME血药浓度的范围为0.025～5.000 μg/mL,采用两条标准曲线定量的方法,两条标准曲线的线性范围分别为:0.025～0.500 μg/ml(r=0.9973)和0.25～5.00 μg/ml(r=0.9999),提取回收率92.1%～99.2%,日内、日间RSD分别为3.3%～8.4%和3.8%～8.5%. 静脉给药后,HMME在犬体内的药代动力学符合开放二房室模型.其主要药代动力学参数:T1/2α(分布半衰期) =(0.18±0.16)h,T1/2β(消除半衰期) =(14.24±3.41)h, Vd(中央室表观分布容积)=(6.37±3.70)L/g,CL(清除率) =(0.31±0.17)L·kg-1·L-1,AUC(0-tn)(血药浓度-时间曲线下面积)=(27.40±11.72)mg·h-1L·-1.结论 HPLC-荧光检测法准确、灵敏,适用于HMME药代动力学研究.HMME在犬体内的药代动力学过程符合开放二室模型,其在犬体内可以迅速消除,可很好地消除光动力学疗法的主要副作用--正常组织的持久光毒反应.

犬血浆中洛伐他汀的LC-MS法快速测定及药代动力学研究

目的:建立犬血浆中洛伐他汀浓度的 LC-MS 测定方法。方法:血浆样品经乙醚提取,采用选择性离子检测方法测定其血药浓度。仪器为岛津 LC-MS 2010四极杆质谱检测器,色谱柱为 MetaChem ODS-5.0μm(150mm×2.1mm);流动相为乙腈-水(85:15,其中水相含500nmol·L^(-1)的醋酸钠)。结果:洛伐他汀的线性范围为0.0421～41.2ng·mL^(-1),方法的绝对回收率为88%～98%,低浓度日内和日间的精密度均小于20%,中、高浓度日内和日间的精密度均小于10%。测定的洛伐他汀普通片在 Beagle 犬体内 T_(1/2)为(2.7±1.1)h;T_(max)为(1.1±0.5)h;C_(max)为(12.34±4.25)ng·mL^(-1);AUC_(0-24)为(36.91±14.13)ng·h·mL^(-1)。结论:该测定方法经全面考察符合血浆样品的测定要求,可以作为临床血药浓度的测定和药代动力学研究的参考。

基于生物质谱的蛋白质定量技术及其在药代动力学研究中的应用

蛋白质定量技术是指对细胞、组织以至整体生物体内的蛋白质表达水平进行全谱定量分析的手段,其在生物过程机制的探索、生物标志物和药物作用靶标的发现及验证等过程中发挥着重要作用。新兴生物质谱技术和数据采集方法的发展为蛋白质定量提供了先进的技术平台,促使了蛋白质研究逐渐从简单定性转变为精确定量。本文综述了基于生物质谱的蛋白分子定量策略及方法,评述了不同方法的特点和适用范围,并阐述了其在药物代谢动力学研究领域,如药物转运体、药物代谢酶的定量和多肽及蛋白类药物的药代动力学研究等方面的应用,为传统的药代动力学研究提供了新的思路与方法。

瑞格列奈对吡格列酮及其主要活性代谢物在健康人体的药代动力学影响

目的研究瑞格列奈(短效促胰岛素释放剂)对吡格列酮(胰岛素增敏剂)及其主要活性代谢物在健康人体中的药代动力学影响。方法采用随机交叉试验设计,将12名男性健康受试者随机分为吡格列酮单药给药组和吡格列酮与瑞格列奈片合并给药组,清洗期为2周。采用HPLC-MS法测定吡格列酮及其代谢产物M-Ⅳ、M-Ⅲ的血药浓度。结果合并瑞格列奈给药后,PIO、M-Ⅳ、M-Ⅲ的AUC0-τ分别为(6.15±2.71),(12.88±5.16),(5.72±3.06)μg.h.mL-1;Cm ax分别为(626.77±208.21),(272.24±153.76),(132.04±78.42)ng·mL-1;tm ax分别为1.0(0.5～3.0),12.0(12.0～72.0),12.0(12.0～15.0)h,与吡格列酮单药给药组相比,均无显著性改变(P>0.05)。吡格列酮单药和吡格列酮与瑞格列奈片合用在健康人体的药代动力学行为相近。结论瑞格列奈对吡格列酮及其主要活性代谢物在健康人体的药代动力学无显著影响。

HPLC-MS法测定Beagle犬血浆中槐果碱的浓度及其药代动力学研究

应用本研究组已经建立的LC-MS方法,采用双周期自身交叉设计研究Beagle犬灌胃、静注给予槐果碱后的药代动力学,结果显示两种给药方式下槐果碱的药时曲线均符合二房室模型,消除半衰期基本一致,分别为(2.75±0.17)h和(2.28±0.10)h;研究还表明,该药吸收快、体内分布快,Beagle犬灌胃的绝对生物利用度为45.28%。

