三种丙型肝炎病毒转基因小鼠系的同时制备

为研究丙型肝炎病毒的致病致瘤机理及结构基因与非结构基因３区（ＮＳ３）的功能及其在ＨＣＶ感染致病中的作用，建立一个ＨＣＶ分子治疗的动物模型，构建了含金属硫蛋白启动子和ＨＣＶ结构基因或ＮＳ３基因的质粒，将两者等量混合后用显微注射法接种于昆明白小鼠受精卵内制备转基因小鼠．通过ＰＣＲ筛选获得三种整合ＨＣＶ结构基因或／和ＮＳ３基因的首建鼠．结果表明：ａ注射后卵存活率与仔鼠出生率分别为８１％、３０％；ｂ检测６０只Ｇ０代小鼠，结构基因整合鼠６只（１０％），ＮＳ３基因整合鼠４只（６７％），双基因整合鼠９只（１５％），总整合率为３１７％；ｃＲＴＰＣＲ法检测阳性鼠肝中有靶基因ｍＲＮＡ的转录；ｄ４只首建鼠与正常鼠回交获得３８只Ｇ１小鼠，其中２０只为整合鼠，整合率为５２６％；ｅ转基因鼠表型迄今无明显异常．表明一次显微注射同时获得了三种整合ＨＣＶ结构基因或／和ＮＳ３基因的转基因小鼠．