不同浓度CB对小鼠纺锤体移植后重构卵细胞骨架及囊胚发育影响的研究

目的探讨不同浓度细胞松弛素B(cytochalasin B,CB)对小鼠纺锤体移植后重构卵细胞骨架及胚胎发育的影响,筛选出更优的CB浓度。方法8周的C57BL/6雌鼠卵,使用常规剂量、低剂量、中剂量和高剂量的CB做小鼠纺锤体移植,统计小鼠纺锤体移植效率;统计重构小鼠卵体外受精的(in vitro fertilization,IVF)受精率、卵裂率、囊胚率、孵化率;对各组囊胚行免疫荧光染色,荧光显微镜观察计数;重构小鼠卵行免疫荧光染色,共聚焦显微镜观察细胞骨架并分析。结果①低剂量组、中剂量组、高剂量组与常规组相比,小鼠纺锤体移植效率差异无统计学意义(P>0.05)。②高剂量组的受精率低于常规组(P<0.05);高剂量组的囊胚率、孵化率低于常规组、中剂量组(P<0.05)。③高剂量组的囊胚细胞总数少于常规组(P<0.05),中剂量组的囊胚细胞总数多于常规组(P<0.05)。④低剂量组、中剂量组、高剂量组和常规组相比,不同时间重构小鼠卵微丝阳性比率差异无统计学意义(P>0.05);不同时间各组微丝的平均光密度值,组间比较差异有统计学意义(P<0.05),时间点间比较差异有统计学意义(P<0.05),组间的时间变化趋势差异有统计学意义(P<0.05),即不同浓度CB和不同观察时间对小鼠重构卵细胞骨架恢复情况均有影响,且差异有统计学意义。结论本研究选取的CB浓度范围内,中剂量组优于常规组。