基于细胞药代动力学的中西药相互作用研究新思路与新方法

中西药联用已成为国内外临床治疗的普遍现象,但相关评判尚缺乏完备的科学数据支撑。传统的药物代谢动力学研究局限于血浆药物浓度,无法阐明药物在靶部位的代谢处置过程,由此造成血浆药动-药效不相关的局限性。近年来,越来越多的研究着眼于定量分析药物经血液进入靶组织/靶细胞/亚细胞器的药代动力学过程,将药代动力学研究从“宏观”的血浆深入到“微观”的细胞层面。主要总结了基于细胞药代动力学的中西药相互作用研究新思路和新方法,为中西药联用增效减毒的机制研究和临床联合用药的应用提供依据。

高效液相色谱-串联质谱法测定犬血浆中的普瑞巴林及在药代动力学中的应用

目的：建立并验证一种测定犬血浆中普瑞巴林浓度的高效、灵敏、快速的液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）检测方法,并应用于Beagle犬单次口服给予普瑞巴林胶囊后体内的药代动力学研究。方法：犬血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,使用Agilent ZORBAX-C18（2.1 mm×150 mm,3.5μm）色谱柱,以含0.1%甲酸的水和甲醇作为流动相进行梯度洗脱。采用电喷雾离子源（ESI）正离子模式下多反应监测模式（MRM）分析测定,普瑞巴林及非那西汀的离子对分别为[M＋H]＋m/z 160.4→83.3和[M＋H]＋m/z 180.3→110.2。6只Beagle犬口服给予150 mg普瑞巴林胶囊后采集不同时间点血样,用建立的LC-MS/MS分析方法进行测定。结果：普瑞巴林在30~10 000 ng/m L范围内线性良好（r=0.999 5）,提取回收率为101.2%~102.9%,批内与批间精密度符合生物样品的分析要求。Beagle犬口服给予150 mg普瑞巴林胶囊后,Cmax为（25 637.5±2 571.8）ng/m L,Tmax为（1.0±0.5）h,t1/2为（4.4±0.6）h,MRT为（6.7±0.7）h。结论：此方法成功地应用于单次口服给予Beagle犬150 mg普瑞巴林胶囊的药代动力学研究。

代谢组学技术在中医药关键科学问题研究中的应用前景分析

代谢组是生物体整体功能状态的"生化表型",具有"终点放大"的特征,这些特质使得代谢组学在中医药系列关键科学问题研究中具有突出优势。中医理论的整体观与"组学"强调的从整体角度研究生物体的功能水平相一致。随着基于核磁、质谱以及化学计量学软件的代谢组学分析技术平台的不断发展,代谢组学已在中医药现代研究中得到了广泛应用,包括中医证候本质、中药作用机制、中药整体药效评价和安全性评价、中药质量控制与中药资源研究等。本文在综述国内中医药领域代谢组学研究进展的基础上,对其应用前景和存在问题进行了扼要评析。

雷公藤内酯醇在Beagle犬体内的药代动力学

雷公藤内酯醇（triptolide，TP）是雷公藤的主要有效成分之一。研究不同剂量TP在Beagle犬灌胃给药时的绝对生物利用度和药代动力学，可望为其临床研究提供参考。以泼尼松龙作内标，用乙酸乙酯液液萃取，建立LC—APCI／MS选择性离子监测方法测定血浆TP浓度。Beagle犬分别静脉注射TP0．05mg·kg^-1、灌胃TP0．05，0．08和0．1mg·kg^-1。进行药代动力学和绝对生物利用度研究。结果表明，TP在1—200ng·mL^-1呈良好线性关系（r=0．9997），批内和批间精密度RSD均小于10％，准确度在95．0％～105．0％，提取回收率大于75％。静注0．05mg·kg^-1 TP后，T1/2β为（2．5±0．8）h。3个剂量灌胃组，Tmax,T1/2α和T1/2β,经检验无统计学差异。AUC和Cmax与剂量之间线性相关。灌胃0．05mg·kg^-1后，TP在Beagle犬体内绝对生物利用度为（75±17）％。可见，LC—APCI／MS法灵敏、可靠、专属性强，可用来测定Beagle犬血浆TP的浓度；TP在Beagle犬体内消除较快，灌胃给药生物利用度较高。

药代动力学新技术与新理论的研究进展

近年来,由于分析技术的进步以及研究思路的开拓,药代动力学研究的新理论、新方法不断涌现。目前,药代动力学研究对象和研究内容逐渐从宏观(血浆和组织)拓展到微观(细胞药代动力学)、从单组分体内过程(化学药的单一组分)跨越至复杂组分体内过程(中药多组分药代动力学)、从单靶点(药物的靶向分布)延伸到多靶点(内源性物质的整体调节,即代谢组学)。本文将从细胞药代动力学、中药药代动力学和代谢组学3个方面阐述药代动力学的最新研究进展。